| 第一章 文献综述 | 第1-23页 |
| ·番茄细菌性溃疡病菌的概述 | 第8-10页 |
| ·番茄溃疡病菌的检测方法 | 第10-12页 |
| ·寄主植物接种检测 | 第10-11页 |
| ·血清学方法检测 | 第11页 |
| ·脂肪酸甲酯分析 | 第11页 |
| ·噬菌体定型法 | 第11-12页 |
| ·植物病原细菌分子检测新技术 | 第12-15页 |
| ·分子杂交检测法 | 第12页 |
| ·经典PCR 技术在植物病原细菌检测中的应用 | 第12-14页 |
| ·PCR 技术在植物病原细菌检测中的新突破 | 第14-15页 |
| ·杂交检测的新进展 | 第15页 |
| ·实时荧光PCR 检测技术 | 第15-21页 |
| ·TaqMan 探针 | 第16-17页 |
| ·Amplisensor 探针 | 第17-18页 |
| ·分子信标 | 第18-20页 |
| ·杂交双探针 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-32页 |
| ·供试菌株 | 第23页 |
| ·仪器和试剂 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第24-25页 |
| ·核酸制备 | 第25-27页 |
| ·细菌核酸提取 | 第25-26页 |
| ·番茄叶片的核酸提取 | 第26页 |
| ·种子核酸的提取 | 第26-27页 |
| ·接种及带菌种子的制备 | 第27页 |
| ·番茄细菌性溃疡病菌165-23SrDNA 基因普通PCR 扩增 | 第27-30页 |
| ·引物的设计 | 第27页 |
| ·反应体系及扩增条件 | 第27页 |
| ·PCR 产物电泳分析 | 第27-28页 |
| ·PCR 产物的克隆和转化 | 第28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第28-29页 |
| ·克隆的筛选 | 第29页 |
| ·质粒的提取和酶切 | 第29-30页 |
| ·番茄细菌性溃疡病菌实时荧光PCR 检测方法的建立 | 第30-32页 |
| ·TaqMan探针与引物的设计合成 | 第30页 |
| ·实时荧光PCR 检测 | 第30-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-41页 |
| ·PCR 产物的克隆及序列测定 | 第32-33页 |
| ·常规PCR 的特异性检测 | 第33-34页 |
| ·实时荧光PCR 的特异性检测 | 第34-35页 |
| ·实时荧光PCR 与常规PCR 的相对灵敏度比较 | 第35-36页 |
| ·常规PCR 及实时荧光PCR 对未显症接种苗的检测 | 第36-37页 |
| ·常规PCR 及实时荧光PCR 对模拟染菌种子的检测 | 第37-41页 |
| ·以模拟带菌种子的浸泡液为模板进行常规及实时荧光PCR 检测 | 第37-38页 |
| ·以模拟带菌种子的核酸为模板进行常规及实时荧光PCR 检测 | 第38-41页 |
| 第四章 小结与讨论 | 第41-44页 |
| ·重要结论 | 第41-42页 |
| ·目的基因的选取 | 第42页 |
| ·核酸的提取、纯化及抑制物质的去除 | 第42页 |
| ·PCR 反应条件的优化 | 第42-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 作者简介 | 第52页 |
