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基于dsRNA喂食的褐飞虱RNA干涉技术体系构建

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
1 前言第10-22页
   ·研究的目的和意义第10页
   ·前人的研究进展第10-19页
     ·褐飞虱宏观生物学研究进展第10-11页
     ·褐飞虱微观生物学研究进展第11-12页
     ·褐飞虱人工饲料喂食系统研究进展第12-13页
     ·RNAi技术的研究进展第13-18页
     ·V-ATPase的研究进展第18-19页
   ·褐飞虱基因沉默研究进展第19-20页
   ·本研究的创新点第20-21页
   ·技术路线第21-22页
2 材料与方法第22-37页
   ·材料第22-23页
     ·供试昆虫第22页
     ·主要试剂第22页
     ·主要仪器设备第22-23页
   ·褐飞虱人工饲料的配制及褐飞虱的人工饲喂第23-25页
   ·dsRNA的设计第25-32页
     ·GFP的序列及ds-GFP的设计第25页
     ·21E01的序列及ds1-21E01,ds2-21E01和ds3-21E01的设计第25-27页
     ·设计引物第27-29页
     ·dsRNA的合成第29-32页
   ·dsRNA在不同介质溶液中的稳定性第32页
   ·褐飞虱唾液对dsRNA完整性影响第32页
   ·dsRNA的喂食第32页
   ·实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第32-36页
     ·技术路线第32-33页
     ·具体试验方法第33-34页
     ·反转录第34-35页
     ·Actin1的扩增第35页
     ·qRT-PCR第35-36页
     ·qRT-PCR的结果分析方法第36页
   ·数据分析第36-37页
3 结果与分析第37-46页
   ·褐飞虱人工饲料的配制第37页
   ·完全取食人工饲料褐飞虱的存活率第37-38页
   ·dsRNA的合成第38-39页
     ·合成dsRNA的DNA模板检测结果第38-39页
     ·dsRNA检测结果第39页
   ·dsRNA在不同介质溶液中的稳定性第39-40页
   ·褐飞虱唾液对dsRNA完整性影响第40页
   ·喂食ds1-21E01,ds2-21E01和ds3-21E01对褐飞虱死亡率的影响第40-41页
   ·取食dsRNA后褐飞虱体内21E01的分析第41-44页
     ·取食dsRNA后褐飞虱总RNA检测结果第41-42页
     ·Actin1扩增结果第42-43页
     ·21E01的基因沉默第43-44页
   ·取食dsRNA的褐飞虱后代体内21E01的分析第44-46页
     ·取食dsRNA的褐飞虱后代总RNA质量检测第45页
     ·Actinl扩增结果第45-46页
     ·21E01的基因沉默第46页
4 讨论第46-50页
   ·褐飞虱人工饲料喂食第46-47页
   ·褐飞虱的RNAi干涉技术体系第47-50页
     ·21E01基因的选择第47页
     ·dsRNA导入昆虫体内方法的比较第47-48页
     ·qRT-PCR技术的选择第48页
     ·不同dsRNA干扰效率的比较第48-50页
5 参考文献第50-60页
致谢第60-61页
附录第61页

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