| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 中英文对照词 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-22页 |
| 1 异三聚体G 蛋白与植物的生长发育 | 第10-17页 |
| ·G 蛋白 | 第10-16页 |
| ·G 蛋白各组成的基因 | 第10页 |
| ·G 蛋白的结构 | 第10-11页 |
| ·植物G 蛋白的生物学定位 | 第11-12页 |
| ·G 蛋白信号转导系统 | 第12-16页 |
| ·G 蛋白的作用模式 | 第12-13页 |
| ·G 蛋白参与的植物细胞信号转导途径 | 第13-16页 |
| ·G 蛋白在光信号转导途径中的作用 | 第13-14页 |
| ·G 蛋白在抗真菌防御机制中的作用 | 第14页 |
| ·G 蛋白在脱落酸信号转导途径中的作用 | 第14-15页 |
| ·G 蛋白在调控细胞分裂周期进程中的作用 | 第15页 |
| ·G 蛋白在生长素（Auxin）信号转导中的作用 | 第15-16页 |
| ·G 蛋白在植物的生长发育过程中的作用 | 第16-17页 |
| ·Gα在植物发育中的作用 | 第16页 |
| ·Gβ在植物生长发育中的作用 | 第16-17页 |
| ·Gγ在植物生长发育中的作用 | 第17页 |
| 2. 生长素与细胞的分裂和伸长 | 第17-20页 |
| ·生长素与生长素的极性运输 | 第17-18页 |
| ·生长素与植物细胞的分裂和伸长调节 | 第18-20页 |
| ·生长素与植物细胞分裂的调节 | 第18-19页 |
| ·生长素与植物细胞伸长的调节 | 第19-20页 |
| 3. 本研究的目的及研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 2,4-D 和 NAA 在拟南芥悬浮细胞分裂和伸长中的作用 | 第22-36页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-26页 |
| ·悬浮培养细胞系的建立 | 第23页 |
| ·悬浮细胞研究方法 | 第23-24页 |
| ·细胞处理 | 第23页 |
| ·生物量鲜重的称量 | 第23页 |
| ·显微观察 | 第23-24页 |
| ·细胞分裂指数的荧光观察 | 第24页 |
| ·AGB1 和GPA1 基因的 RT-PCR | 第24-25页 |
| ·引物的设计 | 第24-25页 |
| ·总RNA 提取 | 第25页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第25页 |
| ·PCR 扩增 | 第25页 |
| ·悬浮细胞的 Western-blot 分析 | 第25-26页 |
| ·膜蛋白的提取 | 第25页 |
| ·蛋白质浓度测定及SDS-PAGE | 第25-26页 |
| ·Western Blotting | 第26页 |
| 3. 结果与分析 | 第26-33页 |
| ·拟南芥悬浮培养细胞系的建立 | 第26-27页 |
| ·2,4-D 和 NAA 在拟南芥Col 悬浮细胞中的作用 | 第27-31页 |
| ·2,4-D 和NAA 对拟南芥悬浮细胞生长发育的影响 | 第27-29页 |
| ·2,4-D 和NAA 对Col 悬浮细胞分裂的影响 | 第29-31页 |
| ·2,4-D 和NAA 对Col 悬浮细胞伸长的影响 | 第31页 |
| ·2,4-D 和 NAA 处理Col 细胞中 GPA1 和AGB1 相对表达量的变化 | 第31-32页 |
| ·2,4-D 和 NAA 处理 Col 细胞中GPA1 蛋白水平的表达量变化 | 第32-33页 |
| 4. 讨论 | 第33-36页 |
| ·适宜浓度的2,4-D 和NAA 在细胞分裂和细胞伸长中的作用不同 | 第33页 |
| ·适宜浓度的2,4-D 和NAA 可有效区分拟南芥细胞对细胞分裂和细胞伸长的不同响应 | 第33-34页 |
| ·G蛋白不同亚基在2,4-D和NAA诱导的细胞分裂和细胞伸长中可能具有不同的作用 | 第34-36页 |
| 第三章 G 蛋白在拟南芥悬浮细胞分裂和伸长中的作用 | 第36-50页 |
| 1. 引言 | 第36页 |
| 2. 材料与方法 | 第36-39页 |
| ·GPA1 和AGB1 过表达悬浮细胞系的构建 | 第36-38页 |
| ·拟南芥 GPA1、AGB1 基因的克隆与转化 | 第36-37页 |
| ·引物的设计 | 第36-37页 |
| ·总 RNA 提取 | 第37页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第37页 |
| ·PCR 扩增GPA1 和AGB1 基因全长cDNA 序列 | 第37页 |
| ·PCR 产物的 TOPO 克隆及其序列分析 | 第37页 |
| ·农杆菌的转化培养 | 第37页 |
| ·农杆菌介导的细胞转化 | 第37-38页 |
| ·转化细胞的GFP-PCR 鉴定 | 第38页 |
| ·AGB1 功能缺失突变体agb1-2 悬浮细胞系建立 | 第38页 |
| ·悬浮细胞的形态学观察 | 第38页 |
| ·悬浮细胞的细胞分裂指数的确定 | 第38页 |
| ·悬浮细胞中相关基因的半定量RT-PCR | 第38-39页 |
| ·原生质体制备与转化 | 第39页 |
| ·过表达细胞系及原生质体的荧光观察 | 第39页 |
| 3. 结果与分析 | 第39-47页 |
| ·agb1-2 悬浮细胞系鉴定 | 第39-40页 |
| ·转基因细胞系的构建 | 第40-42页 |
| ·GPA1 基因和AGB1 基因的全长cDNA 序列的获得 | 第40页 |
| ·GPA1 和 AGB1 基因的TOPO 克隆与鉴定 | 第40-41页 |
| ·LR 连接反应及产物鉴定 | 第41页 |
| ·过表达的转基因细胞系的转化及鉴定 | 第41-42页 |
| ·过表达悬浮细胞系中G 蛋白的亚细胞定位 | 第42-43页 |
| ·细胞水平G 蛋白定位 | 第42-43页 |
| ·原生质水平G 蛋白的定位 | 第43页 |
| ·突变体、野生型、过表达悬浮细胞的形态特征 | 第43-44页 |
| ·不同基因型细胞对2,4-D 和NAA 处理的响应分析 | 第44-46页 |
| ·2,4-D/NAA 处理对细胞形态变化的影响 | 第44-46页 |
| ·2,4-D/NAA 处理对细胞分裂指数变化的影响 | 第46页 |
| ·2,4-D/NAA 处理对不同基因型细胞中 ABP1 相对表达量的影响 | 第46-47页 |
| ·2,4-D/NAA 处理对不同基因型细胞中 AtCYCD4;1 相对表达量的影响 | 第47页 |
| 4. 讨论 | 第47-50页 |
| ·GPA1对细胞分裂过程具有促进作用 | 第47-48页 |
| ·AGB1对细胞分裂过程具有负调节作用，对细胞伸长过程具有正调节作用 | 第48-50页 |
| 第四章 结语 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 附录 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
