论文摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-11页 |
第一章 综述 | 第11-19页 |
第一节 胚胎干细胞简介 | 第11-12页 |
第二节 PGC简介 | 第12-15页 |
第三节 DAZ家族基因简介 | 第15-17页 |
第四节 ASZ1基因介绍 | 第17-19页 |
第二章 实验材料和方法 | 第19-49页 |
第一节 实验材料 | 第19-22页 |
1. 细胞株 | 第19页 |
2. 细胞培养 | 第19页 |
3. 质粒和shRNA序列 | 第19页 |
4. 引物序列 | 第19-20页 |
5. 实验试剂和抗体 | 第20-21页 |
6. 实验仪器 | 第21-22页 |
第二节 实验方法 | 第22-49页 |
1. 质粒的小量抽提技术 | 第22-23页 |
2. 质粒的大量抽提技术 | 第23-24页 |
3. 免疫共沉淀技术 | 第24-25页 |
4. 双分子荧光互补分析技术 | 第25-26页 |
5. Western-blot技术 | 第26-38页 |
6. 逆转录PCR技术和实时荧光定量PCR技术 | 第38-42页 |
7. 稳转细胞株的建立与筛选 | 第42-45页 |
8. 流式细胞技术(Fluorescence Activating Cell Sorter) | 第45-46页 |
9. 碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AP)染色 | 第46-47页 |
10. Mito-Tracker染色 | 第47-49页 |
第三章 实验结果与分析 | 第49-60页 |
第一节 ASZ1线粒体定位对其功能的影响 | 第49-53页 |
·ASZ1在Hela细胞中的定位 | 第49-50页 |
·当删除ASZ1基因的不同结构域后定位的变化 | 第50-52页 |
·当删除ASZ1基因的不同结构域后对其功能的影响 | 第52-53页 |
第二节 ASZ1与Dazl的相互作用对其功能的影响 | 第53-60页 |
·ASZ1可以与DAZL基因相互结合 | 第53-54页 |
·ASZ1通过SAM结构域与DAZL基因相互结合 | 第54-55页 |
·SAM结构域缺失的ASZ1突变体无促进PGC生成的功能 | 第55-56页 |
·ASZ1和DAZL协同作用对促进PGC生成功能的影响 | 第56-60页 |
第四章 总结与讨论 | 第60-61页 |
附录 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |