| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词 | 第5-6页 |
| 氨基酸名称对照表 | 第6-7页 |
| 前言 | 第7-25页 |
| 1 酵母异源互补法在基因功能研究中的应用 | 第7-9页 |
| 2 GFP作为报告基因的特性及应用 | 第9-14页 |
| 3 植物铁素营养研究概述 | 第14-22页 |
| 4 本实验的研究基础及技术路线 | 第22-25页 |
| 材料与试剂 | 第25-28页 |
| 试验方法 | 第28-34页 |
| 一、 质粒的大量提取及酶切 | 第28页 |
| 二、 目的片段的回收、纯化 | 第28-29页 |
| 三、 酵母染色体DNA的提取 | 第29-30页 |
| 四、 DH5α感受态细胞的制备 | 第30页 |
| 五、 连接、转化、蓝白筛选、阳性克隆质粒的提取、鉴定 | 第30页 |
| 六、 重组质粒的酵母转化与筛选 | 第30-32页 |
| 七、 扩增MxIrt1基因cDNA完整编码区的常规PCR引物设计及PCR反应 | 第32-33页 |
| 八、 扩增EGFP基因的常规PCR引物设计及PCR反应 | 第33页 |
| 九、 扩增MxIrt1基因去掉终止密码子的cDNA编码区的常规PCR引物设计及PCR反应 | 第33-34页 |
| 结果与分析 | 第34-47页 |
| 一、 MxIrt转运蛋白的功能验证 | 第34-36页 |
| 二、不同酵母菌株体内铁离子含量的测定 | 第36-37页 |
| 三、 pDBLeu-IRT-GFP融合载体的构建 | 第37-44页 |
| 四、IRT转运蛋白的亚细胞定位研究 | 第44-47页 |
| 讨论 | 第47-51页 |
| 结论 | 第51页 |
| 展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 在学期间发表文章 | 第60-61页 |
| 附录1: 小金海棠MxIrt1基因cDNA的全长核苷酸序列及推测的氨基酸序列 | 第61-62页 |
| 附录2: pEGFP载体序列及说明 | 第62-63页 |
| 附录3: pDB~(Leu)载体序列及说明 | 第63-64页 |
| 附录4: 利用电感耦合等离子体质谱仪测量酵母细胞铁离子含量数据 | 第64-68页 |
| 附录5: GFP T克隆测序报告 | 第68-75页 |
| 附录6: pDB~(Leu)-IRT-GFP表达载体测序报告 | 第75-81页 |
