| 中文摘要 | 第1-14页 |
| 英文摘要 | 第14-18页 |
| 第一章 前言 | 第18-33页 |
| 一、有机锡化合物的来源及理化特性 | 第18页 |
| 二、三丁基锡污染现状及其生物毒性 | 第18-22页 |
| 三、高等动物生殖内分泌调控机制 | 第22-23页 |
| 四、精子发生的场所及过程 | 第23-24页 |
| 五、精子发生的激素调节 | 第24-29页 |
| 1 下丘脑——垂体——性腺轴 | 第24-27页 |
| 2 甲状腺激素对精子发生的影响 | 第27-29页 |
| 六、精子发生的其他调控方式 | 第29-30页 |
| 七、精子成熟 | 第30-31页 |
| 八、有机锡对哺乳动物精子发生和精子成熟影响的研究现状 | 第31-32页 |
| 九、研究的主要内容、目的和意义 | 第32-33页 |
| 第二章 材料和方法 | 第33-51页 |
| 一、实验动物 | 第33页 |
| 二、仪器和试剂 | 第33-34页 |
| 1 实验仪器 | 第33页 |
| 2 常用试剂 | 第33-34页 |
| 三、实验动物处理 | 第34页 |
| 四、取样及样品处理 | 第34页 |
| 五、睾丸组织学 | 第34-36页 |
| 1 H.E.染色 | 第35页 |
| 2 组织学分析 | 第35页 |
| 3 免疫组织化学 | 第35-36页 |
| 六、TUNEL 检测细胞凋亡 | 第36页 |
| 1 主要试剂 | 第36页 |
| 2 操作步骤 | 第36页 |
| 七、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Western bolt | 第36-38页 |
| 1 样品预处理 | 第37页 |
| 2 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Western boltting试剂配方 | 第37-38页 |
| 3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与Western boltting分析 | 第38页 |
| 八、血清及性腺性激素水平的测定 | 第38-39页 |
| 1 性腺预处理 | 第38-39页 |
| 2 测定方法 | 第39页 |
| 九、睾丸组织基因差异表达验证 | 第39-42页 |
| 1 睾丸组织总RNA的提取和沉淀 | 第39-40页 |
| 2 第一链cDNA合成 | 第40-41页 |
| 3 实时荧光定量PCR体系建立 | 第41-42页 |
| 十、附睾组织学 | 第42页 |
| 1 H.E.染色 | 第42页 |
| 2 组织学分析 | 第42页 |
| 十一、精子质量检测方法 | 第42-43页 |
| 1 精子密度 | 第42-43页 |
| 2 存活率 | 第43页 |
| 3 形态染色 | 第43页 |
| 十二、附睾生化指标检测 | 第43-47页 |
| 1 附睾组织匀浆液的制备 | 第43页 |
| 2 中性α-葡萄糖苷酶活性测定 | 第43-44页 |
| 3 附睾酸性磷酸酶测定 | 第44-45页 |
| 4 精子顶体酶活性测定 | 第45-46页 |
| 5 精子乳酸脱氢酶同工酶-X活性测定 | 第46-47页 |
| 十三、附睾组织原位杂交 | 第47-50页 |
| 1 基因探针制备 | 第48页 |
| 2 冰冻切片方法 | 第48页 |
| 3 原位杂交试剂及溶液 | 第48-49页 |
| 4 原位杂交流程 | 第49页 |
| 5 附睾组织总RNA的提取和沉淀 | 第49-50页 |
| 十四、数据处理 | 第50-51页 |
| 第三章 结果 | 第51-77页 |
| 一、TBT对小鼠体重、睾丸和附睾重量及其指数的影响 | 第51-53页 |
| 二、TBT对睾丸组织形态结构的影响 | 第53-58页 |
| 三、TBT对生殖相关激素水平的影响 | 第58-62页 |
| 1 TBT对促黄体生成素LH和卵泡刺激素FSH分泌水平的影响 | 第58-59页 |
| 2 TBT对睾酮(T)、雌二醇(E_2)分泌水平的影响 | 第59-60页 |
| 3 TBT对三碘甲腺原氨酸T3和甲状腺素T4分泌水平的影响 | 第60-62页 |
| 四、TBT对小鼠睾丸细胞凋亡的影响 | 第62-64页 |
| 五、TBT对生精细胞PCNA表达的影响 | 第64-67页 |
| 1 组织学观察 | 第64-66页 |
| 2 western blotting分析 | 第66-67页 |
| 六、TBT对睾丸甲状腺激素受体TR基因转录水平的影响 | 第67-68页 |
| 1 RT-PCR结果 | 第67页 |
| 2 实时荧光定量PCR结果 | 第67-68页 |
| 七、TBT对小鼠精液参数的影响 | 第68-69页 |
| 八、TBT对附睾组织形态的影响 | 第69-71页 |
| 九、TBT对附睾生化指标的影响 | 第71-73页 |
| 1 附睾组织中性α-葡萄糖苷酶和酸性磷酸酶活性的变化 | 第71-72页 |
| 2 精子顶体酶和乳酸脱氢酶同工酶-X活性的变化 | 第72-73页 |
| 十、TBT对附睾MMP7和TD02表达的影响 | 第73-77页 |
| 1 基质金属蛋白酶MMP7的原位杂交和实时荧光定量 | 第73-75页 |
| 2 色氨酸2,3-双加氧酶TD02的原位杂交和实时荧光定量 | 第75-77页 |
| 第四章 讨论 | 第77-90页 |
| 一、TBT对小鼠睾丸精子发生的影响 | 第77-78页 |
| 二、TBT对小鼠生殖激素水平的影响 | 第78-79页 |
| 三、TBT对小鼠睾丸细胞增殖的影响 | 第79-80页 |
| 四、TBT对小鼠睾丸细胞凋亡的影响 | 第80-81页 |
| 五、TBT对小鼠甲状腺激素及其受体的影响 | 第81-84页 |
| 六、TBT对小鼠精子质量参数的影响 | 第84-85页 |
| 七、TBT对小鼠附睾组织形态的影响 | 第85页 |
| 八、TBT对附睾生化指标的影响 | 第85-87页 |
| 九、TBT对附睾MMP7和TD02基因表达的影响 | 第87-90页 |
| 结语 | 第90-91页 |
| 研究展望 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-124页 |
| 攻读博士阶段发表的论文和参加的课题 | 第124-125页 |
| 致谢 | 第125页 |
