猪流感病毒H1N1亚型单克隆抗体的制备与胶体金试纸条的研制
| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-28页 |
| ·猪流感简介 | 第13页 |
| ·人类历史上四次流感大流行 | 第13-14页 |
| ·SIV 表面抗原 | 第14-16页 |
| ·血凝素蛋白（HA） | 第14-16页 |
| ·神经氨酸酶（NA） | 第16页 |
| ·猪流感的危害 | 第16-17页 |
| ·对养猪业的危害 | 第16-17页 |
| ·对人类健康的威胁 | 第17页 |
| ·猪流感病毒（SIV）的诊断方法 | 第17-20页 |
| ·根据临床症状初步诊断 | 第17页 |
| ·根据病理剖检变化诊断 | 第17页 |
| ·实验室诊断技术 | 第17-20页 |
| ·SIV 的预防与治疗 | 第20-21页 |
| ·预防 | 第20-21页 |
| ·预防 | 第21页 |
| ·单克隆抗体技术 | 第21-23页 |
| ·单克隆抗体技术的基本原理 | 第21-22页 |
| ·HAT 筛选的原理 | 第22页 |
| ·单克隆抗体的应用 | 第22-23页 |
| ·免疫胶体金概述 | 第23-26页 |
| ·胶体金的基本原理 | 第24页 |
| ·胶体金快速免疫层析法（GICA） | 第24页 |
| ·免疫层析技术在临床检测中的应用 | 第24-25页 |
| ·免疫胶体金技术的优点 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义 | 第26-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-42页 |
| ·材料 | 第28页 |
| ·试剂和仪器 | 第28页 |
| ·试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·试剂的配制 | 第28-30页 |
| ·阿氏液的配制 | 第28页 |
| ·1%鸡红细胞悬液的配制 | 第28-29页 |
| ·0.01MPH7.4PBS 母液（1L） | 第29页 |
| ·10%DMEM 培养基的配制 | 第29页 |
| ·HT 培养基 | 第29页 |
| ·HAT 培养基 | 第29页 |
| ·10%NCTC 培养基 | 第29页 |
| ·ELISA 实验用液 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-42页 |
| ·病毒的增殖（鸡胚尿囊腔培养） | 第30页 |
| ·病毒的血凝与血凝抑制试验检测 | 第30-31页 |
| ·Balb/c 小鼠的免疫 | 第31页 |
| ·骨髓瘤细胞的复苏、培养 | 第31-32页 |
| ·脾细胞的准备 | 第32页 |
| ·细胞融合 | 第32页 |
| ·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第32-35页 |
| ·细胞生长状况观察及换液 | 第35页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选 | 第35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆（有限稀释法亚克隆） | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第36页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第37-38页 |
| ·胶体金的制备 | 第38页 |
| ·胶体金标记抗体最低稳定量的测定 | 第38页 |
| ·胶体金标记抗体的最适 pH | 第38-39页 |
| ·抗体的胶体金标记 | 第39页 |
| ·金标抗体的纯化 | 第39页 |
| ·金标垫的选择及金标抗体包被量的确定 | 第39-40页 |
| ·NC 膜包被单抗和二抗 | 第40页 |
| ·样品垫的选择 | 第40页 |
| ·免疫层析试纸条的组装 | 第40-41页 |
| ·胶体金试纸条的检测 | 第41-42页 |
| 3 结果 | 第42-48页 |
| ·病毒鸡胚扩增结果 | 第42页 |
| ·小鼠免疫后抗体水平的检测 | 第42页 |
| ·间接 ELISA 检测方法的建立 | 第42-43页 |
| ·细胞融合及克隆 | 第43页 |
| ·单克隆抗体鉴定结果 | 第43-46页 |
| ·杂交瘤染色体计数结果 | 第43页 |
| ·单克隆抗体腹水效价测定 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第44页 |
| ·单克隆抗体特异性检测 | 第44-45页 |
| ·抗体抗原位点的测定 | 第45-46页 |
| ·胶体金的研制 | 第46-48页 |
| ·胶体金标记抗体最低稳定量的确定 | 第46页 |
| ·金标抗体结合释放垫及稀释度的选择 | 第46页 |
| ·NC 膜及包被单抗和二抗浓度的确定 | 第46-47页 |
| ·样品垫选择 | 第47页 |
| ·特异性试验 | 第47页 |
| ·灵敏度试验 | 第47页 |
| ·试纸条与 RT-PCR 检测方法的比较 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| ·病毒的扩增 | 第48页 |
| ·免疫原 | 第48页 |
| ·小鼠免疫 | 第48-49页 |
| ·细胞融合 | 第49-50页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第50页 |
| ·蛋白质与胶体金结合的条件 | 第50页 |
| ·与其他检测方法的比较 | 第50-51页 |
| ·试纸条的假阳性问题 | 第51-52页 |
| 5. 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表论文表情况 | 第60页 |
