| 摘要 | 第1-3页 |
| Abstract | 第3-7页 |
| 英文缩写词表 | 第7-9页 |
| 实验室主要设备列表 | 第9-10页 |
| MS、1/2MS培养基基本配方 | 第10-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-21页 |
| 1 棉属植物及其药用概述 | 第11-15页 |
| ·棉花的植物学分类 | 第11页 |
| ·棉花的本草学考证 | 第11-12页 |
| ·棉酚的研究进展 | 第12-14页 |
| ·棉花色素腺体的研究进展 | 第14页 |
| ·棉酚与棉花色素腺体的关系 | 第14-15页 |
| 2 锌结合蛋白研究 | 第15-16页 |
| ·金属结合蛋白 | 第15页 |
| ·锌及锌结合蛋白 | 第15-16页 |
| 3 拟南芥研究 | 第16-17页 |
| 4 植物遗传转化方法 | 第17页 |
| ·遗传转化方法的分类 | 第17页 |
| ·农杆菌介导法 | 第17页 |
| 5 RNA干涉机制及其该技术在棉花中的应用 | 第17-19页 |
| ·RNA干涉机制 | 第17-18页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第18-19页 |
| 6 本研究的目的及意义 | 第19页 |
| 7 本研究的实验方案 | 第19-21页 |
| 第二章 棉属植物锌结合蛋白基因的克隆及结构分析 | 第21-32页 |
| 1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2 实验方法 | 第22-29页 |
| ·棉花腺体形成时期总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| ·棉花ZnBP基因的克隆与序列分析 | 第24-27页 |
| ·棉花基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·棉花基因组DNA的扩增及结构分析 | 第27-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-31页 |
| ·棉花腺体形成时期总RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第29页 |
| ·棉花ZnBP基因的克隆与序列分析 | 第29-30页 |
| ·棉花基因组DNA的扩增及结构分析 | 第30-31页 |
| 4 小结 | 第31-32页 |
| 第三章 棉属植物锌结合蛋白基因的原核表达 | 第32-40页 |
| 1 材料 | 第32-34页 |
| 2 实验方法 | 第34-37页 |
| ·pET-28-ZnBP原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·pET-28-ZnBP的诱导表达 | 第35-36页 |
| ·ZnBP的SDS-PAGE电泳检测及western杂交验证 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-39页 |
| ·pET-28-ZnBP原核表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·pET-28-ZnBP的诱导表达及SDS-PAGE电泳 | 第38-39页 |
| ·western-blot杂交检测 | 第39页 |
| 4 小结 | 第39-40页 |
| 第四章 棉属植物锌结合蛋白基因转化拟南芥研究 | 第40-49页 |
| 1 实验材料 | 第40-41页 |
| 2 实验方法 | 第41-46页 |
| ·pCAMBIA2300-ZnBP超表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·感受态农杆菌的制备及pCAMBIA2300-ZnBP重组载体的转化 | 第43页 |
| ·拟南芥的培养及农杆菌侵染实验 | 第43-44页 |
| ·拟南芥T_1代种子的筛选及PCR验证 | 第44-45页 |
| ·Northern blot分析转基因植株中ZnBP基因的表达 | 第45-46页 |
| ·转基因植株与野生型植株的表型观察 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-48页 |
| ·pCAMBIA2300-ZnBP超表达载体的构建 | 第46页 |
| ·转基因拟南芥T_1代植株的筛选及PCR验证 | 第46-47页 |
| ·转基因拟南芥纯合体Northern blot杂交检测 | 第47-48页 |
| ·转基因植株与野生型植株的表型观察 | 第48页 |
| 4 小结 | 第48-49页 |
| 第五章 棉属植物锌结合蛋白基因干涉载体的构建 | 第49-59页 |
| 1 实验材料 | 第49页 |
| 2 实验方法 | 第49-54页 |
| ·引物的设计及靶序列的分离 | 第49-50页 |
| ·含靶序列正反向重复结构的RNAi双元载体系统构建 | 第50-53页 |
| ·构建含靶序列正反向结构的pCAMBIA2300-35S-OCS-RNAi-ZnBP×2表达载体 | 第53-54页 |
| ·pCAMBIA2300-35S-OCS-RNAi-ZnBP×2表达载体转化根癌农杆菌GV3101 | 第54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-58页 |
| ·含靶序列正反向重复结构的RNAi双元载体系统构建 | 第54-57页 |
| ·构建含靶序列正反向结构的表达载体pCAMBIA2300-35S-OCS-RNAi-ZnBP×2 | 第57-58页 |
| ·pCAMBIA2300-35S-OCS-RNAi-ZnBP×2表达载体转化根癌农杆菌GV3101 | 第58页 |
| 4 小结 | 第58-59页 |
| 第六章 讨论与结语 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 后置部分 | 第69-70页 |
