| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-12页 |
| 引言 | 第12-24页 |
| ·禽流感概述 | 第12-15页 |
| ·禽流感流行的历史和现状 | 第12-13页 |
| ·禽流感病毒的生物学特征 | 第13-15页 |
| ·NS1 蛋白的简介 | 第15-21页 |
| ·NS1 蛋白与宿主细胞内的多种蛋白质相互作用 | 第16-20页 |
| ·NS1 蛋白与宿主细胞凋亡的关系 | 第20-21页 |
| ·NOLC1 蛋白的简介 | 第21页 |
| ·研究 NS1 与 NOLC1 蛋白相互作用对宿主细胞凋亡影响的意义 | 第21-22页 |
| ·本项目研究目的及内容 | 第22-24页 |
| 第1章 NS1 蛋白表达载体及 NOLC1 过表达载体的构建与表达 | 第24-52页 |
| ·前言 | 第24-25页 |
| ·材料 | 第25-26页 |
| ·细胞株、载体、细菌菌株 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26页 |
| ·溶液配制（见附录 A） | 第26页 |
| ·主要仪器及耗材(见附录 B) | 第26页 |
| ·方法 | 第26-40页 |
| ·pDsRed-N1-NS1 真核表达载体的构建及表达 | 第26-35页 |
| ·pDsRed-N1-NOLC1 真核表达载体的构建及表达 | 第35-40页 |
| ·结果 | 第40-51页 |
| ·真核表达载体 pDsRed-N1-NS1 的构建 | 第40-45页 |
| ·pDsRed-N1-NS1 真核表达载体在 A549 细胞中的表达 | 第45-46页 |
| ·真核表达载体 pDsRed-N1-NOLC1 的构建 | 第46-50页 |
| ·pDsRed-N1-NOLC1 真核表达载体在 A549 细胞中的表达 | 第50-51页 |
| ·分析与讨论 | 第51-52页 |
| 第2章 筛选及检测 NOLC1 SHRNA PLASMID 干扰效率 | 第52-64页 |
| ·前言 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第53-54页 |
| ·细胞株、载体、细菌菌株 | 第53-54页 |
| ·主要试剂 | 第54页 |
| ·溶液配制（见附录 A） | 第54页 |
| ·主要仪器及耗材（见附录 B） | 第54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·NOLC1 shRNA Plasmid 在 A549 细胞中的表达 | 第54-55页 |
| ·检测干扰载体的靶向沉默效率 | 第55-56页 |
| ·Western bolt 检测 pGPU6/GFP/Neo-shRNA-4 的干扰效率 | 第56-57页 |
| ·统计学方法 | 第57页 |
| ·结果 | 第57-63页 |
| ·NOLC1 shRNA Plasmid 在 A549 细胞中的表达 | 第57-58页 |
| ·筛选靶向沉默效率最高的干扰载体 | 第58-61页 |
| ·Western bolt 检测 pGPU6/GFP/Neo-shRNA-4 的干扰效率 | 第61-63页 |
| ·讨论 | 第63-64页 |
| 第3章 NS1 与宿主蛋白 NOLC1 相互作用对 A549 凋亡的影响 | 第64-78页 |
| ·前言 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第65页 |
| ·细胞株、载体、细菌菌株 | 第65页 |
| ·主要试剂 | 第65页 |
| ·溶液配制（见附录 A） | 第65页 |
| ·主要仪器及耗材（见附录 B） | 第65页 |
| ·方法 | 第65-68页 |
| ·Hoechst33258 荧光染色定性检细胞凋亡 | 第65-67页 |
| ·Annexin V-APC/PI 双染法流式细胞仪定量检测细胞凋亡 | 第67-68页 |
| ·结果 | 第68-76页 |
| ·激光共聚焦显微镜观察凋亡检测前质粒的转染情况 | 第68-70页 |
| ·Hoechst33258 荧光染色定性检细胞凋亡 | 第70-72页 |
| ·Annexin V-APC/PI 双染法流式细胞仪定量检测细胞凋亡 | 第72-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| 第4章 结论与展望 | 第78-80页 |
| ·结论 | 第78页 |
| ·进一步工作的方向 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 附录 | 第86-92页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文及参加科研情况 | 第92-93页 |
