| 第一章 漆酶高产菌株的诱变选育及产酶条件研究 | 第1-41页 |
| 摘要 | 第21-22页 |
| 1 引言 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-26页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第23页 |
| ·培养基 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-26页 |
| ·菌株的活化与保存 | 第24页 |
| ·孢子悬浮液的制备 | 第24-25页 |
| ·紫外诱变 | 第25页 |
| ·有益突变菌株的初筛 | 第25页 |
| ·有益突变菌株的复筛 | 第25页 |
| ·漆酶活性测定 | 第25页 |
| ·遗传稳定性筛选 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-33页 |
| ·孢子悬浮液的制备与紫外诱变剂量的确定 | 第26-27页 |
| ·有益突变菌的获得及其产酶特性 | 第27-30页 |
| ·碳源对SAH-12漆酶分泌的影响 | 第30页 |
| ·氮源对SAH-12漆酶分泌的影响 | 第30页 |
| ·培养基初始pH对SAH-12漆酶分泌的影响 | 第30-31页 |
| ·诱导剂对SAH-12漆酶分泌的影响 | 第31-32页 |
| ·综合因素对SAH-12漆酶分泌的影响 | 第32-33页 |
| 4 讨论 | 第33-37页 |
| ·紫外诱变与高产菌株筛选 | 第33-35页 |
| ·菌株产酶条件的优化 | 第35-37页 |
| 5 参考文献 | 第37-41页 |
| 第二章 粗毛栓菌及其诱变菌株SAH-12漆酶同工酶和RAPD比较分析 | 第41-63页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| 1 引言 | 第43-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-49页 |
| ·实验材料 | 第44-46页 |
| ·菌株 | 第44页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44-45页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·菌株的活化与保存 | 第46页 |
| ·粗酶液的制备 | 第46页 |
| ·同工酶电泳分析 | 第46-47页 |
| ·基因组DNA的提取与检测 | 第47-48页 |
| ·RAPD分析 | 第48-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-57页 |
| ·碳源对漆酶同工酶分泌的影响 | 第49-51页 |
| ·氮源对漆酶同工酶分泌的影响 | 第51-53页 |
| ·初始培养pH对漆酶同工酶分泌的影响 | 第53页 |
| ·诱导剂对漆酶同工酶分泌的影响 | 第53-56页 |
| ·SAH-12和T.gallica基因组DNA的RAPD分析结果 | 第56-57页 |
| 4 讨论 | 第57-60页 |
| ·培养条件对SAH-12和T.gallica漆酶同工酶谱的影响 | 第57-58页 |
| ·SAH-12和T.gallica同工酶谱与酶活性产量的关系 | 第58页 |
| ·SAH-12和T.gallica基因组DNA的多态性 | 第58-60页 |
| 5 参考文献 | 第60-63页 |
| 第三章 粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶的分离纯化与酶学性质研究 | 第63-85页 |
| 摘要 | 第64-65页 |
| 1 引言 | 第65-66页 |
| 2 材料与方法 | 第66-71页 |
| ·实验材料 | 第66-68页 |
| ·菌株 | 第66页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66页 |
| ·溶液和缓冲液 | 第66-68页 |
| ·实验方法 | 第68-71页 |
| ·菌株的活化与保存 | 第68页 |
| ·粗酶液的制备 | 第68页 |
| ·同工酶电泳分析 | 第68页 |
| ·漆酶活性测定 | 第68页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第68-69页 |
