| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-20页 |
| ·水稻条纹病毒的研究进展 | 第9-11页 |
| ·水稻条纹叶枯病的流行与损失 | 第9-11页 |
| ·水稻条纹叶枯病的分子生物学研究 | 第11页 |
| ·植物免疫 | 第11-13页 |
| ·植物免疫与信号传导 | 第13-14页 |
| ·G蛋白与信号传导 | 第14-16页 |
| ·水稻OsRacl在水稻抗病信号传导中的作用的研究 | 第16-19页 |
| ·研究现状 | 第16-18页 |
| ·存在的问题 | 第18-19页 |
| ·本研究的意义 | 第19-20页 |
| 2.材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·供试毒源 | 第20页 |
| ·供试水稻品种 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·载体 | 第20-21页 |
| ·试剂及酶类 | 第21-22页 |
| ·主要供试仪器 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-32页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第22页 |
| ·叶片总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物 | 第24页 |
| ·目的基因转化大肠杆菌 | 第24-27页 |
| ·DNA片段的切胶纯化 | 第24-25页 |
| ·PCR扩增产物和pMD-18T克隆载体的连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第25-26页 |
| ·连接反应物对宿主感受态细胞的转化 | 第26页 |
| ·质粒提取 | 第26-27页 |
| ·重组克隆的双酶切鉴定 | 第27页 |
| ·OsRacl基因原核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·序列测定与分析 | 第28页 |
| ·OsRacl蛋白基因在大肠杆菌中表达 | 第28页 |
| ·蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第28-29页 |
| ·表达产物的超声波破碎与可溶性分析 | 第29页 |
| ·原核表达产物的抗血清制备 | 第29页 |
| ·水稻蛋白的提取与浓缩 | 第29页 |
| ·抗血清效价测定 | 第29-30页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第30-31页 |
| ·Western blot鉴定 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-42页 |
| ·基因的克隆与原核表达载体的构建 | 第32-34页 |
| ·总RNA的提取与RT-PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增产物的克隆 | 第33页 |
| ·重组质粒的筛选和鉴定 | 第33页 |
| ·OsRacl基因融合蛋白原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
| ·测序结果与序列分析 | 第34页 |
| ·融合蛋白SDS-PAGE的诱导表达 | 第34-36页 |
| ·融合蛋白的分子量预测 | 第34页 |
| ·融合蛋白的诱导表达 | 第34-36页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第36页 |
| ·原核表达产物的抗血清制备 | 第36-42页 |
| ·原核表达产物的抗血清 | 第36-37页 |
| ·抗血清的效价 | 第37-38页 |
| ·Western blot检测结果 | 第38-42页 |
| ·抗血清检测OsRacl融合蛋白的结果 | 第38-39页 |
| ·Western blot检测相同质量的根、茎、叶 | 第39页 |
| ·蛋白浓度的测定 | 第39-40页 |
| ·抗血清检测水稻根、茎、叶中蛋白表达量的结果 | 第40-41页 |
| ·抗血清检测病株和水稻健株的结果 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| ·GST-OsRacl融合蛋白的诱导表达 | 第42页 |
| ·BCA法测定蛋白质浓度 | 第42页 |
| ·抗血清的制备 | 第42页 |
| ·OsRacl功能的初步探讨 | 第42-43页 |
| ·小结 | 第43-44页 |
| 主要参考文献: | 第44-51页 |
| 附录 水稻OsRacl基因序列部分Blast结果 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54页 |