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贵州新城疫分子流行病学调查及荧光RT-PCR方法的检测

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-10页
试验一 新城疫病毒贵州分离株F基因的克隆和序列分析第10-24页
 1 材料与方法第10-17页
   ·材料第10-12页
     ·SPF鸡胚第10页
     ·菌株与质粒载体第10页
     ·病毒来源第10页
     ·主要试剂第10页
     ·溶液配制第10-11页
     ·主要仪器和设备第11-12页
   ·方法第12-17页
     ·病毒扩增第12页
     ·致病性试验第12页
     ·NDV病毒核酸RNA的提取(Trizol法)第12-13页
     ·引物设计第13页
     ·RT-PCR扩增F基因片断第13-14页
     ·琼脂糖凝胶电泳分析第14页
     ·PCR产物的回收第14页
     ·NDV F基因的克隆与鉴定第14-17页
 2 结果第17-19页
   ·NDV分离株的致病性第17-18页
   ·RT-PCR扩增F基因第18-19页
   ·F基因片断的克隆与鉴定第19页
   ·NDV F基因核苷酸序列和氨基酸序列第19页
   ·NDV的系统进化发生树第19页
 3 讨论第19-24页
试验二 SYBR GREEN Ⅰ荧光RT-PCR方法快速鉴定新城疫病毒毒力第24-29页
 1 材料与方法第24-25页
   ·毒株、样品、试剂和仪器第24页
   ·病毒RNA的提取第24页
   ·引物设计与合成第24页
   ·荧光RT-PCR检测第24页
   ·检测结果判断第24-25页
   ·与其他方法比较第25页
   ·受检组织的检测第25页
 2 结果与分析第25-27页
   ·荧光RT-PCR检测第25页
   ·MDT和序列的测定第25页
   ·受检组织的检测第25-27页
 3 讨论第27-29页
试验三 荧光定量RT-PCR检测雏鸡体内新城疫强毒的分布规律第29-36页
 1 材料与方法第29-30页
   ·毒株、试验鸡、试剂和仪器第29页
   ·试验设计第29页
   ·病料组织处理及病毒RNA的提取第29页
   ·PCR引物设计与合成第29-30页
   ·标准曲线的建立第30页
   ·RT-PCR扩增第30页
   ·灵敏度和重复性比较试验第30页
 2 结果第30-34页
   ·肉鸡感染试验结果第30页
   ·标准曲线的绘制第30-31页
   ·组织含毒量的检测第31页
   ·灵敏度和重复性第31-34页
 3 小结与讨论第34-36页
文献综述-新城疫研究进展第36-57页
参考文献第57-66页
附录一 攻读硕士学位期间参与发表的论文第66-67页
附录二 各种操作方法步骤及溶液、试剂、培养基的配制第67-70页
附录三 缩略语英汉对照表第70-71页
致谢第71-72页

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