| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-21页 |
| ·抗菌肽 | 第10-13页 |
| ·抗菌肽的分类 | 第10页 |
| ·抗菌肽的活性及其作用机理 | 第10-12页 |
| ·抗菌肽应用前景 | 第12-13页 |
| ·防御素 | 第13-21页 |
| ·防御素的发现及其分类 | 第13-15页 |
| ·防御素的生物学活性 | 第15-17页 |
| ·防御素的作用机理 | 第17-18页 |
| ·β-防御素的分子生物学特征 | 第18-21页 |
| 2 引言 | 第21-22页 |
| 3 鸡Gal-11基因编码cDNA的克隆 | 第22-36页 |
| ·材料与方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-27页 |
| ·鸡总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·RT-PCR引物的设计与合成 | 第23页 |
| ·鸡Gal-11 cDNA的合成 | 第23-24页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第24-25页 |
| ·PCR产物与T载体的连接 | 第25页 |
| ·重组质粒的转化及转化菌的筛选 | 第25页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第25-26页 |
| ·小量重组质粒的提取 | 第26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26-27页 |
| ·重组质粒DNA测序 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-33页 |
| ·从鸡肾脏、输卵管和肝脏组织提取的RNA鉴定结果 | 第27页 |
| ·RT-PCR结果 | 第27页 |
| ·重组质粒pUCmT-Gal-11的鉴定 | 第27-29页 |
| ·鸡Gal-11碱基序列比对 | 第29-32页 |
| ·鸡Gal-11核苷酸同源性分析 | 第32页 |
| ·鸡Gal-11氨基酸序列比对 | 第32-33页 |
| ·鸡Gal-11氨基酸同源性分析 | 第33页 |
| ·结论与讨论 | 第33-36页 |
| ·鸡β-防御素的研究现状 | 第34页 |
| ·目的组织的选择 | 第34页 |
| ·总RNA的提取 | 第34页 |
| ·引物的设计和RT-PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·Gal-11基因的序列与结构分析 | 第35-36页 |
| 4 固始鸡Gal-12基因成熟肽基因的克隆 | 第36-45页 |
| ·材料与方法 | 第36-39页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·鸡血液基因组DNA的提取 | 第36页 |
| ·PCR引物的设计与合成 | 第36-37页 |
| ·鸡Gai-12 cDNA的合成 | 第37页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第37页 |
| ·PCR产物与T载体的连接 | 第37页 |
| ·重组质粒的转化及转化菌的筛选 | 第37页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·小量重组质粒的提取 | 第38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38页 |
| ·重组质粒DNA测序 | 第38-39页 |
| ·结果与分析 | 第39-43页 |
| ·从鸡血液中提取的基因组DNA鉴定结果 | 第39页 |
| ·PCR结果 | 第39页 |
| ·重组质粒pUCmT-Gal-12的鉴定 | 第39-40页 |
| ·鸡Gal-12碱基序列比对 | 第40-42页 |
| ·鸡Gal-12氨基酸序列比对 | 第42-43页 |
| ·鸡Gal-12碱基同源性分析 | 第43页 |
| ·鸡Gal-12氨基酸同源性分析 | 第43页 |
| ·结论与讨论 | 第43-45页 |
| ·Gal-12基因的结构特点 | 第43页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第43-44页 |
| ·引物的设计和PCR扩增 | 第44页 |
| ·Gal-11基因的序列与结构分析 | 第44-45页 |
| 5 固始鸡Gal-11和Gal-12基因在大肠杆菌中的表达 | 第45-58页 |
| ·材料与方法 | 第45-50页 |
| ·材料 | 第45-47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·目的片段的制备 | 第47-48页 |
| ·表达质粒的构建 | 第48-49页 |
| ·重组表达质粒和表达工程菌的构建 | 第49页 |
| ·测序鉴定 | 第49页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第49页 |
| ·融合蛋白表达形式分析 | 第49-50页 |
| ·诱导表达对宿主菌的影响 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-55页 |
| ·pET32a-Gal-11和pET32a-Gal-12重组表达质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| ·重组质粒的诱导表达结果 | 第51-54页 |
| ·融合蛋白表达形式分析 | 第54-55页 |
| ·诱导表达对宿主菌的影响 | 第55页 |
| ·结论与讨论 | 第55-58页 |
| ·大肠杆菌表达系统的选择 | 第55-56页 |
| ·载体和宿主菌株的选择 | 第56页 |
| ·诱导表达条件的优化 | 第56-57页 |
| ·重组蛋白的定位分析 | 第57-58页 |
| 6 固始鸡Gal-11和Gal-12表达产物的纯化及活性检测 | 第58-63页 |
| ·材料与方法 | 第58-60页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-60页 |
| ·表达菌制备 | 第58页 |
| ·细胞提取物制备 | 第58-59页 |
| ·可溶性重组蛋白的纯化 | 第59页 |
| ·重组蛋白包涵体的纯化 | 第59页 |
| ·包涵体的复性 | 第59页 |
| ·重组蛋白的活性检测 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-61页 |
| ·Gal-11蛋白纯化结果 | 第60页 |
| ·Gal-12蛋白纯化结果 | 第60-61页 |
| ·重组蛋白的活性检测结果 | 第61页 |
| ·结论与讨论 | 第61-63页 |
| ·β-防御素在大肠杆菌中表达的研究现状 | 第61页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第61-62页 |
| ·重组蛋白pET32a-Gal-12的复性 | 第62页 |
| ·重组蛋白的活性检测 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| ABSTRACT | 第69-70页 |
