中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-14页 |
缩写词表(中英文对照) | 第14-16页 |
前言 | 第16-20页 |
第一章 COX-2、CCR7 表达与大肠癌转移的关系 | 第20-28页 |
前言 | 第20-21页 |
·实验材料 | 第21页 |
·组织标本 | 第21页 |
·试剂 | 第21页 |
·实验方法 | 第21-23页 |
·免疫组织化学方法 | 第21-22页 |
·COX-2、CCR7 免疫组化结果的判断 | 第22-23页 |
·统计方法 | 第23页 |
·实验结果 | 第23-26页 |
·COX-2、CCR7 在大肠癌和大肠癌周组织中的表达 | 第23页 |
·COX-2 表达与大肠癌临床病理参数的关系 | 第23-24页 |
·CCR7 表达与大肠癌临床病理参数的关系 | 第24-26页 |
·讨论 | 第26页 |
·结论 | 第26-28页 |
第二章 COX-2、CCR7 表达与乳腺癌转移的关系 | 第28-34页 |
前言 | 第28页 |
·实验材料 | 第28-29页 |
·组织标本 | 第28-29页 |
·试剂 | 第29页 |
·实验结果 | 第29-32页 |
·在乳腺癌和乳腺癌周组织中 COX-2 和 CCR7 表达 | 第29-30页 |
·COX-2 表达与乳腺癌临床病理参数的关系 | 第30-31页 |
·CCR7 表达与乳腺癌临床病理参数的关系 | 第31-32页 |
·讨论 | 第32-33页 |
·结论 | 第33-34页 |
第三章 COX-2 对肿瘤细胞 CCR7 表达的调节 | 第34-55页 |
前言 | 第34-35页 |
·实验材料 | 第35-36页 |
·细胞 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·主要仪器 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·药物的溶解 | 第36页 |
·实验分组 | 第36页 |
·体外药物毒性实验 | 第36-37页 |
·RT-PCR | 第37-38页 |
·免疫组织化学检测 CCR7 表达 | 第38-39页 |
·Westen blot 检测 CCR7 表达 | 第39-40页 |
·细胞内 Ca~(2+) 浓度的检测 | 第40页 |
·趋化实验 | 第40-41页 |
·HE 染色 | 第41页 |
·统计分析 | 第41页 |
·实验结果 | 第41-51页 |
·COX-2、EP 受体和 CCR7、CXCR4 在 SW620、MDA-MB-231 细胞的表达 | 第41-42页 |
·COX-2 抑制剂、EP 受体激动/拮抗剂对肿瘤细胞增殖活性的影响 | 第42-43页 |
·NS-398、PGE_2、Con A 等对 CCR7 表达的影响 | 第43-47页 |
·胞内钙离子浓度的影响 | 第47页 |
·趋化和侵袭实验结果 | 第47-51页 |
·讨论 | 第51-54页 |
·结论 | 第54-55页 |
第四章 siRNA-CCR7 对肿瘤细胞转移的影响 | 第55-89页 |
前言 | 第55-56页 |
·实验材料 | 第56-58页 |
·菌株、载体和细胞株 | 第56页 |
·引物 | 第56-57页 |
·试剂 | 第57页 |
·主要仪器 | 第57-58页 |
·实验方法 | 第58-60页 |
·siRNA 结构 DNA 序列 | 第58页 |
·载体与目的片段的连接与转化 | 第58-59页 |
·siRNA1、siRNA2 重组质粒的鉴定 | 第59页 |
·质粒 DNA 的大量制备 | 第59页 |
·细胞培养和实验分组 | 第59页 |
·质粒的体外转染和稳定转染细胞株的建立和鉴定 | 第59-60页 |
·RT-RCR 检测 CCR7、VEGF-A、VEGF-C、VEGF-D 表达 | 第60页 |
·免疫组化、Westen blot 检测转染细胞 CCR7、VEGF-C 蛋白的表达,MTT 实验,细胞内 Ca~(2+) 浓度的检测,趋化和侵袭实验检测 siRNA-CCR7 对肿瘤细胞转移的影响等实验方法见第三章 | 第60页 |
·统计分析 | 第60页 |
·实验结果 | 第60-71页 |
·siRNA-CCR7 真核表达重组质粒的构建和鉴定 | 第60-63页 |
·稳定转染细胞株的筛选和建立 | 第63-66页 |
·siRNA 对细胞的毒性作用 | 第66页 |
·细胞内 Ca~(2+) 浓度的检侧 | 第66-67页 |
·siRNA1 和 siRNA2 抑制大肠癌和乳腺癌细胞的趋化和侵袭能力 | 第67-69页 |
·siRNA1 和 siRNA2 成功抑制了被转染细胞 CCR7 的表达后,对其VEG-A、VEGF-C、VEGF-D 表达的影响 | 第69-71页 |
·讨论 | 第71-74页 |
·结论 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-88页 |
小结 | 第88-89页 |
综述 (一)──环氧合酶2在肿瘤发生和治疗中的作用 | 第89-103页 |
综述 (二)──CCL19/21-CCR7 与肿瘤转移 | 第103-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
攻读博士学位期间发表的论文、研究成果及获奖情况 | 第112-113页 |