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移植感染免疫基础研究:逆转录病毒载体pBabeNeo-HBD-2的构建和HBD-2转基因抗感染的研究

英文缩略语和常用单词第1-7页
中文摘要第7-8页
英文摘要第8-9页
文献综述第9-42页
 1.人β防御素2(HBD-2)研究进展第9-19页
 2.转基因技术的研究现状第19-35页
 3.逆转录病毒在基因治疗中的应用第35-42页
第一部分:pBabeNeo-HBD-2质粒的构建与哺乳动物细胞的转染第42-57页
 实验材料与步骤第42-52页
  1.实验材料第42-43页
   ·实验设备第42页
   ·实验试剂第42-43页
  2.试验步骤第43-52页
   ·pBabeNeo载体的准备第43-44页
   ·HBD-2的cDNA的制备第44-46页
   ·连接反应制备pBabeNeo-HRn-2第46页
   ·感受态大肠杆菌的制备和保存第46-47页
   ·感受态大肠杆菌的转化第47-48页
   ·Mini-Prep筛选成功转化的细菌菌落第48页
   ·Large-Prep扩增筛选到pBabeNeo-HBn-2质粒第48-49页
   ·两种质粒转染OE包装细肥第49-50页
   ·收集逆转录病毒感染目标细胞第50-52页
 实验结果第52-54页
 讨论第54-57页
第二部分:转染细胞分子、细胞、蛋白质、生物学活性和免疫学功能的检测第57-70页
 实验材料和步骤第57-65页
  1.实验材料第57-58页
   ·实验试剂第57页
   ·实验器材第57-58页
  2.实验步骤第58-65页
   ·ELISA法检测HDB-2和合成第58页
   ·HBD-2的提纯与生物学活性检测第58-60页
   ·Western Blot检测HBD一2的免疫学特性第60-61页
   ·转染细胞的mRNA的Northern Blot检测第61-65页
 实验结果第65-68页
  1.转染细胞HBO-2分泌能力的检测第65-66页
  2.Geloverlay技术检测转基因合成的HBD一抗菌活性第66页
  3·WesternBlot试验的结果第66-67页
  4.Northern Blot检测细胞HBD一ZmRNA表达的实验结果第67-68页
 讨论第68-70页
第三部分:转基因抗感染离体组织工程模型和在体SCID小鼠试验模型的建立第70-81页
 实验材料与试验步骤第70-77页
  1.实验材料和方法第70-71页
   ·实验试剂第70页
   ·实验器材第70-71页
   ·实验动物第71页
  2.实验步骤第71-77页
   ·离体组织工程检测模型的建立第71页
   ·离体模型抗菌性试验第71-72页
   ·转基因抗感染在体SCID小鼠动物模型的建立第72-73页
     ·RT-PCR技术检铡肿瘤组织HBD-2的mRNA表这第73-75页
   ·转化培养肿瘤组织细胞的HBD一2分泌能力检测第75-77页
 实验结果第77-79页
 讨论第79-81页
结论第81-82页
致谢第82-83页
参考文献第83-86页
个人简历第86-89页
附图第89-93页

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