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籼稻浙恢7954遗传转化体系的优化及其应用

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-10页
缩略词第10-11页
引言第11-13页
1 文献综述第13-26页
   ·转基因研究进展第13-16页
     ·全球转基因作物种植概况第13页
     ·转基因技术的方法第13-15页
       ·PEG法第13-14页
       ·电击法第14页
       ·基因枪法第14页
       ·花粉管通道法第14-15页
       ·农杆菌介导法第15页
       ·其他转化方法第15页
     ·根癌农杆菌介导的遗传转化第15-16页
       ·转化机理第15页
       ·影响农杆菌介导的遗传转化因素第15-16页
   ·转基因作物的生物安全性第16-17页
   ·无选择标记转基因系统第17-19页
     ·常用标记基因第17页
     ·无选择标记转基因植株的获得第17-19页
       ·共转化技术第18页
       ·位点特异性重组系统第18页
       ·玉米Ac/Ds转座子系统第18-19页
       ·MAT载体系统第19页
   ·水稻转基因育种第19-21页
     ·抗除草剂育种第19页
     ·抗虫育种第19-20页
     ·抗病育种第20页
     ·品质改良育种第20-21页
     ·抗逆性育种第21页
     ·功能性育种第21页
   ·转基因植株的检测方法第21-22页
   ·转基因技术的发展前景第22-23页
   ·本研究的选题依据、研究内容、目的及意义第23-26页
     ·选题依据第23页
     ·研究内容第23-25页
       ·转OsLSD1基因第24页
       ·转OsBSR1基因第24页
       ·转Bt基因第24-25页
     ·目的及意义第25-26页
2. 浙恢7954遗传转化体系的建立第26-36页
   ·材料与方法第26-29页
     ·实验材料第26页
       ·植物材料第26页
       ·菌株与质粒第26页
     ·方法第26-29页
       ·浙恢7954成熟胚愈伤组织的诱导第26页
       ·农杆菌的培养第26-27页
       ·农杆菌与愈伤组织的共培养第27页
       ·抗性愈伤组织的筛选第27页
       ·抗性愈伤组织的分化第27页
       ·抗性植株的生根培养第27页
       ·转基因苗的锻炼和移栽第27页
       ·绿色荧光蛋白(GFP)观察与统计方法第27-28页
       ·浙恢7954转基因植株的PCR检测第28-29页
   ·结果与分析第29-36页
     ·诱导培养基对浙恢7954成熟胚愈伤诱导的影响第29-30页
     ·不同培养基对愈伤组织转化效率的影响第30-31页
     ·分化培养基中不同细胞分裂素对浙恢7954愈伤组织再生的影响第31-32页
     ·转基因植株的检测第32-34页
     ·讨论第34-36页
3. 浙恢7954遗传转化体系的应用第36-46页
   ·材料与方法第36-39页
     ·实验材料第36页
       ·植物材料第36页
       ·试剂第36页
       ·菌株与质粒第36页
     ·实验方法第36-39页
       ·含OsLSD1、OsBSR1和Bt基因的一元Ac/Ds转座子无选择标记载体的构建第36-38页
       ·浙恢7954成熟胚愈伤组织的诱导第38页
       ·农杆菌的培养第38页
       ·农杆菌与愈伤组织的共培养第38-39页
       ·抗性愈伤组织的筛选第39页
       ·抗性愈伤组织的分化第39页
       ·抗性愈伤组织的生根培养第39页
       ·转基因植株的PCR检测第39页
       ·绿色荧光蛋白(GFP)观察第39页
   ·结果与分析第39-44页
     ·载体对转化效率和GFP抗性愈伤再生的影响第39-40页
     ·载体对浙恢7954愈伤组织出苗情况的影响第40-41页
     ·GFP荧光观察灯辅助筛选第41-42页
     ·浙恢7954转基因阳性植株检测第42-44页
   ·讨论第44-45页
   ·进一步研究设想第45-46页
4. 无选择标记浙恢7954转基因植株的筛选与鉴定第46-49页
   ·材料与方法第46页
     ·实验材料第46页
       ·植物材料第46页
       ·试剂第46页
     ·实验方法第46页
       ·转基因植株GFP观察第46页
       ·水稻DNA的提取第46页
       ·PCR检测第46页
   ·结果与分析第46-48页
     ·不同转基因株系后代转座频率分析第46-47页
     ·浙恢7954转OsLSD1基因无选择标记单株的筛选与鉴定第47-48页
   ·讨论第48-49页
附录1 主要仪器设备及试剂配制第49-51页
附录2 试验培养基成分及配置第51-54页
附录3 基本实验方法第54-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
已发表的学术论文第64-65页

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