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重组人凝血因子Ⅷ转基因兔的建立及初步检测

中文摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
符号说明第11-13页
文献综述第13-34页
 一、转基因动物的研究进展第13-20页
  1. 转基因动物制备的方法第13-16页
   ·原核期胚胎的显微注射第14页
   ·胚胎干细胞介导法第14-15页
   ·精子载体介导法第15页
   ·逆转录病毒感染法第15-16页
   ·体细胞核移植转基因法第16页
   ·其他第16页
  2. 转基因动物应用第16-18页
   ·在人类疾病模型方面的应用第16-17页
   ·生产可供人类移植的器官第17页
   ·改良动物品种及其生产性能第17页
   ·转基因技术在生物医药产业方面的应用第17-18页
  3. 转基因动物研究中出现的问题第18-19页
   ·制作转基因动物的成功率和成活率低第18页
   ·外源基因在转基因动物中表达水平低第18页
   ·外源基因在宿主基因组中的行为难以控制第18-19页
   ·转基因动物的安全性问题第19页
  4. 动物乳腺生物反应器的应用第19-20页
 二、FⅧ与甲型血友病第20-28页
  1. 甲型血友病的病因病理第21-23页
   ·FⅧ基因和蛋白的结构及功能第21-22页
   ·FⅧ基因突变的类型第22-23页
  2. 甲型血友病的临床表现第23-24页
   ·甲型血友病的临床分型第23页
   ·甲型血友病的临床表现第23-24页
  3. 甲型血友病的诊断第24-25页
   ·实验室检查第24页
   ·基因诊断第24-25页
  4. 甲型血友病的治疗第25-27页
   ·预防出血第25-26页
   ·局部止血第26页
   ·药物治疗第26页
   ·替代疗法第26页
   ·基因治疗第26-27页
  5. 甲型血友病的预防保健第27页
  6. 结语第27-28页
 参考文献第28-34页
研究内容一第34-58页
 1. 实验材料第34-36页
 2. 实验方法第36-51页
   ·溶液的配制第36-38页
   ·重组质粒pCR-αLA的构建第38-42页
   ·重组质粒pCR-αLA/hFⅧ-5的构建第42-46页
   ·重组质粒pCR-αLA/hFⅧ-5(△B)的构建第46-51页
 3. 实验结果第51-55页
   ·αLA启动子的PCR扩增第51-52页
   ·αLA启动子的PCR产物与T-protruding pCR3载体的连接第52-53页
   ·pCR-αLA/hFⅧ-5重组质粒的酶切鉴定第53页
   ·rhFⅧ A domain的扩增第53-54页
   ·rhFⅧ C domain基因的扩增第54-55页
   ·重组质粒pCR-α LA/hFⅧ-5(△B)的构建第55页
 4. 讨论第55-57页
 参考文献第57-58页
研究内容二第58-74页
 1. 实验材料第58-59页
 2. 实验方法第59-66页
   ·原核期供体兔胚胎的采集第59-60页
   ·外源基因原核显微注射第60-62页
   ·胚胎移植第62-64页
   ·F0代仔兔的饲养管理第64-65页
   ·F0代仔兔的整合检测第65-66页
   ·整合阳性仔兔的表达检测第66页
 3. 结果第66-68页
 4. 讨论第68-72页
 参考文献第72-74页
致谢第74-75页

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