| 英文缩略表 | 第1-9页 |
| 中文摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第11-23页 |
| ·植物必需元素—磷 | 第11-15页 |
| ·磷的重要性 | 第11页 |
| ·磷的有效性 | 第11-12页 |
| ·植物对低磷的响应机制 | 第12-15页 |
| ·低磷下根系的变化 | 第13-14页 |
| ·低磷诱导有机酸分泌 | 第14页 |
| ·低磷对植物生理生化的影响 | 第14-15页 |
| ·低磷和miR399 | 第15页 |
| ·植物小分子RNA | 第15-20页 |
| ·植物miRNA 的特征 | 第15-17页 |
| ·植物microRNAs 的发生及其作用机制 | 第17-18页 |
| ·植物microRNAs 的功能 | 第18-20页 |
| ·miRNA 的负反馈调节 | 第18-19页 |
| ·miRNA 负责mRNA 的剪切 | 第19-20页 |
| ·miRNA 参与植物形态建成 | 第20页 |
| ·低磷和植物激素—乙烯 | 第20-22页 |
| ·乙烯的特征 | 第20页 |
| ·乙烯的发现历程 | 第20-21页 |
| ·乙烯的生物合成 | 第21-22页 |
| ·乙烯的生理功能 | 第22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-36页 |
| ·试验材料 | 第23-25页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·菌株和质粒 | 第23页 |
| ·酶及生化试剂 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·PCR 引物 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-36页 |
| ·CTAB 法提取RNA | 第25-26页 |
| ·RNA 含量和纯度检测 | 第26页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第26-27页 |
| ·反转录产物质量检测 | 第27页 |
| ·CTAB 法提取DNA | 第27-28页 |
| ·PCR 扩增条件和程序 | 第28页 |
| ·AtmiR399f 前体的PCR 扩增条件和程序 | 第28页 |
| ·PCR 扩增产物的回收 | 第28-29页 |
| ·PCR 产物的克隆 | 第29-31页 |
| ·大肠杆菌DH-5α感受态细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·重组载体的构建 | 第30页 |
| ·重组载体转化感受态细胞 | 第30页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第30-31页 |
| ·cDNA 序列测定 | 第31-32页 |
| ·质粒DNA 的酶切鉴定 | 第32页 |
| ·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备与转化 | 第32-33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第32-33页 |
| ·电转法转化农杆菌 | 第33页 |
| ·正义表达载体 PBI121-AtmiR399f 的构建 | 第33页 |
| ·农杆菌介导的番茄转化 | 第33-34页 |
| ·番茄继代培养 | 第34页 |
| ·转基因番茄的鉴定 | 第34-35页 |
| ·低磷处理转基因番茄 | 第35-36页 |
| ·MS 培养基低磷处理 | 第35页 |
| ·水培低磷处理 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-46页 |
| ·番茄中miR399 受低磷诱导 | 第36-37页 |
| ·RNA 的提取和质量检测 | 第36页 |
| ·反转录产物质量检测 | 第36-37页 |
| ·拟南芥AtmiR399f 前体片段的扩增 | 第37-38页 |
| ·拟南芥DNA 的提取 | 第37页 |
| ·AtmiR399f 前体片段的扩增 | 第37-38页 |
| ·表达载体 PBI121- AtmiR399f 的构建 | 第38-39页 |
| ·AtmiR399f 侵染番茄分化、抗性小苗的获得及转基因株系的鉴定 | 第39-46页 |
| ·番茄分化和抗性小苗的获得 | 第39页 |
| ·AtmiR399f 转基因番茄株系的鉴定 | 第39-40页 |
| ·过量表达miR399 影响番茄根系的构型 | 第40-42页 |
| ·转基因株系的茎粗增加 | 第42-43页 |
| ·转基因株系的种子增大 | 第43-44页 |
| ·miR399 正调控乙烯相关基因的表达 | 第44-46页 |
| 4 讨论 | 第46-48页 |
| ·AtmiR399f 转基因番茄的表型特征 | 第46页 |
| ·miR399 正调控乙烯相关基因的表达 | 第46-48页 |
| 5 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-59页 |
| 附录 | 第59-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第64页 |
