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甘蓝型油菜steroleosin基因的克隆与表达

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
缩略词表第8-9页
1 前言第9-19页
   ·油体的简介第9-13页
     ·油体大小第10页
     ·油体的结构及特征第10页
     ·油体的存在类型第10-11页
     ·油体的形成第11-12页
     ·油体的降解第12-13页
   ·油体结合蛋白第13-17页
     ·油质蛋白(oleosin)第13-14页
     ·油体钙蛋白(caleosin)第14-15页
     ·油体固醇蛋白(steroleosin)第15-17页
   ·电子克隆的应用第17-18页
   ·本研究的目的和意义第18-19页
2 材料和方法第19-27页
   ·实验材料第19页
   ·实验所用引物序列第19-20页
   ·试验方法第20-27页
     ·总RNA的提取第20-21页
     ·反转录PCR第21页
     ·Steroleosin-A cDNA的克隆第21-22页
     ·Steroleosin-B cDNA的克隆第22-24页
     ·Steroleosin-A的基因扩增第24-25页
     ·PCR产物的纯化回收和克隆第25页
     ·克隆片段的鉴定和保存第25-26页
     ·测序与序列结构分析第26-27页
     ·不同时期和部位表达量分析第27页
3 实验结果与分析第27-46页
   ·RNA提取第27-28页
   ·Steroleosin-A基因cDNA的克隆第28-29页
     ·Steroleosin-A基因cDNA 3'端的克隆第28页
     ·序列测定与同源性分析第28-29页
     ·Steroleosin-A拼接全长扩增第29页
   ·Steroleosin-B基因cDNA的克隆第29-31页
     ·Steroleosin-B基因cDNA片段扩增第29-30页
     ·序列测定与同源性分析第30页
     ·Steroleosin-B基因cDNA 3'端扩增第30页
     ·Steroleosin-B基因cDNA 5'端扩增第30-31页
   ·Steroleosin-A基因扩增第31页
   ·序列分析第31-42页
     ·mRNA序列分析第32-36页
     ·蛋白质序列分析第36-42页
     ·基因序列分析第42页
   ·系统发生分析第42-43页
   ·三维结构预测第43-44页
   ·Steroleosin-A的表达分析第44-46页
4 讨论第46-49页
   ·Steroleosin的结构特征第46-47页
   ·Steroleosin-A在油菜种子成熟和萌发过程中的表达第47-48页
   ·Steroleosin-A的高级结构第48页
   ·两种RNA提取方法的比较第48-49页
5 结论第49-50页
参考文献第50-59页
致谢第59页
附录1 常用缓冲液、试剂及其配制方法第59-60页
附录2:RNA的提取第60-61页
附录3:大肠杆菌感受态细胞制备(CaCl_2法)第61-62页
附录4 凝胶回收步骤第62页
附录5 甘蓝型油菜steroleosin-A的3'RACE序列第62页
附录6 甘蓝型油菜steroleosin-A的全长扩增序列第62-63页
附录7 甘蓝型油菜steroleosin-A的cDNA序列第63页
附录8 甘蓝型油菜steroleosin-A的基因序列第63-64页
附录9 甘蓝型油菜steroleosin-B的EST序列第64-65页
附录10 甘蓝型油菜steroleosin-B的3'RACE序列第65页
附录11 甘蓝型油菜steroleosin-B的5'RACE序列第65页
附录12 甘蓝型油菜steroleosin-B的cDNA序列第65-66页

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