摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-19页 |
·油体的简介 | 第9-13页 |
·油体大小 | 第10页 |
·油体的结构及特征 | 第10页 |
·油体的存在类型 | 第10-11页 |
·油体的形成 | 第11-12页 |
·油体的降解 | 第12-13页 |
·油体结合蛋白 | 第13-17页 |
·油质蛋白(oleosin) | 第13-14页 |
·油体钙蛋白(caleosin) | 第14-15页 |
·油体固醇蛋白(steroleosin) | 第15-17页 |
·电子克隆的应用 | 第17-18页 |
·本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
2 材料和方法 | 第19-27页 |
·实验材料 | 第19页 |
·实验所用引物序列 | 第19-20页 |
·试验方法 | 第20-27页 |
·总RNA的提取 | 第20-21页 |
·反转录PCR | 第21页 |
·Steroleosin-A cDNA的克隆 | 第21-22页 |
·Steroleosin-B cDNA的克隆 | 第22-24页 |
·Steroleosin-A的基因扩增 | 第24-25页 |
·PCR产物的纯化回收和克隆 | 第25页 |
·克隆片段的鉴定和保存 | 第25-26页 |
·测序与序列结构分析 | 第26-27页 |
·不同时期和部位表达量分析 | 第27页 |
3 实验结果与分析 | 第27-46页 |
·RNA提取 | 第27-28页 |
·Steroleosin-A基因cDNA的克隆 | 第28-29页 |
·Steroleosin-A基因cDNA 3'端的克隆 | 第28页 |
·序列测定与同源性分析 | 第28-29页 |
·Steroleosin-A拼接全长扩增 | 第29页 |
·Steroleosin-B基因cDNA的克隆 | 第29-31页 |
·Steroleosin-B基因cDNA片段扩增 | 第29-30页 |
·序列测定与同源性分析 | 第30页 |
·Steroleosin-B基因cDNA 3'端扩增 | 第30页 |
·Steroleosin-B基因cDNA 5'端扩增 | 第30-31页 |
·Steroleosin-A基因扩增 | 第31页 |
·序列分析 | 第31-42页 |
·mRNA序列分析 | 第32-36页 |
·蛋白质序列分析 | 第36-42页 |
·基因序列分析 | 第42页 |
·系统发生分析 | 第42-43页 |
·三维结构预测 | 第43-44页 |
·Steroleosin-A的表达分析 | 第44-46页 |
4 讨论 | 第46-49页 |
·Steroleosin的结构特征 | 第46-47页 |
·Steroleosin-A在油菜种子成熟和萌发过程中的表达 | 第47-48页 |
·Steroleosin-A的高级结构 | 第48页 |
·两种RNA提取方法的比较 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-59页 |
致谢 | 第59页 |
附录1 常用缓冲液、试剂及其配制方法 | 第59-60页 |
附录2:RNA的提取 | 第60-61页 |
附录3:大肠杆菌感受态细胞制备(CaCl_2法) | 第61-62页 |
附录4 凝胶回收步骤 | 第62页 |
附录5 甘蓝型油菜steroleosin-A的3'RACE序列 | 第62页 |
附录6 甘蓝型油菜steroleosin-A的全长扩增序列 | 第62-63页 |
附录7 甘蓝型油菜steroleosin-A的cDNA序列 | 第63页 |
附录8 甘蓝型油菜steroleosin-A的基因序列 | 第63-64页 |
附录9 甘蓝型油菜steroleosin-B的EST序列 | 第64-65页 |
附录10 甘蓝型油菜steroleosin-B的3'RACE序列 | 第65页 |
附录11 甘蓝型油菜steroleosin-B的5'RACE序列 | 第65页 |
附录12 甘蓝型油菜steroleosin-B的cDNA序列 | 第65-66页 |