| 致谢 | 第1-10页 |
| 英文缩写符号及中英文对照表 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-16页 |
| 英文摘要 | 第16-21页 |
| 1 前言 | 第21-32页 |
| ·高等植物细胞质雄性不育分子机理研究进展 | 第21-26页 |
| ·细胞质雄性不育分子机理研究策略 | 第21-22页 |
| ·线粒体基因组中与细胞质雄性不育相关的基因 | 第22-26页 |
| ·线粒体特异开放阅读框与雄性不育 | 第23页 |
| ·线粒体能量代谢相关基因与雄性不育 | 第23-26页 |
| ·细胞程序化死亡与雄性不育 | 第26页 |
| ·高等植物花器官及小孢子发育机理研究进展 | 第26-28页 |
| ·核同源异型基因与花器官发育 | 第26-28页 |
| ·与小孢子发育相关的基因 | 第28页 |
| ·核质互作对线粒体及核基因表达影响的研究进展 | 第28-30页 |
| ·核恢复基因对线粒体基因表达的影响 | 第28-29页 |
| ·线粒体对核基因表达的影响 | 第29-30页 |
| ·线粒体呼吸抑制剂的研究进展 | 第30页 |
| ·植物细胞质雄性不育在杂种优势中的利用 | 第30页 |
| ·研究目的、意义及存在问题 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-50页 |
| ·实验材料 | 第32-34页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·菌株和质粒 | 第32-33页 |
| ·酶及生化试剂 | 第33页 |
| ·PCR引物 | 第33-34页 |
| ·实验方法 | 第34-50页 |
| ·CTAB法微量法提取基因组DNA | 第34-35页 |
| ·总RNA额提取(TRZIOL试剂盒) | 第35-36页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第36-37页 |
| ·基因克隆 | 第37-38页 |
| ·线粒体基因的筛选与克隆 | 第38-40页 |
| ·线粒体基因的筛选 | 第39页 |
| ·线粒体基因的克隆 | 第39-40页 |
| ·RNA编辑的分析方法 | 第40页 |
| ·核同源异型基因的克隆 | 第40页 |
| ·SPL基因cDNA全长的分离 | 第40-41页 |
| ·中间片段的获得 | 第40页 |
| ·目的基因cDNA 3'端片段的分离(3'-RACE) | 第40-41页 |
| ·目的基因cDNA 5'端片段的分离(5'-RACE) | 第41页 |
| ·目的基因cDNA全长的获得 | 第41页 |
| ·Northern杂交分析 | 第41-44页 |
| ·总RNA的提取 | 第42页 |
| ·甲醛变性胶电泳 | 第42页 |
| ·转膜 | 第42-43页 |
| ·预杂交 | 第43页 |
| ·探针的制备 | 第43-44页 |
| ·杂交 | 第44页 |
| ·洗膜 | 第44页 |
| ·放射自显影 | 第44页 |
| ·Southern杂交分析 | 第44-45页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第44页 |
| ·基因组DNA的限制性内切酶消化 | 第44页 |
| ·转膜 | 第44-45页 |
| ·探针制备 | 第45页 |
| ·预杂交、杂交及放射自显影 | 第45页 |
| ·orf220基因线粒体表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·编码区DNA添加酶切位点 | 第45页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第45页 |
| ·酶切反应 | 第45页 |
| ·去磷酸化 | 第45-46页 |
| ·回收 | 第46页 |
| ·连接 | 第46页 |
| ·转化 | 第46页 |
| ·重组子的筛选 | 第46页 |
| ·线粒体定位表达载体构建 | 第46页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化 | 第46-48页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第46-47页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第47页 |
| ·农杆菌介导转化茎用芥菜 | 第47-48页 |
| ·转基因植株的检测 | 第48页 |
| ·转基因茎用芥菜的检测 | 第48页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第48页 |
| ·线粒体抑制剂处理茎用芥菜 | 第48-49页 |
