摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
试验一 新城疫病毒贵州分离株F基因的克隆和序列分析 | 第10-24页 |
1 材料与方法 | 第10-17页 |
·材料 | 第10-12页 |
·SPF鸡胚 | 第10页 |
·菌株与质粒载体 | 第10页 |
·病毒来源 | 第10页 |
·主要试剂 | 第10页 |
·溶液配制 | 第10-11页 |
·主要仪器和设备 | 第11-12页 |
·方法 | 第12-17页 |
·病毒扩增 | 第12页 |
·致病性试验 | 第12页 |
·NDV病毒核酸RNA的提取(Trizol法) | 第12-13页 |
·引物设计 | 第13页 |
·RT-PCR扩增F基因片断 | 第13-14页 |
·琼脂糖凝胶电泳分析 | 第14页 |
·PCR产物的回收 | 第14页 |
·NDV F基因的克隆与鉴定 | 第14-17页 |
2 结果 | 第17-19页 |
·NDV分离株的致病性 | 第17-18页 |
·RT-PCR扩增F基因 | 第18-19页 |
·F基因片断的克隆与鉴定 | 第19页 |
·NDV F基因核苷酸序列和氨基酸序列 | 第19页 |
·NDV的系统进化发生树 | 第19页 |
3 讨论 | 第19-24页 |
试验二 SYBR GREEN Ⅰ荧光RT-PCR方法快速鉴定新城疫病毒毒力 | 第24-29页 |
1 材料与方法 | 第24-25页 |
·毒株、样品、试剂和仪器 | 第24页 |
·病毒RNA的提取 | 第24页 |
·引物设计与合成 | 第24页 |
·荧光RT-PCR检测 | 第24页 |
·检测结果判断 | 第24-25页 |
·与其他方法比较 | 第25页 |
·受检组织的检测 | 第25页 |
2 结果与分析 | 第25-27页 |
·荧光RT-PCR检测 | 第25页 |
·MDT和序列的测定 | 第25页 |
·受检组织的检测 | 第25-27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
试验三 荧光定量RT-PCR检测雏鸡体内新城疫强毒的分布规律 | 第29-36页 |
1 材料与方法 | 第29-30页 |
·毒株、试验鸡、试剂和仪器 | 第29页 |
·试验设计 | 第29页 |
·病料组织处理及病毒RNA的提取 | 第29页 |
·PCR引物设计与合成 | 第29-30页 |
·标准曲线的建立 | 第30页 |
·RT-PCR扩增 | 第30页 |
·灵敏度和重复性比较试验 | 第30页 |
2 结果 | 第30-34页 |
·肉鸡感染试验结果 | 第30页 |
·标准曲线的绘制 | 第30-31页 |
·组织含毒量的检测 | 第31页 |
·灵敏度和重复性 | 第31-34页 |
3 小结与讨论 | 第34-36页 |
文献综述-新城疫研究进展 | 第36-57页 |
参考文献 | 第57-66页 |
附录一 攻读硕士学位期间参与发表的论文 | 第66-67页 |
附录二 各种操作方法步骤及溶液、试剂、培养基的配制 | 第67-70页 |
附录三 缩略语英汉对照表 | 第70-71页 |
致谢 | 第71-72页 |