| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1.前言 | 第11-28页 |
| ·口蹄疫研究进展 | 第11-18页 |
| ·口蹄疫病毒结构 | 第11-15页 |
| ·口蹄疫疫苗的研究进展 | 第15-18页 |
| ·粘膜免疫及其佐剂的研究进展 | 第18-28页 |
| ·细菌毒素及其衍生物作为粘膜佐剂——霍乱毒素和大肠杆菌不耐热肠毒素 | 第20-25页 |
| ·内源性分子:细胞因子,趋化因子,防御素 | 第25页 |
| ·Cp G佐剂 | 第25-26页 |
| ·皂角苷 | 第26页 |
| ·展望 | 第26-28页 |
| 2.材料与方法 | 第28-41页 |
| ·材料、试剂 | 第28-29页 |
| ·菌株和质粒 | 第28页 |
| ·动物材料 | 第28页 |
| ·主要化学试剂及仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-41页 |
| ·AO型口蹄疫双价多肽疫苗的表达载体构建及蛋白的表达、纯化、分析 | 第29-36页 |
| ·霍乱毒素B亚基的表达、纯化、分析 | 第36-37页 |
| ·霍乱毒素B亚基-FMDV抗原决定簇片段(CTB-t8-3s)融合表达载体的构建,及蛋白的表达、纯化、分析 | 第37-38页 |
| ·免疫小鼠及效价分析 | 第38-41页 |
| 3.实验结果 | 第41-60页 |
| ·A、O型口蹄疫多肽疫苗的研究 | 第41-47页 |
| ·A、O型口蹄疫病毒抗原决定簇片段的结构 | 第41页 |
| ·A、O型口蹄疫病毒抗原决定簇片段表达载体的构建 | 第41-42页 |
| ·融合蛋白t8-3s在大肠杆菌中的诱导表达 | 第42-44页 |
| ·融合蛋白t8-3s的分析、纯化 | 第44-47页 |
| ·霍乱毒素B亚基的表达、纯化、分析 | 第47-52页 |
| ·pTWIN 1-CTB(Rosetta)的获得 | 第47页 |
| ·pTWIN 1-CTB(Rosetta)的表达 | 第47-48页 |
| ·表达蛋白CTB的可溶性分析 | 第48-49页 |
| ·CTB包涵体的复性,纯化 | 第49页 |
| ·纯化蛋白的质谱分析 | 第49-51页 |
| ·表达蛋白CTB的Western杂交分析 | 第51页 |
| ·表达蛋白的GM1结合活性分析 | 第51-52页 |
| ·霍乱毒素B亚基-FMDV抗原决定簇片段(CTB-t8-3s)融合表达载体的构建,及蛋白的表达、纯化、分析 | 第52-57页 |
| ·霍乱毒素B亚基基因的扩增 | 第52-53页 |
| ·CTB-t8-3s融合表达载体的构建 | 第53页 |
| ·c2x-CTB-t8-3s的测序 | 第53-54页 |
| ·c2x-CTB-t8-3s(Rosetta)表达菌的获得 | 第54页 |
| ·c_2x-CTB-t8-3s(Rosetta)的诱导表达 | 第54页 |
| ·表达蛋白CTB-t8-3s的可溶性分析 | 第54-55页 |
| ·表达产物CTB-t8-3s的分离纯化 | 第55-56页 |
| ·表达蛋白CTB-t8-3s的Western杂交分析 | 第56页 |
| ·表达蛋白的GM1结合活性分析 | 第56-57页 |
| ·免疫小鼠后抗体水平分析 | 第57-60页 |
| 4.讨论 | 第60-66页 |
| ·蛋白原核表达条件的优化 | 第60-62页 |
| ·密码子优化 | 第60-61页 |
| ·载体选择 | 第61-62页 |
| ·表达宿主菌的选择 | 第62页 |
| ·蛋白表达条件、蛋白纯化及复性的条件优化 | 第62-63页 |
| ·动物免疫结果的分析 | 第63-65页 |
| ·鼻腔、口服、皮下不同免疫方式的抗体水平比较 | 第63-64页 |
| ·霍乱毒素B亚基(CTB)/口蹄疫抗原片段(t8-3s)联合免疫与CTB-t8-3s融合蛋白免疫效果的比较 | 第64-65页 |
| ·痕量灭活霍乱弧菌对CTB佐剂作用的影响 | 第65页 |
| ·后续研究展望 | 第65-66页 |
| 5.参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
