第一章 引言 | 第1-32页 |
1 蛋白激发子 | 第14-17页 |
·激发子定义及概要 | 第14-15页 |
·蛋白激发子种类及其在国内外研究进展 | 第15-17页 |
2 差异蛋白与差异基因筛选方法 | 第17-31页 |
·差异蛋白常用筛选方法 | 第17-23页 |
·差异基因常用筛选方法 | 第23-31页 |
3 研究目的与意义 | 第31-32页 |
第二章 稻瘟菌激活蛋白的纯化及其理化性质分析 | 第32-42页 |
1 材料与方法 | 第32-36页 |
·材料 | 第32-33页 |
·试验方法 | 第33-36页 |
·稻瘟菌生长曲线测定 | 第33-34页 |
·稻瘟菌激活蛋白的提纯 | 第34页 |
·样品的制备及电泳 | 第34页 |
·蛋白质氨基酸序列测定 | 第34-35页 |
·蛋白质等电点的测定 | 第35页 |
·蛋白质糖基化检测 | 第35页 |
·烟草愈伤组织和悬浮细胞的获得 | 第35页 |
·对烟草悬浮细胞过氧化氢含量的影响 | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-41页 |
·稻瘟菌生长曲线测定 | 第36-37页 |
·烟草愈伤组织和悬浮细胞的获得 | 第37-38页 |
·稻瘟菌植物激活蛋白的分离纯化及检测 | 第38-39页 |
·蛋白氨基酸序列测定 | 第39-40页 |
·蛋白等电点的测定 | 第40页 |
·蛋白糖基化检测 | 第40-41页 |
3.小结与讨论 | 第41-42页 |
第三章 稻瘟菌激活蛋白的生物学活性及功能分析 | 第42-52页 |
1.材料与方法 | 第42-45页 |
·材料 | 第42-43页 |
·试验方法 | 第43-45页 |
·稻瘟菌激活蛋白的制备与浓度测定 | 第43页 |
·激活蛋白对番茄和丝瓜发芽的影响 | 第43页 |
·激活蛋白对植株生长的影响 | 第43页 |
·激活蛋白对番茄、水稻抗性的诱导作用 | 第43-44页 |
·激活蛋白对黄瓜、豌豆幼苗及烟草悬浮细胞纤维素酶的影响 | 第44页 |
·激活蛋白对烟草悬浮细胞过氧化氢含量的影响 | 第44-45页 |
·激活蛋白对水稻幼苗脯氨酸含量的影响 | 第45页 |
·激活蛋白对碗豆幼苗醇脱氢酶活性的影响 | 第45页 |
2 结果与分析 | 第45-50页 |
·激活蛋白对植物丝瓜、番茄发芽的影响 | 第45-46页 |
·激活蛋白对植物豌豆和水稻幼苗生长的促进作用 | 第46-47页 |
·激活蛋白对水稻抗病性及抗旱性的诱导作用 | 第47-48页 |
·激活蛋白对黄瓜、豌豆幼苗及烟草悬浮细胞纤维素酶的影响 | 第48-49页 |
·激活蛋白对水稻幼苗脯氨酸含量的影响 | 第49-50页 |
·激活蛋白对碗豆幼苗醇脱氢酶活性的影响 | 第50页 |
·激活蛋白对烟草悬浮细胞过氧化氢含量的影响 | 第50页 |
3.小结与讨论 | 第50-52页 |
第四章 稻瘟菌激活蛋白激发水稻基因的差异表达 | 第52-74页 |
1.材料与方法 | 第52-62页 |
·材料 | 第52-53页 |
·试验方法 | 第53-62页 |
·水稻样品的处理 | 第53页 |
·蛋白质双向电泳 | 第53-55页 |
·高效液相色谱 | 第55页 |
·水稻总RNA的提取 | 第55-56页 |
·mRNA的纯化 | 第56页 |
·SSH文库的构建 | 第56-61页 |
·Southern Blotting检测 | 第61-62页 |
·阳性克隆测序及结果分析 | 第62页 |
2 结果与分析 | 第62-70页 |
·水稻样品的处理 | 第62页 |
·总蛋白分析 | 第62-65页 |
·蛋白质双向电泳 | 第62-63页 |
·溶解蛋白高效液相色谱分析 | 第63-65页 |
·水稻总RNA与mRNA的提取与检测 | 第65页 |
·SSH文库的构建 | 第65-70页 |
·Rsa I 酶切及接头效率的检测 | 第65-66页 |
·差减杂交PCR产物分析 | 第66-67页 |
·插入片段检测 | 第67页 |
·地高辛杂交检测 | 第67-68页 |
·阳性克隆测序及生物信息学分析 | 第68-70页 |
3 小结与讨论 | 第70-74页 |
·双向电泳 | 第70-71页 |
·高效液相 | 第71页 |
·SSH文库在水稻基因差异表达研究中的优越性及注意事项 | 第71-72页 |
·激活蛋白诱导的水稻差异表达基因 | 第72-74页 |
第五章 稻瘟菌激活蛋白基因的克隆与表达 | 第74-114页 |
1.材料与方法 | 第74-84页 |
·材料 | 第74-75页 |
·试验方法 | 第75-84页 |
·基因组DNA的提取 | 第75页 |
·稻瘟菌激活蛋白基因组DNA的克隆及鉴定 | 第75-78页 |
·稻瘟菌RNA的提取 | 第78-79页 |
·用磁珠PCR法获得稻瘟菌总cDNA | 第79-81页 |
·从稻瘟菌总cDNA中扩增目的基因并克隆检测 | 第81页 |
·酵母双杂交自激活检测 | 第81-83页 |
·原核表达 | 第83-84页 |
2 结果与分析 | 第84-111页 |
·稻瘟菌激活蛋白基因组DNA的克隆及鉴定 | 第84-96页 |
·稻瘟菌激活蛋白cDNA的克隆及鉴定 | 第96-101页 |
·总RNA的提取 | 第96-97页 |
·用磁珠和PCR方法从少量RNA获得cDNA | 第97-98页 |
·稻瘟菌激活蛋白基因的克隆及序列分析 | 第98-101页 |
·利用pET22b(+)进行表达载体的构建与表达 | 第101-103页 |
·利用pTWIN1进行表达载体的构建与表达 | 第103-104页 |
·利用pGEX-5X-1进行表达载体的构建与表达 | 第104-106页 |
·对载体pET22b(+)的改造与表达 | 第106-108页 |
·表达蛋白活性测定 | 第108-109页 |
·酵母双杂交自激活检测 | 第109-111页 |
3.小结与讨论 | 第111-114页 |
·扩增的基因 | 第111页 |
·cDNA的扩增 | 第111-112页 |
·稻瘟菌激活蛋白表达 | 第112-114页 |
总结 | 第114-115页 |
参考文献 | 第115-125页 |
致谢 | 第125页 |