摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 绪论 | 第14-51页 |
1.1 雨生红球藻概述 | 第14页 |
1.2 雨生红球藻的生活周期及生殖方式 | 第14-15页 |
1.3 雨生红球藻的最主要营养方式 | 第15页 |
1.4 虾青素的理化性质 | 第15-16页 |
1.5 虾青素的来源 | 第16-17页 |
1.5.1 化学合成 | 第16-17页 |
1.5.2 天然虾青素 | 第17页 |
1.6 虾青素的生物学功能及应用 | 第17-20页 |
1.7 雨生红球藻内虾青素合成的机制 | 第20-21页 |
1.8 影响雨生红球藻产虾青素的主要因素 | 第21-25页 |
1.8.1 光 | 第21-24页 |
1.8.2 营养元素 | 第24-25页 |
1.8.3 温度 | 第25页 |
1.8.4 酸碱度 | 第25页 |
1.9 光受体研究进展 | 第25-27页 |
1.10 藻类光受体研究进展 | 第27-45页 |
1.10.1 光-氧-电压(LOV)结构域类光受体 | 第27-33页 |
1.10.2 隐花色素 | 第33-38页 |
1.10.3 光敏色素 | 第38-39页 |
1.10.4 类视紫红质光受体 | 第39-45页 |
1.10.5 紫外光受体 | 第45页 |
1.11 光敏组件在合成生物学和神经生物学中的应用 | 第45-50页 |
1.12 研究目的、内容及创新性 | 第50-51页 |
第二章 光照对雨生红球藻生物学特性影响的研究 | 第51-64页 |
引言 | 第51页 |
2.1 实验材料与方法 | 第51-56页 |
2.1.1 实验材料 | 第51-53页 |
2.1.1.1 藻种和培养条件 | 第51页 |
2.1.1.2 主要试剂 | 第51-52页 |
2.1.1.3 主要仪器与设备 | 第52-53页 |
2.1.2 实验方法 | 第53-56页 |
2.1.2.1 培养基的配制 | 第53-55页 |
2.1.2.2 雨生红球藻的培养及细胞生长情况测定 | 第55页 |
2.1.2.3 雨生红球藻光合作用相关指标的测定 | 第55页 |
2.1.2.4 雨生红球藻细胞中色素含量的测定 | 第55-56页 |
2.2 结果与分析 | 第56-60页 |
2.2.1 光质对雨生红球藻生长速率的影响 | 第56-57页 |
2.2.2 不同光质对雨生红球藻细胞最大光合效率的影响 | 第57-58页 |
2.2.3 不同光质对雨生红球藻实际光合效率的影响 | 第58页 |
2.2.4 不同光质对雨生红球藻叶绿素含量的影响 | 第58-59页 |
2.2.5 不同光质对雨生红球藻中虾青素含量的影响 | 第59-60页 |
2.3 讨论 | 第60-64页 |
第三章 雨生红球藻光受体蛋白的基因克隆及分析 | 第64-111页 |
引言 | 第64页 |
3.1 实验材料与方法 | 第64-81页 |
3.1.1 实验材料 | 第64-66页 |
3.1.1.1 藻种和培养条件 | 第64-65页 |
3.1.1.2 主要试剂 | 第65页 |
3.1.1.3 主要仪器 | 第65-66页 |
3.1.2 实验方法 | 第66-81页 |
3.1.2.1 试剂的配制 | 第66-67页 |
3.1.2.2 雨生红球藻总RNA的提取及反转 | 第67-68页 |
3.1.2.3 雨生红球藻中光受体序列的预测 | 第68-69页 |
3.1.2.4 SMART RACE模板cDNA合成 | 第69-76页 |
3.1.2.5 PCR产物回收纯化及浓度测定 | 第76-77页 |
3.1.2.6 目的基因与T载体连接及转化 | 第77-79页 |
3.1.2.7 实时荧光定量PCR检测光受体基因表达 | 第79-81页 |
3.1.2.8 生物信息学分析方法 | 第81页 |
3.2 结果与分析 | 第81-109页 |
3.2.1 雨生红球藻光受体基因预测结果 | 第81-82页 |
3.2.2 雨生红球藻光受体基因开放阅读框的克隆 | 第82-84页 |
3.2.3 HpChR1基因的克隆与序列分析 | 第84-92页 |
3.2.4 HpHKR2 基因的克隆与序列分析 | 第92-97页 |
3.2.5 HpCRY4基因的克隆与序列分析 | 第97-104页 |
3.2.6 HpUV-B基因的克隆与序列分析 | 第104-108页 |
3.2.7 不同光照条件下光受体基因的表达 | 第108-109页 |
3.3 结论 | 第109-111页 |
第四章 雨生红球藻HpChR1基因功能研究 | 第111-143页 |
引言 | 第111页 |
4.1 实验材料与方法 | 第111-127页 |
4.1.1 实验材料 | 第111-114页 |
4.1.1.1 菌株及质粒 | 第111页 |
4.1.1.2 主要试剂 | 第111-113页 |
4.1.1.3 主要仪器 | 第113-114页 |
4.1.2 实验方法 | 第114-127页 |
4.1.2.1 试剂的配制 | 第114-118页 |
4.1.2.2 质粒抽提与载体构建 | 第118-120页 |
4.1.2.3 目的蛋白得诱导表达及纯化 | 第120-124页 |
4.1.2.5 宫颈癌(Hela)细胞培养及目的基因转染 | 第124-127页 |
4.2 实验结果与分析 | 第127-136页 |
4.2.1 HpChR1蛋白的原核表达及纯化 | 第127-129页 |
4.2.2 HpChR1蛋白互作蛋白筛选 | 第129-131页 |
4.2.3 HpChR1蛋白与COP1蛋白的互作研究 | 第131-132页 |
4.2.4 HpChR1蛋白的亚细胞定位研究 | 第132-134页 |
4.2.5 HpChR1蛋白的钙离子通道功能验证 | 第134-136页 |
4.3 讨论 | 第136-142页 |
4.3.1 HpChR1是一种重要的通道视紫红质 | 第136-138页 |
4.3.2 HpChR1互作蛋白的研究 | 第138-140页 |
4.3.3 HpChR1的功能假说 | 第140-142页 |
4.4 结论 | 第142-143页 |
第五章 雨生红球藻HpCRY4基因功能研究 | 第143-150页 |
引言 | 第143页 |
5.1 实验材料与方法 | 第143-144页 |
5.1.1 实验材料 | 第143页 |
5.1.1.1 菌株及质粒 | 第143页 |
5.1.1.2 主要试剂与仪器 | 第143页 |
5.1.2 实验方法 | 第143-144页 |
5.1.2.1 细胞周期同步处理 | 第143-144页 |
5.2 实验结果与分析 | 第144-147页 |
5.2.1 HpCRY4蛋白与COP1蛋白的互作研究 | 第144页 |
5.2.2 HpCRY4蛋白的亚细胞定位研究 | 第144-145页 |
5.2.3 HpCRY4蛋白与细胞周期相关性研究 | 第145-146页 |
5.2.4 HpCRY4的亚细胞定位与其赖氨酸位点相关性研究 | 第146-147页 |
5.3 讨论 | 第147-149页 |
5.3.1 HpCRY4在细胞周期中的时序分布 | 第147-148页 |
5.3.2 HpCRY4在细胞周期进程中的调控和功能 | 第148-149页 |
5.4 结论 | 第149-150页 |
第六章 总结与展望 | 第150-152页 |
6.1 结论 | 第150页 |
6.2 展望 | 第150-152页 |
参考文献 | 第152-163页 |
附录 | 第163-175页 |
致谢 | 第175-176页 |
攻读博士学位期间的研究成果 | 第176页 |