| 中文摘要 | 第1-13页 |
| Abstract | 第13-20页 |
| 缩略语 | 第20-22页 |
| 第一章 文献综述 | 第22-56页 |
| 1 体细胞杂交技术的研究进展 | 第23-32页 |
| ·原生质体的来源 | 第23-24页 |
| ·融合方法 | 第24-25页 |
| ·融合方式 | 第25页 |
| ·体细胞杂种的鉴定 | 第25-27页 |
| ·植物体细胞杂种的核基因组组成 | 第27-29页 |
| ·目标性状转移 | 第29-30页 |
| ·体细胞杂交技术在药用植物中的研究进展 | 第30-32页 |
| 2 植物次生代谢研究进展 | 第32-35页 |
| ·次生代谢产物种类及作用 | 第32-33页 |
| ·药用植物的次生代谢途径酶基因 | 第33-35页 |
| 3 萜类研究进展 | 第35-48页 |
| ·萜类代谢途径 | 第36-39页 |
| ·萜类代谢途径中的主要酶及其基因 | 第39-41页 |
| ·植物细胞色素P450 | 第41-46页 |
| ·单萜类代谢途径 | 第46-47页 |
| ·萜类代谢工程 | 第47-48页 |
| 4 川西獐牙菜的研究进展 | 第48-54页 |
| ·獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的药用作用 | 第49-50页 |
| ·环烯醚萜类化合物的化学分类 | 第50-51页 |
| ·獐牙菜苦苷和龙胆苦苷的生物合成途径 | 第51-54页 |
| 5 研究背景及立题意义 | 第54-56页 |
| 第二章 川西獐牙菜体细胞杂交 | 第56-110页 |
| 1 材料与方法 | 第57-83页 |
| ·川西獐牙菜和狭叶柴胡的原生质体融合 | 第57-60页 |
| ·同工酶分析 | 第60-64页 |
| ·DNA提取 | 第64-66页 |
| ·RAPD分析 | 第66-67页 |
| ·染色体制片及观察 | 第67-69页 |
| ·GISH分析 | 第69-72页 |
| ·高效液相色谱(HPLC) | 第72-73页 |
| ·醇溶性可挥发成分的GC-MS分析 | 第73-74页 |
| ·RNA提取及纯化 | 第74-75页 |
| ·逆转录合成一链cDNA | 第75-76页 |
| ·常规PCR | 第76-77页 |
| ·目的片段的回收和连接 | 第77-78页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备(CaCl_2法)和转化 | 第78-79页 |
| ·质粒的提取和酶切 | 第79-82页 |
| ·引物设计 | 第82-83页 |
| 2 结果与分析 | 第83-106页 |
| ·融合产物的生长发育 | 第83-84页 |
| ·融合再生愈伤组织的杂种鉴定 | 第84-88页 |
| ·狭叶柴胡与川西獐牙菜体细胞杂种核基因组组成 | 第88-93页 |
| ·亲本与杂种中相关药效成分含量的HPLC分析 | 第93-97页 |
| ·亲本与杂种中化学成分的GC-MS分析 | 第97-100页 |
| ·细胞色素P450基因在体细胞杂种及其双亲中的存在方式 | 第100-106页 |
| 3 讨论 | 第106-110页 |
| ·高寒藏药材——川西獐牙菜体细胞杂交研究 | 第106-107页 |
| ·体细胞杂种中异源染色质组成及其与UV剂量、药效成分含量的关系 | 第107-108页 |
| ·利用体细胞杂交技术实现藏药材药效成分的转移 | 第108-109页 |
| ·杂种中SmG10H基因表达与獐牙菜苦苷含量的关系 | 第109-110页 |
| 第三章 环烯醚萜类化合物相关基因的克隆和功能验证 | 第110-162页 |
| 1 材料与方法 | 第110-132页 |
| ·5'RACE和3'RACE扩增基因全长 | 第110-112页 |
| ·原核表达载体的构建和表达分析 | 第112-114页 |
| ·真核表达载体的构建和表达分析 | 第114-118页 |
| ·植物过表达和RNAi载体的构建和表达分析 | 第118-122页 |
| ·蛋白纯化 | 第122-123页 |
| ·等电聚集 | 第123-125页 |
| ·酶活力检测 | 第125-127页 |
| ·Southern杂交 | 第127-129页 |
| ·Real-time PCR | 第129-130页 |
| ·序列分析 | 第130页 |
| ·半定量RT-PCR | 第130-132页 |
| 2 结果与分析 | 第132-157页 |
| ·SmG10H基因全长的克隆 | 第132-137页 |
| ·SmG10H基因在基因组中的分布 | 第137页 |
| ·SmG10H基因在川西獐牙菜不同器官中的表达 | 第137-138页 |
| ·茉莉酸甲酯对川西獐牙菜环烯醚萜合成相关基因表达及其药效成分含量的影响 | 第138-141页 |
| ·SmG10H基因的原核大肠杆菌表达分析 | 第141-146页 |
| ·SmG10H基因在真核酵母中的表达 | 第146-151页 |
| ·SmG10H基因在植物中的表达 | 第151-157页 |
| 3 讨论 | 第157-162页 |
| ·川西獐牙菜药效成分獐牙菜苦苷代谢途径及其关键酶基因SmG10H的发掘 | 第157-158页 |
| ·SmG10H基因克隆及酶催化性质分析 | 第158-159页 |
| ·SmG10H在川西獐牙菜中的器官特异性表达研究 | 第159页 |
| ·MeJA对环烯醚萜类化合物合成相关基因表达及其药效成分含量的影响 | 第159-160页 |
| ·环烯醚萜类化合物合成关键酶基因——SmG10H表达对转基因植株药效成分含量的影响 | 第160-162页 |
| 附表 | 第162-168页 |
| 附表一 常用引物 | 第162-163页 |
| 附表二 常用培养基 | 第163-166页 |
| 附表三 川西獐牙菜中MEP和MVA途径中几个基因的部分核苷酸序列 | 第166-168页 |
| 论文创新点 | 第168-169页 |
| 参考文献 | 第169-188页 |
| 研究生期间发表论文情况 | 第188-189页 |
| 致谢 | 第189-190页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第190页 |
