英文缩略语和常用单词 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
英文摘要 | 第8-9页 |
文献综述 | 第9-42页 |
1.人β防御素2(HBD-2)研究进展 | 第9-19页 |
2.转基因技术的研究现状 | 第19-35页 |
3.逆转录病毒在基因治疗中的应用 | 第35-42页 |
第一部分:pBabeNeo-HBD-2质粒的构建与哺乳动物细胞的转染 | 第42-57页 |
实验材料与步骤 | 第42-52页 |
1.实验材料 | 第42-43页 |
·实验设备 | 第42页 |
·实验试剂 | 第42-43页 |
2.试验步骤 | 第43-52页 |
·pBabeNeo载体的准备 | 第43-44页 |
·HBD-2的cDNA的制备 | 第44-46页 |
·连接反应制备pBabeNeo-HRn-2 | 第46页 |
·感受态大肠杆菌的制备和保存 | 第46-47页 |
·感受态大肠杆菌的转化 | 第47-48页 |
·Mini-Prep筛选成功转化的细菌菌落 | 第48页 |
·Large-Prep扩增筛选到pBabeNeo-HBn-2质粒 | 第48-49页 |
·两种质粒转染OE包装细肥 | 第49-50页 |
·收集逆转录病毒感染目标细胞 | 第50-52页 |
实验结果 | 第52-54页 |
讨论 | 第54-57页 |
第二部分:转染细胞分子、细胞、蛋白质、生物学活性和免疫学功能的检测 | 第57-70页 |
实验材料和步骤 | 第57-65页 |
1.实验材料 | 第57-58页 |
·实验试剂 | 第57页 |
·实验器材 | 第57-58页 |
2.实验步骤 | 第58-65页 |
·ELISA法检测HDB-2和合成 | 第58页 |
·HBD-2的提纯与生物学活性检测 | 第58-60页 |
·Western Blot检测HBD一2的免疫学特性 | 第60-61页 |
·转染细胞的mRNA的Northern Blot检测 | 第61-65页 |
实验结果 | 第65-68页 |
1.转染细胞HBO-2分泌能力的检测 | 第65-66页 |
2.Geloverlay技术检测转基因合成的HBD一抗菌活性 | 第66页 |
3·WesternBlot试验的结果 | 第66-67页 |
4.Northern Blot检测细胞HBD一ZmRNA表达的实验结果 | 第67-68页 |
讨论 | 第68-70页 |
第三部分:转基因抗感染离体组织工程模型和在体SCID小鼠试验模型的建立 | 第70-81页 |
实验材料与试验步骤 | 第70-77页 |
1.实验材料和方法 | 第70-71页 |
·实验试剂 | 第70页 |
·实验器材 | 第70-71页 |
·实验动物 | 第71页 |
2.实验步骤 | 第71-77页 |
·离体组织工程检测模型的建立 | 第71页 |
·离体模型抗菌性试验 | 第71-72页 |
·转基因抗感染在体SCID小鼠动物模型的建立 | 第72-73页 |
·RT-PCR技术检铡肿瘤组织HBD-2的mRNA表这 | 第73-75页 |
·转化培养肿瘤组织细胞的HBD一2分泌能力检测 | 第75-77页 |
实验结果 | 第77-79页 |
讨论 | 第79-81页 |
结论 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
个人简历 | 第86-89页 |
附图 | 第89-93页 |