摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
1 前言 | 第10-22页 |
·研究的目的和意义 | 第10页 |
·前人的研究进展 | 第10-19页 |
·褐飞虱宏观生物学研究进展 | 第10-11页 |
·褐飞虱微观生物学研究进展 | 第11-12页 |
·褐飞虱人工饲料喂食系统研究进展 | 第12-13页 |
·RNAi技术的研究进展 | 第13-18页 |
·V-ATPase的研究进展 | 第18-19页 |
·褐飞虱基因沉默研究进展 | 第19-20页 |
·本研究的创新点 | 第20-21页 |
·技术路线 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-37页 |
·材料 | 第22-23页 |
·供试昆虫 | 第22页 |
·主要试剂 | 第22页 |
·主要仪器设备 | 第22-23页 |
·褐飞虱人工饲料的配制及褐飞虱的人工饲喂 | 第23-25页 |
·dsRNA的设计 | 第25-32页 |
·GFP的序列及ds-GFP的设计 | 第25页 |
·21E01的序列及ds1-21E01,ds2-21E01和ds3-21E01的设计 | 第25-27页 |
·设计引物 | 第27-29页 |
·dsRNA的合成 | 第29-32页 |
·dsRNA在不同介质溶液中的稳定性 | 第32页 |
·褐飞虱唾液对dsRNA完整性影响 | 第32页 |
·dsRNA的喂食 | 第32页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第32-36页 |
·技术路线 | 第32-33页 |
·具体试验方法 | 第33-34页 |
·反转录 | 第34-35页 |
·Actin1的扩增 | 第35页 |
·qRT-PCR | 第35-36页 |
·qRT-PCR的结果分析方法 | 第36页 |
·数据分析 | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-46页 |
·褐飞虱人工饲料的配制 | 第37页 |
·完全取食人工饲料褐飞虱的存活率 | 第37-38页 |
·dsRNA的合成 | 第38-39页 |
·合成dsRNA的DNA模板检测结果 | 第38-39页 |
·dsRNA检测结果 | 第39页 |
·dsRNA在不同介质溶液中的稳定性 | 第39-40页 |
·褐飞虱唾液对dsRNA完整性影响 | 第40页 |
·喂食ds1-21E01,ds2-21E01和ds3-21E01对褐飞虱死亡率的影响 | 第40-41页 |
·取食dsRNA后褐飞虱体内21E01的分析 | 第41-44页 |
·取食dsRNA后褐飞虱总RNA检测结果 | 第41-42页 |
·Actin1扩增结果 | 第42-43页 |
·21E01的基因沉默 | 第43-44页 |
·取食dsRNA的褐飞虱后代体内21E01的分析 | 第44-46页 |
·取食dsRNA的褐飞虱后代总RNA质量检测 | 第45页 |
·Actinl扩增结果 | 第45-46页 |
·21E01的基因沉默 | 第46页 |
4 讨论 | 第46-50页 |
·褐飞虱人工饲料喂食 | 第46-47页 |
·褐飞虱的RNAi干涉技术体系 | 第47-50页 |
·21E01基因的选择 | 第47页 |
·dsRNA导入昆虫体内方法的比较 | 第47-48页 |
·qRT-PCR技术的选择 | 第48页 |
·不同dsRNA干扰效率的比较 | 第48-50页 |
5 参考文献 | 第50-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
附录 | 第61页 |