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人类心脏发育候选基因ZNF649的克隆与功能研究

中英文缩写词简表第1-4页
中文摘要第4-6页
英文摘要第6-12页
第一章 引言和文献综述第12-33页
 1 心脏发育的研究第12-13页
 2 人心脏发育调控基因第13-14页
 3 MAPK信号途径与心脏发育第14-23页
   ·MAPK途径简介第15-17页
   ·MAPK的四种途径第17-20页
     ·ERK途径第17-18页
     ·SAPK/JNK途径第18-19页
     ·p38途径第19-20页
     ·MKK5/MAPKerk途径:第20页
   ·MAPK途径之间相互作用第20-21页
   ·MAPK信号途径与心脏发育第21-23页
 4 锌指家族与心脏发育第23-31页
   ·锌指蛋白概述第23-24页
   ·C2H2型锌指蛋白第24-29页
     ·C2H2型结构特点第24-26页
     ·KRAB的结构第26-27页
     ·KRAB锌指蛋白的生理功能第27页
     ·KRAB框的转录抑制作用第27-29页
   ·锌指蛋白与心脏发育第29-31页
 5 本文的研究意义第31-33页
第二章 人类新基因ZNF649的克隆、序列分析及其功能研究第33-61页
 1 材料与方法第33-47页
   ·实验材料第33-37页
     ·主要材料第33-34页
     ·菌株和质粒第34-35页
     ·主要生化试剂第35页
     ·缓冲液和培养基第35页
     ·主要实验仪器第35-36页
     ·生物信息学分析的主要软件与数据库第36-37页
   ·实验方法第37-47页
     ·引物设计与合成第37-38页
     ·总RNA提取第38页
     ·反转录第38-39页
     ·巢式PCR反应第39页
     ·凝胶回收第39-40页
     ·连接第40页
     ·感受态细胞的制备第40页
     ·连接产物的转化第40-41页
     ·重组克隆的筛选和鉴定第41页
     ·质粒酶切第41页
     ·5′RACE第41-42页
     ·Northern杂交实验第42-43页
     ·真核表达重组质粒的大量制备第43-44页
     ·常规细胞培养及转染第44-45页
     ·亚细胞定位观察第45页
     ·基因信号途径的report assay第45-46页
     ·转基因稳定表达细胞系的建立第46-47页
 2 实验结果第47-58页
   ·ZNF649基因全长cDNA的克隆及序列分析第47-48页
     ·PCR产物电泳第47页
     ·重组质粒的鉴定第47-48页
     ·核苷酸序列测定第48页
     ·5′RACE PCR第48页
   ·Northern分析第48-50页
   ·ZNF649的基因结构及基因组定位第50页
   ·ZNF649的蛋白质生物信息学分析第50-53页
   ·ZNF649的细胞定位分析第53页
   ·ZNF649基因的Report Assay分析第53-54页
   ·ZNF649蛋白在MAPK途径中的转录活性分析第54-56页
   ·ZNF649中KRAB框的抑制作用第56-58页
     ·ZNF649结构域分段研究第56页
       ·ZNF328基因的结构域分段报告基因表达检测第56-58页
 3 讨论第58-61页
第三章 其他方面的工作第61-72页
 1 利用模式动物鸡研究早期心脏发育第61-63页
 2 鸡胚各发育时期的主要形态学特征第63-64页
 3 鸡胚的培养及发育时期的确定第64-72页
   ·材料、仪器与试剂第64页
   ·实验方法第64-65页
   ·结果与分析第65-72页
参考文献第72-78页
附录第78-80页
致谢第80页

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