| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-19页 |
| ·转录因子 | 第10-12页 |
| ·转录因子概念、结构及活性调控 | 第10-11页 |
| ·AP2/EREBP转录因子家族的特征、分类和功能 | 第11-12页 |
| ·CBF/DREB转录因子的研究 | 第12-17页 |
| ·CBF/DREB转录因子的结构与特性 | 第13-14页 |
| ·拟南芥CBF/DREB转录因子家族的分离与鉴定 | 第14-15页 |
| ·其它植物的CBF/DREB转录因子 | 第15-16页 |
| ·CBF基因的调节因子 | 第16-17页 |
| ·CBF转录因子与植物的抗寒性 | 第17-18页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-35页 |
| ·试验材料 | 第19-20页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·菌株及质粒 | 第19页 |
| ·酶及生化试剂 | 第19页 |
| ·PCR引物 | 第19-20页 |
| ·试验方法 | 第20-35页 |
| ·植物组织总RNA的提取(CTAB法) | 第20页 |
| ·电泳检测RNA | 第20-21页 |
| ·RNA反转录成cDNA第一条链的合成 | 第21页 |
| ·植物基因组DNA的提取(改良的CTAB法) | 第21-22页 |
| ·山定子CBF基因中间片段的分离 | 第22-23页 |
| ·反向PCR分离山定子CBF基因的旁侧序列 | 第23-24页 |
| ·从琼脂糖凝胶中回收目的片段的PCR产物 | 第24页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第24-25页 |
| ·大肠杆菌DH5et感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第25-26页 |
| ·转化子的筛选与鉴定 | 第26-28页 |
| ·DNA序列测定及分析 | 第28页 |
| ·山定子转录因子CBF基因全长DNA的克隆 | 第28-30页 |
| ·山定子转录因子CBF基因表达载体的构建和和转化农杆菌 | 第30-33页 |
| ·拟南芥遗传转化及转基因植株的筛选 | 第33-35页 |
| 第三章 结果与分析 | 第35-57页 |
| ·山定子叶片组织中总RNA的提取 | 第35页 |
| ·山定子转录因子CBF基因中间片段的分离 | 第35-37页 |
| ·反向PCR分离山定子转录因子CBF基因的旁侧序列 | 第37-40页 |
| ·山定子转录因子CBF基因全长DNA的克隆 | 第40-42页 |
| ·山定子转录因子CBF基因的序列分析 | 第42-52页 |
| ·核苷酸序列的分析 | 第42页 |
| ·蛋白质序列分析 | 第42-52页 |
| ·山定子转录因子CBF基因表达载体的构建及转化农杆菌 | 第52-54页 |
| ·拟南芥遗传转化及转基因植株的筛选 | 第54-57页 |
| ·拟南芥遗传转化 | 第54-55页 |
| ·转基因植株的筛选 | 第55-57页 |
| 第四章 讨论 | 第57-60页 |
| ·RT-PCR与反向PCR法克隆基因 | 第57页 |
| ·山定子转录因子CBF基因的序列分析 | 第57-59页 |
| ·山定子CBF基因5′端非编码区在抗寒能力中可能存在的作用 | 第59页 |
| ·山定子CBF基因转化拟南芥 | 第59-60页 |
| 第五章 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |
