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应用多重PCR方法检测猪伪狂犬病毒细小病毒和圆环病毒2型

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1.文献综述第9-18页
   ·猪圆环病毒检测方法的研究进展第9-13页
     ·病毒的检测第9-11页
       ·病毒分离第9页
       ·病毒抗原检测第9-10页
       ·基因组检测第10-11页
     ·病毒抗体检测第11-13页
       ·间接免疫荧光试验第11页
       ·免疫过氮化物酶单层细胞试验第11页
       ·酶联免疫吸附试验第11-13页
   ·猪细小病毒诊断方法的研究进展第13-14页
     ·血清学诊断技术第13页
       ·检测PPV抗体诊断方法第13页
       ·检测PPV抗原的诊断方法第13页
     ·分子生物学诊断技术第13-14页
       ·检测抗原的诊断方法第13-14页
       ·PPV抗原抗体都检测的诊断方法第14页
   ·猪伪狂犬病病毒诊断方法的研究进展第14-18页
     ·动物实验第14页
     ·病毒分离鉴定第14页
     ·PrV抗原检测第14页
       ·皮肤变态反应第14页
       ·血清抗体检查第14-15页
     ·分子诊断第15-16页
     ·强弱毒鉴别诊断第16-18页
2.引言第18-19页
3 材料和方法第19-28页
   ·应用多重PCR方法检测猪伪狂犬病毒、细小病毒和圆环病毒2型第19-23页
     ·细胞和毒株第19页
     ·主要试剂第19页
       ·酶类第19页
       ·试剂盒第19页
       ·其它试剂第19页
     ·主要仪器第19页
     ·引物的设计第19-22页
     ·病毒培养第22页
     ·病毒模板的制备第22页
     ·多重PCR反应条件优化第22-23页
     ·敏感性实验第23页
     ·特异性实验第23页
     ·临床样品检测第23页
   ·猪圆环病毒2型的流行病学调查第23-28页
     ·病毒增殖用细胞及培养基第23-24页
     ·主要试剂第24-25页
     ·主要仪器第25页
     ·PCV2 ORF2基因的PCR检测第25-26页
     ·PCV2感染猪的病理变化第26页
     ·PCV2病毒的分离与鉴定第26-28页
       ·PCV2病毒的分离第26-27页
       ·PCR鉴定第27页
       ·PCV2病毒DNA的提取第27-28页
4 结果与分析第28-41页
   ·应用多重PCR方法检测猪伪狂犬病毒、细小病毒和圆环病毒2型第28-35页
     ·PCR各参数的优化第28-31页
       ·PCR引物浓度的滴定结果第28-29页
       ·MgCl_2浓度的滴定结果第29-30页
       ·dNTP浓度的滴定结果第30页
       ·TaqDNA聚合酶浓度第30页
       ·PCR反应退火温度实验结果图第30-31页
       ·PCR扩增优化条件结果第31页
     ·单重条件优化后PCR的电泳结果第31-32页
     ·二重条件优化后PCR的电泳结果第32-33页
     ·三重条件优化后PCR的电泳结果第33页
       ·三重PCR扩增优化条件结果第33页
     ·扩增的敏感性第33-34页
     ·扩增的特异性第34-35页
     ·临床检测结果第35页
   ·猪圆环病毒2型的流行病学调查第35-41页
     ·病料的PCR检测结果第35-37页
     ·感染猪的剖检病理变化第37-40页
   ·2.1 剖检变化第37-39页
       ·组织病理学变化第39-40页
     ·PCV2基因片段的PCR扩增第40-41页
5 结论和讨论第41-46页
   ·应用多重PCR方法检测猪伪狂犬病毒、细小病毒和圆环病毒2型第41-42页
     ·引物设计第41页
     ·PCR程序优化第41页
     ·PCR反应条件优化第41-42页
     ·其他影响因素第42页
     ·研究前景第42页
   ·猪圆环病毒2型的流行病学调查第42-45页
     ·病料的PCR检测第42-43页
     ·PCV2感染猪的病理变化第43-44页
     ·进一步研究的前景第44-45页
   ·结论第45-46页
参考文献第46-53页
英文摘要第53页

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