摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
1 前言 | 第11-19页 |
·国内外研究现状 | 第11-18页 |
·甘蔗对低温胁迫的响应 | 第11-14页 |
·低温对叶绿体结构及生理代谢的影响 | 第14页 |
·植物叶绿体蛋白质组的研究现状 | 第14-16页 |
·实时荧光定量PCR技术应用概况 | 第16-17页 |
·研究展望 | 第17-18页 |
·试验研究的目的和意义 | 第18-19页 |
·技术路线 | 第19页 |
2 低温胁迫下甘蔗叶绿体蛋白质的差异表达 | 第19-37页 |
·材料与方法 | 第20-26页 |
·试验材料 | 第20页 |
·材料的处理与采样 | 第20-21页 |
·主要仪器设备与试剂 | 第21-22页 |
·甘蔗叶绿体的提取与纯化 | 第22-23页 |
·叶绿体完整性的检测 | 第23页 |
·甘蔗叶绿体蛋白质的制备 | 第23页 |
·蛋白质的定量 | 第23页 |
·甘蔗叶绿体蛋白质单向电泳检测 | 第23-24页 |
·蛋白质双向电泳、凝胶成像 | 第24-26页 |
·结果与分析 | 第26-35页 |
·叶绿体的完整性的检测 | 第26页 |
·叶绿体蛋白质的定量结果 | 第26-27页 |
·叶绿体蛋白质的单向SDS-PAGE检测及图谱差异表达分析 | 第27-28页 |
·低温胁迫对苗期甘蔗叶绿体蛋白质组分相对含量的分析 | 第28-29页 |
·叶绿体蛋白质的双向IEF/SDS-PAGE检测及分析 | 第29-31页 |
·差异蛋白点的相对表达量 | 第31-32页 |
·差异蛋白质的质谱分析 | 第32-33页 |
·差异蛋白质的功能分析 | 第33-35页 |
·讨论 | 第35-36页 |
·小结 | 第36-37页 |
3 叶绿体差异蛋白质基因克隆及其差异表达 | 第37-53页 |
·材料与方法 | 第37-43页 |
·试验材料及采样 | 第37页 |
·试剂及耗材 | 第37-38页 |
·差异蛋白质的引物设计与合成 | 第38页 |
·甘蔗叶片总RNA的提取 | 第38页 |
·RNA的逆转录合成CDNA | 第38-39页 |
·差异蛋白质克隆 | 第39-40页 |
·目的DNA片段的胶回收 | 第40-41页 |
·目的DNA的连接、转化和菌落筛选 | 第41-42页 |
·序列分析 | 第42页 |
·目的片段的实时荧光定量PCR | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-51页 |
·甘蔗叶片总RNA提取结果 | 第43页 |
·目的基因的克隆、胶回收及菌液检测 | 第43-44页 |
·目的基因的转化、连接及菌液检测的结果 | 第44页 |
·目的基因片段的测序结果及分析 | 第44-47页 |
·目的基因的实时荧光定量PCR分析 | 第47-51页 |
·讨论 | 第51-53页 |
·小结 | 第53页 |
4 总结论 | 第53-54页 |
·低温胁迫对甘蔗叶绿体蛋白质的影响 | 第53-54页 |
·差异蛋白质基因的克隆 | 第54页 |
·低温胁迫对差异蛋白质mRNA水平表达的影响 | 第54页 |
5 下一步工作设想 | 第54-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-64页 |
附录 | 第64页 |