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烟草TM2序列在转基因植物中的应用与功能分析

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
1 引言第14-36页
   ·转基因技术存在的问题及解决办法第14-19页
     ·转基因沉默及其产生原因第14-17页
     ·消除转基因沉默的方法第17-19页
   ·核基质结合序列在转基因中的作用及研究现状第19-35页
     ·细胞核与核基质第19-20页
     ·染色质状态与Loop 环模型第20-21页
     ·核基质结合序列(MARs)与染色体Loop结构第21-22页
     ·核基质结合序列(MARs)的分离与鉴定第22-24页
     ·核基质结合序列(MARs)的结构特征第24-25页
     ·核基质结合序列(MARs)的结合蛋白第25-27页
     ·核基质结合序列(MARs)对外源基因表达的影响第27-30页
     ·核基质结合序列(MARs)的核基质体外结合能力与体内功能的关系第30-31页
     ·核基质结合序列(MARs)作用的分子机理第31-35页
   ·本课题的目的和意义第35-36页
2 材料与方法第36-60页
   ·实验材料第36-39页
     ·植物材料第36页
     ·菌株与质粒第36页
     ·酶与各种生化试剂第36-37页
     ·实验用的引物和寡核苷酸第37-39页
   ·实验方法第39-60页
     ·烟草核基质结合序列的分离第39-41页
     ·烟草核基质结合序列与水稻核基质的体外结合试验第41-43页
     ·植物表达载体的构建第43-48页
     ·植物表达载体的转化第48-51页
     ·转基因植物的GUS表达分析第51-53页
     ·转基因植物的Northern 杂交分析第53-56页
     ·转基因植物的Southern 杂交分析第56-58页
     ·棉花GhNHX1基因在水稻中的作用分析第58-59页
     ·TM2转基因水稻植株T-DNA插入位点分析第59-60页
3 结果与分析第60-87页
   ·TM2序列是能与烟草核基质进行较强体外结合的序列第60-63页
     ·烟草核基质结合序列的分离第60页
     ·TM2克隆的获得第60-61页
     ·烟草核基质结合序列TM2的序列测定及结构分析第61-62页
     ·TM2序列与水稻核基质的体外结合试验第62-63页
   ·TM2 在转基因植物体内的功能鉴定第63-79页
     ·TM2在转基因双子叶植物烟草中提高外源gusA基因的表达水平第63-68页
     ·TM2序列在转基因单子叶作物水稻中提高外源gusA基因的表达水平第68-73页
     ·TM2 能够提高转基因水稻的耐盐性第73-77页
     ·TM2 提高水稻转化频率第77-79页
   ·TM2 的作用机理研究第79-87页
     ·TM2序列在表达核的单端与双端对外源GUS 基因表达的影响第79页
     ·TM2转基因植株中NPTII抗性基因的表达增强第79-80页
     ·TM2 重要功能序列的缺失分析第80-82页
     ·TM2 转基因水稻植株T-DNA 插入位点分析第82-87页
4 讨论第87-93页
   ·TM2在单子叶植物和双子叶植物中都能提高外源基因表达第87页
   ·TM2的作用依赖于启动子类型,但不能改变启动子的作用模式第87-88页
   ·TM2在单子叶植物和双子叶植物中都能提高转化频率第88-89页
   ·TM2的核心作用序列分析结果第89-91页
   ·TM2在异染色质区也能提高基因表达第91-92页
   ·研究设想第92页
   ·TM2的应用前景第92-93页
5 结论第93-94页
6 参考文献第94-114页
7 附录第114-121页
致谢第121-122页
攻读学位期间发表论文情况第122页

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