| ·漆酶的分离纯化 | 第69页 |
| ·表观分子量测定 | 第69页 |
| ·等电点测定 | 第69页 |
| ·糖含量测定 | 第69-70页 |
| ·动力学常数Km值的测定 | 第70页 |
| ·温度对酶活性和热稳定性的影响 | 第70页 |
| ·pH对酶活性和稳定性的影响 | 第70页 |
| ·金属离子和抑制剂对酶活性的影响 | 第70页 |
| ·对苹果汁多酚去除率的测定 | 第70页 |
| ·对不同染料的脱色率测定 | 第70-71页 |
| 3 结果与分析 | 第71-78页 |
| ·漆酶同工酶 | 第71页 |
| ·漆酶的分离纯化 | 第71-73页 |
| ·硫酸铵分级盐析饱和度的确定 | 第71-72页 |
| ·漆酶的分离纯化 | 第72-73页 |
| ·漆酶Lac1的酶学性质 | 第73-78页 |
| ·表观分子量、等电点和糖含量 | 第73页 |
| ·动力学常数Km值 | 第73-74页 |
| ·最适反应温度及热稳定性 | 第74-75页 |
| ·最适反应pH及pH稳定性 | 第75-76页 |
| ·金属离子和抑制剂对酶活性的影响 | 第76-77页 |
| ·对苹果汁多酚的去除作用 | 第77页 |
| ·对染料的脱色作用 | 第77-78页 |
| 4 讨论 | 第78-81页 |
| ·SAH-12漆酶Lac1与出发菌T.gallica漆酶的性质比较 | 第78-79页 |
| ·SAH-12漆酶Lac1的应用潜力 | 第79-80页 |
| ·值得进一步探讨的问题 | 第80-81页 |
| 5 参考文献 | 第81-85页 |
| 第四章 粗毛栓菌及其诱变株SAH-12在麦草培养基中产漆酶和降解木质纤维素研究 | 第85-100页 |
| 摘要 | 第86-87页 |
| 1 引言 | 第87-88页 |
| 2 材料与方法 | 第88-93页 |
| ·实验材料 | 第88-89页 |
| ·菌株 | 第88页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第88页 |
| ·培养基 | 第88-89页 |
| ·实验方法 | 第89-93页 |
| ·菌株的培养 | 第89页 |
| ·漆酶的提取 | 第89页 |
| ·漆酶活性测定 | 第89页 |
| ·培养基干失重率测定 | 第89-90页 |
| ·纤维素含量测定 | 第90页 |
| ·半纤维素含量测定 | 第90-92页 |
| ·木质素含量测定 | 第92-93页 |
| 3 结果与分析 | 第93-96页 |
| ·SAH-12和T.gallica在麦草粉培养基中产漆酶的能力 | 第93-94页 |
| ·SAH-12和T.gallica对麦草粉的降解能力 | 第94-96页 |
| 4 讨论 | 第96-98页 |
| ·SAH-12和T.gallica漆酶产量与木质纤维素降解的关系 | 第96页 |
| ·天然麦草粉对T.gallica和SAH-12漆酶分泌的影响 | 第96页 |
| ·影响T.gallica和SAH-12降解天然麦草粉木质纤维素的因素 | 第96-97页 |
| ·T.gallica和SAH-12固体发酵降解天然麦草粉木质纤维素的特征 | 第97-98页 |
| 5 参考文献 | 第98-100页 |
| 第五章 粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶基因的克隆与序列分析 | 第100-130页 |
| 摘要 | 第101-102页 |
| 1 引言 | 第102页 |
| 2 材料与方法 | 第102-108页 |
| ·实验材料 | 第102-103页 |
| ·主要试剂 | 第102-103页 |
| ·菌株及载体 | 第103页 |
| ·培养基 | 第103页 |
| ·实验方法 | 第103-108页 |
| ·总RNA的提取和检测 | 第103-104页 |
| ·基因组DNA的提取和检测 | 第104页 |
| ·漆酶基因克隆引物的设计 | 第104-105页 |
| ·漆酶基因3′-末端cDNA的合成 | 第105页 |
| ·漆酶基因5′-末端cDNA的合成 | 第105-106页 |
| ·漆酶结构基因和cDNA的合成 | 第106页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第106-107页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第107页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备及质粒DNA转化 | 第107-108页 |
