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PtLFY基因启动子的表达特性分析及其在基因删除系统中的应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
引言第12-14页
1 文献综述第14-23页
   ·转基因植物安全性问题第14页
   ·防止外源基因逃逸的分子技术第14-20页
     ·母系遗传第15-16页
     ·雄性不育第16-17页
     ·种子败育第17-18页
     ·闭花授粉和无融合生殖第18页
     ·基因组不相容性第18-19页
     ·暂时和组织特异性控制第19页
     ·转基因缓和第19-20页
     ·外源基因清除技术(Gene-deletor)第20页
   ·展望第20-21页
   ·立项依据与技术路线第21-23页
2 毛白杨尸/IFF基因启动子的克隆、序列分析及载体构建第23-31页
   ·材料方法第23-26页
     ·材料第23页
     ·方法第23-26页
       ·毛白杨PtLFY基因启动子序列的克隆第23-25页
       ·植物表达载体的构建第25页
       ·农杆菌感受态的制备第25页
       ·植物表达载体转化农杆菌第25-26页
   ·结果分析第26-30页
     ·毛白杨PtLFY基因启动子的克隆第26页
     ·毛白杨PtLFY基因启动子片段的序列分析第26-29页
     ·植物表达载体的构建第29-30页
   ·讨论第30-31页
3 PtLFY启动子在烟草及毛白杨中的瞬时表达分析第31-35页
   ·材料方法第31页
     ·材料第31页
     ·方法第31页
       ·农杆菌的活化第31页
       ·PtLFY基因启动子在烟草及毛白杨中的瞬时表达第31页
       ·GUS组织化学染色第31页
   ·结果分析第31-33页
     ·PtLFY启动子在烟草及毛白杨中的瞬时表达第31-33页
   ·讨论第33-35页
     ·农杆菌介导的瞬时表达第33-35页
4 PtLFY启动子在烟草中的表达特性分析第35-43页
   ·材料方法第35-37页
     ·材料第35页
     ·方法第35-37页
       ·农杆菌介导转化法转化烟草第35-36页
       ·转基因烟草的PCR检测第36页
       ·阳性植株的GUS组织化学染色第36页
       ·转基因烟草的总RNA提取第36页
       ·cDNA第一链的合成第36-37页
       ·转基因植株的半定量分析第37页
   ·结果分析第37-41页
     ·PtLFY基因启动子转化烟草第38页
     ·转基因烟草的PCR检测第38-39页
     ·转基因烟草的GUS组织化学染色第39-40页
     ·转基因烟草的半定量PCR分析第40-41页
       ·总RNA的提取与检测第40页
       ·PtLFY启动子的表达模式分析第40-41页
   ·讨论第41-43页
     ·影响受体材料转化率的因素第41页
     ·烟草的遗传转化第41页
     ·转基因烟草的鉴定第41页
     ·转基因烟草的GUS组织化学染色第41-42页
     ·转基因植株的半定量PCR分析第42-43页
5 PtLFY启动子在杨树中的表达特性分析第43-48页
   ·材料方法第43-44页
     ·材料第43页
     ·方法第43-44页
       ·农杆菌介导转化法转化杨树第43页
       ·转基因杨树的PCR检测第43-44页
       ·转基因植株的GUS组织化学染色第44页
       ·转基因烟草的总RNA提取第44页
       ·cDNA第一链的合成第44页
       ·转基因植株的半定量分析第44页
   ·结果分析第44-47页
     ·PtLFY基因启动子转化杨树第44-45页
     ·转基因杨树的PCR检测第45-46页
     ·转基因毛白杨的GUS组织化学染色第46页
     ·转基因杨树的半定量PCR分析第46-47页
       ·总RNA的提取与检测第46-47页
       ·PtLFY启动子的表达模式分析第47页
   ·讨论第47-48页
6 基因删除系统在烟草及毛白杨中的应用第48-54页
   ·材料方法第48-50页
     ·材料第48页
     ·方法第48-50页
       ·基因删除系统的载体构建第48页
       ·植物表达载体转化农杆菌第48页
       ·农杆菌介导的叶盘转化法转化烟草和毛白杨第48-49页
       ·转基因植株的PCR检测第49-50页
       ·转基因植株的GUS组织化学检测第50页
   ·结果分析第50-54页
     ·基因删除系统转化烟草及毛白杨第50-51页
     ·转基因植株GUS组织化学染色第51-54页
7 总结及展望第54-56页
   ·总结第54页
   ·展望第54-56页
参考文献第56-60页
个人简介第60-61页
导师简介第61-62页
致谢第62页

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