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丛枝菌根真菌的分离鉴定和生物学特性研究及分子探针的设计与应用

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 文献综述第12-32页
   ·丛枝菌根简介及其生理生化研究概况第12-17页
     ·丛枝菌根(AM)真菌简介第12-13页
     ·AM真菌与宿主植物之间的相互关系第13页
     ·丛枝菌根(AM)的作用及其作用机制第13-15页
     ·丛枝菌根研究历史第15-17页
   ·菌根真菌在重金属污染环境中的作用第17-24页
     ·重金属污染及其产生的环境问题第17-18页
     ·对重金属污染土壤的生物修复作用第18-22页
     ·丛枝菌根的在重金属污染土壤中的生物修复作用第22-24页
   ·分子生物学技术在丛枝菌根研究中的应用第24-28页
     ·PCR技术的应用第24-26页
     ·RAPD(Random Amplified Polymorphism DNA)技术第26页
     ·RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)技术第26页
     ·SSCP(Single-Strand Conformation Polymorphism)技术第26-27页
     ·同功酶技术的应用第27-28页
     ·其它相关技术的应用第28页
   ·基因组文库第28-32页
     ·用于构建基因组文库的λ噬菌体载体及构建基因组文库的基本步骤第29-30页
     ·用于构建基因组文库的λZAP载体和λZAPⅡ载体第30-31页
     ·基因组文库的构建与AM研究第31-32页
第二章 AM真菌的分离鉴定和菌根效应评价第32-41页
   ·引言第32页
   ·材料和方法第32-35页
     ·土样采集及处理第32-33页
     ·AM真菌的分离与纯化第33-34页
     ·AM真菌孢子的鉴定第34页
     ·高效菌株的筛选及应用第34-35页
   ·结果与讨论第35-41页
     ·AM真菌的分布特点及其生物学特性第35-38页
     ·高效AM真菌菌株的筛选第38-39页
     ·田间接种试验第39-41页
第三章 三种AM真菌PCR种特异性引物的设计第41-60页
   ·引言第41-42页
   ·材料和方法第42-45页
     ·供试生物材料第42页
     ·HAU-D13、HAUO1和HAU-A7孢子的嵌套PCR扩增第42-43页
     ·PCR产物的回收与测序第43页
     ·网上同源序列的比对第43页
     ·引物XLD3、XLO3和XLA2的合成与特异性验证第43-44页
     ·植物组织对PCR反应的影响第44-45页
     ·田间植物根系中AM真菌的PCR检测第45页
   ·结果与分析第45-55页
     ·AM真菌HAU-D13、HAUO1和HAU-A7的纯化与繁殖第45页
     ·引物的设计第45-51页
     ·引物特异性验证第51-55页
   ·田间试验中AM真菌的PCR检测第55-58页
   ·讨论第58-60页
第四章 丛枝菌根真菌HAU-B5-B’基因组文库的构建与筛选第60-82页
   ·引言第60页
   ·材料和方法第60-71页
     ·供试AM真菌第60-61页
     ·应用嵌套PCR技术与DNA序列分析,验证HAU-B5-B’孢子的纯度第61-62页
     ·基因组文库的构建第62-67页
     ·基因组文库的筛选第67-69页
     ·PCR种特异性引物的设计与特异性验证第69页
     ·PCR引物在盆栽中的应用第69-70页
     ·试剂配方第70-71页
   ·结果与分析第71-79页
     ·孢子纯度的验证第71-73页
     ·基因组文库的构建第73-75页
     ·基因组文库的筛选第75-76页
     ·PCR种特异性引物的设计与特异性验证第76-78页
     ·PCR引物在盆栽中的应用第78-79页
   ·讨论第79-82页
第五章 利用嵌套多重PCR技术研究田间植物的部分AM真菌区系第82-92页
   ·引言第82-83页
   ·材料和方法第83-85页
     ·生物材料第83页
     ·DNA粗提液的制备第83-84页
     ·PCR引物和第一轮PCR反应第84页
     ·嵌套PCR与嵌套多重PCR扩增第84-85页
   ·结果第85-89页
     ·引物特异性验证第85页
     ·引物分析第85页
     ·嵌套PCR的敏感性第85-86页
     ·嵌套多重PCR的可行性实验第86页
     ·利用嵌套多重PCR技术研究野外植物根系中的AM真菌组成第86-89页
   ·讨论第89-92页
第六章 几种AM真菌在镉污染环境中对紫云英的耐镉性的影响及其对土壤的生物修复作用第92-105页
   ·引言第92-93页
   ·材料和方法第93-96页
     ·供试植物、接种剂和土壤第93-94页
     ·盆栽实验设计第94页
     ·盆栽实验收获和统计分析第94-95页
     ·利用PCR技术对AM真菌的探测第95页
     ·试剂第95-96页
   ·结果第96-103页
     ·AM真菌的侵染第96-98页
     ·接种AM真菌的生长效应第98-99页
     ·植物对Cd的吸收第99-101页
     ·AM对土壤Cd浓度的影响第101-102页
     ·AM对土壤中有效磷含量的影响第102页
     ·利用PCR技术对感染根段的AM真菌的探测第102-103页
   ·讨论第103-105页
参考文献第105-117页
致谢第117页

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