| ·重组子的筛选和鉴定 | 第108页 |
| ·DNA序列测定与分析 | 第108页 |
| 3 结果与分析 | 第108-123页 |
| ·基因组DNA的制备 | 第108-109页 |
| ·总RNA的制备 | 第109页 |
| ·漆酶基因3′-和5′-末端cDNA的克隆测序及全长cDNA序列的拼接 | 第109-111页 |
| ·漆酶基因cDNA的克隆测序及推导氨基酸序列分析 | 第111-115页 |
| ·漆酶结构基因的克隆测序及序列分析 | 第115-117页 |
| ·SAH-12漆酶基因Lacc1编码成熟蛋白二级结构预测分析 | 第117-122页 |
| ·SAH-12漆酶基因Lacc1编码成熟蛋白三级结构预测分析 | 第122-123页 |
| 4 讨论 | 第123-126页 |
| ·SAH-12基因Lacc1编码漆酶的活性 | 第123-124页 |
| ·SAH-12漆酶基因的拷贝数 | 第124页 |
| ·SAH-12漆酶的N-糖基化位点及其结构基因的内含子 | 第124-125页 |
| ·SAH-12漆酶基因Lacc1与T.gallica漆酶基因lacA的比较 | 第125-126页 |
| 5 参考文献 | 第126-130页 |
| 第六章 漆酶的研究进展(文献综述) | 第130-182页 |
| 1 引言 | 第131-132页 |
| 2 漆酶的分布 | 第132-135页 |
| ·漆酶在真菌中的分布 | 第132-133页 |
| ·漆酶在植物中的分布 | 第133-134页 |
| ·漆酶在原核生物中的分布 | 第134-135页 |
| ·漆酶在其它生物中的分布 | 第135页 |
| 3 漆酶产生真菌的选育 | 第135-136页 |
| 4 真菌漆酶的合成 | 第136-139页 |
| ·漆酶的合成方式 | 第136-137页 |
| ·影响漆酶合成的因素 | 第137-139页 |
| 5 漆酶的分离纯化 | 第139-140页 |
| 6 真菌漆酶的组成与理化特性 | 第140-145页 |
| ·漆酶的分子量 | 第140页 |
| ·漆酶的铜原子 | 第140-141页 |
| ·漆酶的氨基酸序列 | 第141-142页 |
| ·漆酶的多糖含量 | 第142页 |
| ·漆酶的等电点pI | 第142页 |
| ·漆酶的最适反应温度 | 第142页 |
| ·漆酶的最适反应pH | 第142-143页 |
| ·金属离子和酶抑制剂对漆酶反应活性的影响 | 第143页 |
| ·反应介质对漆酶反应活性的影响 | 第143页 |
| ·漆酶的底物特异性 | 第143-145页 |
| 7 漆酶的三维结构与活性中心 | 第145-153页 |
| ·漆酶的三级结构 | 第145-148页 |
| ·T1Cu单核结合位点 | 第148-150页 |
| ·T2／T3Cu三核铜结合位点 | 第150-153页 |
| 8 漆酶的催化机理 | 第153-154页 |
| ·漆酶的催化机理 | 第153-154页 |
| ·漆酶的结构与氧化还原电位的关系 | 第154页 |
| 9 漆酶的生理功能 | 第154-155页 |
| ·降解木质素及降解产物解毒 | 第154-155页 |
| ·参与病源菌的致病过程 | 第155页 |
| ·参与生物色素合成和昆虫表皮骨化 | 第155页 |
| 10 漆酶基因的克隆与表达 | 第155-158页 |
| ·基因克隆 | 第155-158页 |
| ·基因表达 | 第158页 |
| 11 漆酶的应用 | 第158-164页 |
| ·生物制浆造纸 | 第158-160页 |
| ·生物制浆 | 第158-159页 |
| ·生物漂白 | 第159页 |
| ·造纸废水处理 | 第159-160页 |
| ·环境保护与修复 | 第160-161页 |
| ·含氯芳香污染物和致癌多环芳香族化合物的降解 | 第160页 |
| ·合成染料脱色与解毒 | 第160-161页 |
| ·其它环境污染物的降解 | 第161页 |
| ·生物传感器与生物检测 | 第161-162页 |
| ·食品加工 | 第162-163页 |
| ·有机合成 | 第163页 |
| ·其它应用 | 第163-164页 |
| 12 参考文献 | 第164-182页 |
| 结论 | 第182-184页 |
| 致谢 | 第184-185页 |
| 作者简介 | 第185-186页 |
| 在读期间所做的工作 | 第186-187页 |
