| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-52页 |
| ·淀粉酶概述 | 第12-16页 |
| ·淀粉 | 第12-13页 |
| ·淀粉酶 | 第13-15页 |
| ·α-淀粉酶 | 第15-16页 |
| ·α-淀粉酶应用进展 | 第16-22页 |
| ·α-淀粉酶的来源与生产 | 第16页 |
| ·酶法加工淀粉 | 第16-20页 |
| ·α-淀粉酶的活性测定方法 | 第20-21页 |
| ·应用α-淀粉酶的研究热点 | 第21-22页 |
| ·α-淀粉酶分子生物学 | 第22-39页 |
| ·α-淀粉酶家族 | 第22-23页 |
| ·α-淀粉酶的分离和基因的克隆 | 第23-27页 |
| ·α-淀粉酶的一级结构 | 第27-29页 |
| ·α-淀粉酶的高级结构 | 第29-31页 |
| ·双功能α-淀粉酶—amylopullulanase | 第31-34页 |
| ·α-淀粉酶热稳定性的研究 | 第34-37页 |
| ·其它影响α-淀粉酶活性的因素 | 第37-38页 |
| ·α-淀粉酶在酵母中的异源表达 | 第38-39页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第39-51页 |
| ·巴斯德毕赤酵母 | 第41-42页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达载体 | 第42-43页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达重组蛋白的糖基化修饰 | 第43-45页 |
| ·高表达的策略 | 第45-49页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统优势和缺陷 | 第49-51页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第51-52页 |
| 第二章 来源于酸热脂环酸杆菌嗜酸性耐热α-淀粉酶的表达和性质 | 第52-69页 |
| ·实验材料 | 第52-53页 |
| ·菌种和质粒载体 | 第52页 |
| ·工具酶、生化试剂和试剂盒 | 第52页 |
| ·主要实验仪器和装置 | 第52-53页 |
| ·引物合成和DNA测序 | 第53页 |
| ·研究方法 | 第53-62页 |
| ·酸热脂环酸杆菌培养 | 第53页 |
| ·酸热脂环酸杆菌基因组总DNA的提取 | 第53-54页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第54-55页 |
| ·SDS-PAGE聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第55页 |
| ·使用Somogyi-Nelson法测定α-淀粉酶活性 | 第55-56页 |
| ·α-淀粉酶基因amy的克隆 | 第56-57页 |
| ·基因amy在大肠杆菌中的表达和α-淀粉酶的释放 | 第57-58页 |
| ·基因amy在巴斯德毕赤酵母中的表达 | 第58-60页 |
| ·重组α-淀粉酶酶学性质测定 | 第60-61页 |
| ·对可溶性淀粉水解程度的测定 | 第61页 |
| ·基因片amy’的克隆和表达 | 第61-62页 |
| ·结果与分析 | 第62-67页 |
| ·绘制测定α-淀粉酶活性的标准曲线 | 第62-63页 |
| ·α-淀粉酶编码基因amy的克隆 | 第63页 |
| ·基因片断amy’的克隆 | 第63-64页 |
| ·在大肠杆菌中表达α-淀粉酶基因amy | 第64页 |
| ·在巴斯德毕赤酵母中表达α-淀粉酶基因amy | 第64-65页 |
| ·α-淀粉酶rAMY的纯化和部分酶学性质 | 第65-66页 |
| ·α-淀粉酶rAMY对可溶性淀粉的水解程度 | 第66页 |
| ·α-淀粉酶rAMY的基因片段amy’在大肠杆菌中表达 | 第66-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-69页 |
| 第三章 一种酸性高温α-淀粉酶的基因改造和表达 | 第69-82页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·菌种和质粒载体 | 第69页 |
| ·工具酶、生化试剂和试剂盒 | 第69页 |
| ·主要实验仪器和装置 | 第69页 |
| ·引物合成和DNA测序 | 第69页 |
| ·研究方法 | 第69-74页 |
| ·α-淀粉酶活性测定 | 第69-70页 |
| ·α-淀粉酶基因BD5063的改造和全基因合成 | 第70-71页 |
| ·α-淀粉酶基因BD5063r的的克隆 | 第71-72页 |
| ·基因BD5063r在巴斯德毕赤酵母中表达 | 第72页 |
| ·α-淀粉酶的纯化 | 第72页 |
| ·淀粉酶活性染色 | 第72页 |
| ·α-淀粉酶酶学性质研究 | 第72-73页 |
| ·薄层层析分析淀粉分解产物 | 第73-74页 |
| ·α-淀粉酶糖基化情况分析 | 第74页 |
| ·结果与分析 | 第74-80页 |
| ·α-淀粉酶结构基因改造 | 第74-75页 |
| ·α-淀粉酶基因BD5063r的克隆 | 第75页 |
| ·在毕赤酵母中表达α-淀粉酶和表达产物活性鉴定 | 第75-76页 |
| ·α-淀粉酶的纯化 | 第76-77页 |
| ·酶学性质研究 | 第77-78页 |
| ·多组分表达产物的分析 | 第78-79页 |
| ·α-淀粉酶对可溶性淀粉的水解程度 | 第79-80页 |
| ·α-淀粉酶糖基化情况分析 | 第80页 |
| ·讨论 | 第80-81页 |
| ·本章小结 | 第81-82页 |
| 第四章 全文结论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 附录 | 第90-95页 |
| (附录1) 培养基和试剂的配制方法 | 第90-94页 |
| (附录2) 作者简历 | 第94页 |
| (附录3) 2003-2005年发表的论文 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
