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利用mRNA差异显示技术对甜菜M14品系花期特异表达基因的研究

中文摘要第1-3页
ABSTRACT第3-14页
第1章 前言第14-34页
   ·植物无融合生殖概述第14-20页
     ·植物无融合生殖及其意义第14页
     ·植物无融合生殖的分类第14-15页
     ·植物无融合生殖的研究进展第15-18页
     ·甜菜单体附加系M14品系的研究进展第18-20页
   ·mRNA差异显示技术及其研究进展第20-32页
     ·mRNA差异显示技术的原理第21-22页
     ·mRNA差异显示技术的基本程序第22页
     ·mRNA差异显示技术的优缺点第22-23页
     ·mRNA差异显示技术的改进与发展第23-29页
     ·mRNA差异显示技术的应用第29-32页
   ·研究的目的和意义第32-34页
第2章 材料与方法第34-54页
   ·实验材料第34-37页
     ·植物材料第34页
     ·引物第34-35页
     ·实验菌株与克隆载体第35-36页
     ·实验所用试剂第36页
     ·主要仪器设备第36-37页
   ·实验方法第37-54页
     ·总RNA提取第37-38页
     ·总RNA的定量及完整性检测第38-39页
     ·总RNA中污染DNA的去除第39-40页
     ·cDNA第一链的合成第40-41页
     ·PCR扩增反应第41页
     ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异片段第41-45页
     ·差异条带的回收及再扩增第45-47页
     ·差异片段的反向Northern斑点杂交第47-50页
     ·阳性片段的克隆第50-51页
     ·阳性重组克隆的筛选与鉴定第51-53页
     ·克隆片段的测序及其生物信息学分析第53-54页
第3章 结果第54-69页
   ·总RNA纯度及完整性测第54页
   ·逆转录结果的检验第54-55页
   ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳第55-57页
   ·回收条带的再扩增第57-58页
   ·差异片段的反向Northern斑点杂交第58-60页
     ·探针效价的测定结果第58-59页
     ·反向Northern斑点杂交检测结果第59-60页
   ·阳性重组克隆的筛选与鉴定第60-62页
     ·阳性重组克隆的初步筛选第60-61页
     ·克隆产物的 PCR鉴定结果第61-62页
   ·克隆片段的测序及其生物信息学分析第62-69页
     ·克隆片段的测序结果第62-64页
     ·克隆片段的生物信息学分析结果第64-69页
第4章 讨论第69-75页
   ·本实验采用mRNA差异显示技术的特点第69-72页
     ·实验材料的选择第69-70页
     ·总RNA提取及纯化处理第70-71页
     ·逆转录和 PCR扩增第71页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染技术第71页
     ·差异条带回收第71-72页
     ·反向Northern斑点杂交第72页
   ·甜菜 M14花期特异表达基因的克隆第72-73页
   ·甜菜 M14花期特异表达cDNA片段的生物信息学分析第73-74页
   ·后续工作思路第74-75页
结论第75-76页
攻读硕士学位期间发表的论文第76-77页
附录第77-85页
致谢第85-86页
参考文献第86-94页
独创性声明第94页
学位论文版权使用授权书第94页

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