| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-7页 |
| 第一篇 文献综述 | 第7-15页 |
| 摘要 | 第7页 |
| 0 前言 | 第7-8页 |
| 1 朊蛋白基因 | 第8页 |
| 2 朊蛋白 | 第8-9页 |
| 3 朊病毒的种属特异性及其形成与致病机制 | 第9-11页 |
| 4 绵羊朊蛋白基因多态性 | 第11-14页 |
| 5 存在的问题和展望 | 第14-15页 |
| 第二篇 第一部分绵羊朊蛋白等位基因片段多态性的研究 | 第15-26页 |
| 1 前言 | 第15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-20页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·血样 | 第15-16页 |
| ·菌株及质粒载体 | 第16页 |
| ·工具酶及其它相关试剂 | 第16页 |
| ·主要仪器与设备 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-20页 |
| ·引物设计与合成 | 第16页 |
| ·全血总DNA 的抽提 | 第16-17页 |
| ·朊蛋白基因片段的PCR 扩增 | 第17页 |
| ·PCR 产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第17页 |
| ·PCR 产物的SSCP 凝胶电泳 | 第17-18页 |
| ·溶液配制 | 第17页 |
| ·SSCP 电泳条件的试验 | 第17页 |
| ·8%非变性聚丙烯酰胺凝胶制作及电泳 | 第17-18页 |
| ·硝酸银染色 | 第18页 |
| ·PCR 扩增产物非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第18页 |
| ·DNA 纯化回收 | 第18-19页 |
| ·将待回收的DNA 片段经琼脂糖凝胶电泳回收 | 第18-19页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶DNA 回收 | 第19页 |
| ·等位基因片段的克隆、鉴定 | 第19-20页 |
| ·按常规方法制备感受态细胞 | 第19页 |
| ·转化 | 第19-20页 |
| ·阳性克隆的挑选和重组质粒的提取 | 第20页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第20页 |
| ·朊蛋白等位基因片段测序和序列分析 | 第20页 |
| 3 结果 | 第20-25页 |
| ·全血总DNA 的提取 | 第20页 |
| ·朊蛋白等位基因片段的扩增结果 | 第20-21页 |
| ·SSCP 凝胶电泳条件优化 | 第21-22页 |
| ·不同浓度甘油条件下的电泳结果 | 第21-22页 |
| ·不同浓度甘油和5%尿素条件下的电泳结果 | 第22页 |
| ·不同变性缓冲液对电泳结果的影响 | 第22页 |
| ·SSCP 凝胶电泳结果 | 第22-23页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第23页 |
| ·杂合子纯化回收后鉴定 | 第23页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第23-24页 |
| ·PrP 等位基因片段的测序结果及序列分析 | 第24-25页 |
| 4 讨论 | 第25-26页 |
| 第二部分 绵羊朊蛋白等位基因多态性的研究 | 第26-34页 |
| 1 前言 | 第26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-28页 |
| ·材料 | 第26-27页 |
| ·血样 | 第26页 |
| ·试剂、仪器、设备 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-28页 |
| ·引物设计与合成 | 第27页 |
| ·全血总 DNA 的提取 | 第27页 |
| ·朊蛋白基因的PCR 扩增 | 第27页 |
| ·PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电 | 第27页 |
| ·5%非变性聚丙烯酰胺凝胶（30ml 体积，0.1cm 胶条）电泳 | 第27页 |
| ·DNA 纯化回收 | 第27页 |
| ·等位基因片段的克隆与鉴定 | 第27-28页 |
| ·朊蛋白等位基因序列测定 | 第28页 |
| 3 结果 | 第28-32页 |
| ·全血总DNA 的提取 | 第28页 |
| ·朊蛋白等位基因片段的扩增结果 | 第28-29页 |
| ·非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结果 | 第29页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第29页 |
| ·PrP 等位基因的测序结果及序列分析 | 第29-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| 第三部分 结论 | 第34-35页 |
| 致谢 | 第35-36页 |
| 参考文献 | 第36-43页 |
| 缩写词英汉对照表 | 第43-44页 |
| 作者简介 | 第44-45页 |