| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 文献综述 | 第12-19页 |
| 1 引言 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第19页 |
| ·国内外的研究现状 | 第19页 |
| ·本研究拟解决的问题 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-42页 |
| ·材料 | 第20-23页 |
| ·实验菌株与材料 | 第20页 |
| ·主要试剂、工具酶及载体 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·有关溶液的配制 | 第21-23页 |
| ·方法 | 第23-42页 |
| ·细极链格孢蛋白激发子的提取 | 第23-25页 |
| ·细极链格孢蛋白激发子纯化方法的建立 | 第25-26页 |
| ·蛋白激发子的等电点测定 | 第26-27页 |
| ·蛋白激发子特异性抗体纯化 | 第27-29页 |
| ·蛋白激发子的质谱序列分析 | 第29页 |
| ·蛋白激发子居中序列的克隆 | 第29-32页 |
| ·3'RACE获得该基因的3'全长 | 第32-33页 |
| ·5'RACE获得基因的5'全长 | 第33-38页 |
| ·基因组DNA扩增 | 第38页 |
| ·蛋白激发子全长基因克隆 | 第38-39页 |
| ·表达载体的构建与重组蛋白的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·重组蛋白与天然纯化蛋白的生物活性比较 | 第41页 |
| ·蛋白激发子的同源序列的比对 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-58页 |
| ·细极链格孢蛋白激发子的提取 | 第42页 |
| ·蛋白浓度标准曲线的建立 | 第42页 |
| ·细极链格孢蛋白激发子纯化方法的建立 | 第42-43页 |
| ·蛋白激发子的等电点 | 第43-44页 |
| ·蛋白激发子特异性抗体纯化 | 第44-45页 |
| ·蛋白激发子的质谱序列分析 | 第45-46页 |
| ·蛋白激发子居中序列的克隆 | 第46-47页 |
| ·总RNA的提取 | 第46页 |
| ·RT-PCR反应 | 第46-47页 |
| ·RACE法获得完整基因 | 第47-52页 |
| ·3′RACE结果 | 第47-48页 |
| ·5′RACE结果 | 第48-52页 |
| ·基因组DNA的扩增 | 第52-53页 |
| ·蛋白激发子全长基因克隆 | 第53页 |
| ·全长cDNA序列的克隆的与序列分析 | 第53页 |
| ·表达载体的构建与重组蛋白的诱导表达 | 第53-55页 |
| ·pGEX-6P-1-PEAT1和pET-28a—PEAT1表达载体的构建 | 第53页 |
| ·蛋白的原核表达 | 第53-55页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第55-56页 |
| ·重组蛋白与天然纯化蛋白的生物活性比较 | 第56-57页 |
| ·蛋白激发子的同源序列的比对 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·细极链格孢蛋白激发子分离纯化条件的建立 | 第58页 |
| ·蛋白等点电的准确性 | 第58-59页 |
| ·利用RACE进行PCR时,在设计引物时应该注意的问题 | 第59页 |
| ·关于基因克隆 | 第59页 |
| ·蛋白激发子的表达与纯化 | 第59-60页 |
| ·蛋白激发子生物活性的测定指标 | 第60页 |
| ·NAC蛋白的结构与功能 | 第60-62页 |
| 5 结论 | 第62-64页 |
| ·蛋白激发子纯化方法的建立 | 第62页 |
| ·利用2-DE电泳确定蛋白激发子的等电点 | 第62页 |
| ·生物质谱法获得了该蛋白的一系列肽段序列 | 第62页 |
| ·确克隆了蛋白激发子的全基因 | 第62页 |
| ·原核表达载体的构建和重组蛋白表达 | 第62-63页 |
| ·确定了蛋白激发子的生物活性 | 第63页 |
| ·同源序列比对和保守结构域分析 | 第63-64页 |
| 附录 质谱测定结果表 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |