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RecQ解旋酶的动力学机理研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-15页
第一章 文献综述第15-51页
   ·RecQ 解旋酶的生物学特性第16-24页
     ·序列同源性和结构特点第16-20页
     ·RecQ 解旋酶催化的 DNA 解旋第20-21页
     ·解旋机制的背景第21-24页
   ·RecQ 解旋酶的活性特点第24-27页
     ·RecQ 解旋酶 DNA 底物的结构第24-25页
     ·RecQ 解旋酶的单链 DNA 退火活性第25-26页
     ·RecQ 解旋酶具有核酸外切酶活性第26-27页
   ·RecQ 解旋酶的调节机制第27-36页
     ·RecQ 解旋酶的活性调节第27-29页
     ·RecQ 解旋酶作为基因重组的一个调节子第29-31页
     ·RecQ 解旋酶在核酸代谢中的作用第31-34页
     ·RecQ 解旋酶与其它蛋白质的相互作用第34-36页
   ·RecQ 解旋酶突变及相关遗传病的分子机制第36-42页
     ·RecQ 解旋酶突变引起的常见遗传病第36-37页
     ·RecQ 基因缺失突变和 SNP 的变化第37-39页
     ·RecQ 解旋酶突变引起疾病的细胞学机制第39-40页
     ·RecQ 缺陷综合症的机制来源第40-41页
     ·RecQ 解旋酶在肿瘤发生中的作用第41-42页
   ·解旋酶的研究方法第42-46页
     ·解旋酶活性的检测方法第42-44页
     ·解旋机理的研究方法第44-45页
     ·解旋酶的动力学性质第45-46页
   ·本课题产生的背景、研究目的和意义第46-51页
     ·RecQ5 的生化特性和功能研究第46-48页
     ·BLM 的结构特征和细胞学性质第48-51页
第二章 快速停流方法的实验技术第51-61页
   ·快速反应停留技术(stopped-flow method)第51-57页
     ·MOS-450 光谱仪第54-55页
     ·SFM-400 停流装置第55-56页
     ·检测控制元件第56页
     ·自动滴定装置第56-57页
     ·数据记录及分析第57页
   ·结合快速反应停流技术和荧光共振能量转移方法研究解旋酶的动力学机制第57-61页
第三章 RecQ5β解旋酶 DNA 退火动力学特性的研究第61-79页
   ·材料和方法第61-66页
     ·主要试剂和缓冲液第61-62页
     ·DNA 底物的合成第62-63页
     ·RecQ5β 解旋酶样品第63页
     ·荧光滴定第63-64页
     ·退火动力学第64-65页
     ·RecQ5β 解旋酶的解离动力学第65-66页
     ·动力学数据分析第66页
   ·结果与讨论第66-77页
     ·RecQ5β 解旋酶退火动力学过程的实时观测第66-67页
     ·不同磷酸核苷因子状态下 RecQ5β 催化的 DNA 退火动力学特性第67-70页
     ·RecQ5β 稳态 DNA 结合动力学的分析第70-71页
     ·RecQ5 从 ssDNA 上解离动力学的分析第71-72页
     ·RecQ5 催化的非互补 ssDNA 的退火第72-74页
     ·在另一种反应缓冲液中 ATP S 能够抑制 RecQ5 催化的退火反应第74-75页
     ·RecQ5β~(1-662) 催化的 ssDNA 退火第75-77页
   ·结论第77-79页
第四章 RecQ5β 解旋酶 DNA 解旋特性的研究第79-92页
   ·材料和方法第79-82页
     ·主要试剂和缓冲液第79-80页
     ·DNA 底物的合成第80-81页
     ·RecQ5β 解旋酶样品第81页
     ·单转换动力学实验快速解旋动力学过程的测量第81-82页
     ·动力学数据分析第82页
   ·结果第82-88页
     ·RecQ5β 解旋酶单转换动力学实验条件确定第82-85页
     ·RecQ5β 的单转换解旋动力学第85-88页
   ·讨论第88-92页
第五章 BLM 解旋活性的研究第92-98页
   ·材料和方法第92-93页
     ·主要试剂和缓冲液第92页
     ·BLM 样品制备和 DNA 底物的合成第92-93页
     ·BLM 的解离动力学第93页
     ·动力学数据分析第93页
   ·结果第93-95页
   ·讨论第95-98页
     ·持续解旋能力较低的起因第95-96页
     ·BLM 全长与 BLM 活性中心比较分析第96-98页
第六章 结论第98-101页
   ·本文总结第98页
   ·论文的创新点与展望第98-101页
参考文献第101-120页
缩略词第120-121页
致谢第121-122页
作者简介第122-123页

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