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土鳖糖蛋白提取及体外肿瘤抑制作用研究

目录第1-5页
中文摘要第5-6页
英文摘要第6-7页
1 前言第7-13页
   ·肿瘤简介第7-8页
   ·引发肿瘤的因素第8-9页
   ·目前的抗肿瘤药物第9-10页
   ·有关传统中药抗肿瘤研究状况第10-11页
   ·肿瘤抑制实验方法的选择第11-12页
     ·体内实验第11-12页
     ·体外实验第12页
   ·细胞凋亡与细胞坏死第12页
   ·土鳖糖蛋白抗肿瘤研究的意义第12-13页
2.主要仪器与试剂第13页
   ·主要仪器第13页
   ·主要试剂第13页
3.材料与方法第13-21页
   ·实验材料第13-14页
     ·土鳖虫第14页
     ·肿瘤细胞系第14页
   ·实验方法第14-21页
     ·土鳖糖蛋白的提取纯化第14-15页
       ·土鳖糖蛋白粗提第14页
       ·Sevag脱蛋白第14页
       ·DEAE-50离子交换层析第14-15页
       ·Sephadex G-150分离纯化土鳖糖蛋白组分1第15页
     ·土鳖糖蛋白性质鉴定第15-16页
       ·DEAE分离后两土鳖糖蛋白组分含量测定第15页
       ·PAGE及SDS-PAGE检验糖蛋白组分1纯度第15-16页
     ·肿瘤细胞培养第16-21页
       ·肿瘤细胞培养体系第16页
       ·细胞传代第16-17页
       ·台盼篮活细胞计数法检测土鳖糖蛋白组分对细胞的作用第17页
       ·MTT法检测细胞对糖蛋白组分1的敏感性第17-18页
       ·Annexin V-FITC/PI双荧光染色检测第18-19页
       ·染色体DNA断裂检验法第19-20页
       ·细胞周期流式细胞术检测第20-21页
4.实验结果第21-38页
   ·土鳖糖蛋白提取纯化结果及性质鉴定第21-23页
     ·DEAE-50离子交换吸附层析结果第21-22页
     ·Sephadex分离纯化糖蛋白组分1第22-23页
   ·性质鉴定第23-25页
     ·糖蛋白浓度及杂蛋白含量检测第23-24页
       ·Bradfore法检测蛋白浓度结果第23页
       ·两组分250-350nm波长的吸收扫描结果第23页
       ·紫外吸收法测定蛋白含量第23页
       ·蒽酮比色法测定多糖含量第23-24页
     ·PAGE及SDS-PAGE检验糖蛋白组分1纯度第24-25页
   ·土鳖糖蛋白肿瘤抑制作用第25-38页
     ·苔盼蓝活细胞计数法检测土鳖糖蛋白组分对细胞的作用结果第25-28页
       ·糖蛋白组分1作用Eca109细胞24h后苔盼蓝活细胞计数结果第25-26页
       ·糖蛋白组分1作用Hela细胞24h后苔盼蓝活细胞计数结果第26-27页
       ·糖蛋白组分1作用Eca109细胞48h后苔盼蓝活细胞计数结果第27页
       ·糖蛋白组分1作用Hela细胞48h后苔盼蓝活细胞计数结果第27-28页
     ·MTT法检测细胞对糖蛋白组分1的敏感性结果第28-31页
       ·糖蛋白组分1对Eca109细胞作用24h的MTT检测结果第28-29页
       ·糖蛋白组分1对Hela细胞作用24h的MTT检测结果第29-30页
       ·糖蛋白组分1对Eca109细胞作用48h的MTT检测结果第30页
       ·糖蛋白组分1对Hela细胞作用48h的MTT检测结果第30-31页
     ·Annexin V-FITC/PI双荧光染色检测结果第31-32页
     ·染色体DNA断裂检验结果第32-33页
       ·糖蛋白组分1作用24h后细胞DNA电泳结果第32-33页
       ·糖蛋白组分1作用48h后细胞DNA电泳结果第33页
     ·细胞周期流式细胞术检测结果第33-38页
       ·糖蛋白对Eca109细胞作用24h后的结果第33-35页
       ·糖蛋白对Eca109细胞作用48h后的结果第35-36页
       ·糖蛋白对Hela细胞作用48h后的结果第36-38页
5.讨论第38-42页
   ·土鳖糖蛋白提取方法的理论依据第38页
   ·土鳖糖蛋白的电泳染色第38页
   ·土鳖糖蛋白分离纯化效果第38-39页
   ·肿瘤细胞培养第39页
   ·MTF实验方法讨论第39-40页
   ·Annexin V-FITC/PI双荧光染色凋亡检测讨论第40-41页
   ·染色体DNA断裂检验结果讨论第41页
   ·细胞周期流式细胞术检测结果讨论第41-42页
6.结论第42-43页
参考文献第43-45页
致谢第45-46页
附图第46-47页

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