| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| ·引言 | 第9-10页 |
| ·酸性土壤中铝毒害概况 | 第10页 |
| ·植物耐铝性研究现状和进展 | 第10-12页 |
| ·铝在植物根系的作用位点 | 第10-11页 |
| ·植物耐铝性机理研究 | 第11-12页 |
| ·植物耐铝基因的克隆 | 第12页 |
| ·分子标记的发展 | 第12-13页 |
| ·cDNA-AFLP技术及其应用 | 第13-16页 |
| ·cDNA-AFLP技术的创建 | 第13页 |
| ·cDNA-AFLP技术的原理 | 第13页 |
| ·cDNA-AFLP的技术特点及优势 | 第13-15页 |
| ·cDNA-AFLP技术的应用方向及领域 | 第15-16页 |
| ·反式Northern blot技术 | 第16-17页 |
| ·反式Northern blot技术概述 | 第16-17页 |
| ·反式Northern blot技术的基本流程 | 第17页 |
| ·反式Northern blot的技术优势 | 第17页 |
| ·RACE技术及其研究应用 | 第17-20页 |
| ·RACE技术的原理及方法 | 第17-18页 |
| ·传统RACE的优化技术 | 第18-20页 |
| ·RACE技术的研究领域 | 第20页 |
| ·研究的目的、意义及试验设计 | 第20-22页 |
| 第二章 白菜耐铝基因型的筛选 | 第22-26页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·试验材料 | 第22页 |
| ·日本园式培养液的配制 | 第22页 |
| ·试验方法 | 第22-23页 |
| ·自交系种子的日本园式培养和根指标的测定 | 第22-23页 |
| ·苏木精染色 | 第23页 |
| ·结果与分析 | 第23-24页 |
| ·五种白菜自交系根净增长度和相对伸长率测定 | 第23页 |
| ·五种白菜白交系根尖苏木精染色结果 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 白菜耐铝相关基因的cDNA-AFLP分析 | 第26-42页 |
| ·试验材料 | 第26页 |
| ·材料来源及生长环境 | 第26页 |
| ·主要试验设备 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·试验方法 | 第26-32页 |
| ·白菜根尖总RNA的提取与检测 | 第26-27页 |
| ·RNA反转录合成sscDNA | 第27页 |
| ·dscDNA的合成 | 第27-28页 |
| ·dscDNA的酶切和接头连接 | 第28页 |
| ·cDNA-AFLP的预扩增反应 | 第28-29页 |
| ·选择性模板的制备和选择性扩增反应 | 第29-30页 |
| ·产物的聚丙烯酰胺变性凝胶电泳分析 | 第30-31页 |
| ·差异片段的回收和PCR重扩增 | 第31页 |
| ·重扩产物的回收纯化及反Northern blot验证 | 第31-32页 |
| ·阳性差异片段的测序及序列同源性搜索比对 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-39页 |
| ·白菜根尖总RNA的完整性及纯度检测 | 第32-33页 |
| ·dscDNA的琼脂糖凝胶电泳分析 | 第33-34页 |
| ·双酶切及连接产物的琼脂糖凝胶电泳分析 | 第34-35页 |
| ·cDNA-AFLP的预扩增产物检测 | 第35页 |
| ·不同铝胁迫时期白菜基因表达差异分析 | 第35-36页 |
| ·TDFs回收重扩产物的纯化及反Northern验证 | 第36-37页 |
| ·TDFs测序及BLAST序列同源性比对 | 第37-39页 |
| ·结论与讨论 | 第39-42页 |
| ·cDNA-AFLP技术适用性探讨及注意事项 | 第39-40页 |
| ·白菜耐铝相关基因的功能探讨 | 第40-42页 |
| 第四章 RACE法构建A-A10T8 cDNA全长及克隆分析 | 第42-50页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·材料和试剂 | 第42页 |
| ·RACE技术相关引物 | 第42页 |
| ·试验方法 | 第42-43页 |
| ·RACE特异性引物的设计 | 第42-43页 |
| ·RACE技术中sscDNA的合成 | 第43页 |
| ·RACE技术的巢式PCR扩增 | 第43页 |
| ·PCR扩增产物的测序及分析 | 第43页 |
| ·结果与分析 | 第43-48页 |
| ·A-A10T8 cDNA 3’末端电泳检测及序列获得 | 第43-44页 |
| ·A-A10T8 cDNA 5’末端电泳检测及序列获得 | 第44-45页 |
| ·A-A10T8 cDNA全长序列的获得 | 第45-47页 |
| ·A-A10T8全长序列的生物信息学分析 | 第47-48页 |
| ·结论和讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 结论与展望 | 第50-52页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| ·展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 附录一 | 第58-59页 |
| 附录二 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