| ·叶用芥菜细胞质雄性不育系的合成 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-89页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系生物学性状 | 第50-51页 |
| ·茎用芥菜不育系开放阅读框orf220的分离与分析 | 第51-56页 |
| ·茎用芥菜不育系开放阅读框orf220的克隆 | 第51-52页 |
| ·茎用芥菜不育系开放阅读框orf220基因特性分析 | 第52-56页 |
| ·orf220基因序列特性分析 | 第52-54页 |
| ·orf220基因特性分析 | 第54-56页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系能量代谢相关基因的比较研究 | 第56-70页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系能量代谢相关基因的比较研究 | 第56-57页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系atpA基因的比较研究 | 第57-64页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系atpA基因的克隆 | 第57-61页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系atpA基因特性分析 | 第61-64页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系nad2基因的比较研究 | 第64-67页 |
| ·茎用芥菜不育系特异片段的克隆 | 第64-65页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系nad2-CMSF的特性研究 | 第65-67页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系atp9基因RNA编辑比较研究 | 第67-70页 |
| ·茎用芥菜保持系atp9基因RNA编辑 | 第67-68页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系atp9基因RNA编辑的比较研究 | 第68-70页 |
| ·茎用芥菜花器官发育相关基因的克隆与分析 | 第70-74页 |
| ·茎用芥菜花器官发育相关基因的克隆 | 第70-73页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系中花器官发育相关基因的表达 | 第73-74页 |
| ·茎用芥菜小孢子发育基因(BjSPL)的克隆与分析 | 第74-78页 |
| ·茎用芥菜小孢子发育基因(BjSPL)的克隆 | 第74-77页 |
| ·茎用芥菜不育系及其保持系中SPL基因的表达 | 第77-78页 |
| ·orf220基因的生物学功能分析 | 第78-80页 |
| ·orf220基因线粒体定位表达载体的构建 | 第78页 |
| ·orf220基因遗传转化茎用芥菜 | 第78-79页 |
| ·T_0代植株orf220基因的PCR检测 | 第79-80页 |
| ·T0代植株的育性鉴定 | 第80页 |
| ·线粒体抑制剂对花器官及花粉发育的影响 | 第80-86页 |
| ·线粒体抑制剂处理对茎用芥菜花器官发育的影响 | 第80-81页 |
| ·线粒体抑制剂处理对茎用芥菜花粉发育的影响 | 第81-84页 |
| ·线粒体抑制剂处理雌蕊育性的影响 | 第84-85页 |
| ·线粒体抑制剂处理对茎用芥菜核同源异型基因及SPL基因的表达的影响 | 第85-86页 |
| ·叶用芥菜(雪里蕻)orf220胞质雄性不育系的合成 | 第86-89页 |
| ·叶用芥菜(雪里蕻)orf220胞质雄性不育系回交世代及其相应保持系的性状 | 第86-88页 |
| ·叶用芥菜(雪里蕻)orf220胞质雄性不育系回交世代不育性相关标记的检测 | 第88-89页 |
| 4 讨论 | 第89-95页 |
| ·线粒体功能基因与茎用芥菜细胞质雄性不育 | 第89-91页 |
| ·线粒体atpA基因与茎用芥菜细胞质雄性不育 | 第89-90页 |
| ·线粒体nad2基因与茎用芥菜细胞质雄性不育 | 第90页 |
| ·线粒体atp9基因RNA编辑与茎用芥菜细胞质雄性不育 | 第90-91页 |
| ·orf220基因与茎用芥菜细胞质雄性不育 | 第91-92页 |
| ·核同源异型基因与茎用芥菜胞质不育系花器官的发育 | 第92-93页 |
| ·BjSPL基因与茎用芥菜不育系小孢子的发育 | 第93页 |
| ·线粒体抑制剂可诱导花粉败育 | 第93页 |
| ·茎用芥菜细胞质雄性不育的核质互作途径 | 第93-95页 |
| 5 参考文献 | 第95-104页 |
| 附录Ⅰ | 第104-111页 |
| 附录Ⅱ | 第111-114页 |
| 附录Ⅲ | 第114页 |
