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无内源逆转录病毒中国实验用小型猪的筛选鉴定和猪抑肌素基因敲除载体构建

缩略语表第1-8页
中文摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
第一部分 无内源逆转录病毒中国实验用小型猪的筛选鉴定第12-27页
 第一章 、 文献综述第12-17页
  第一节 、 猪内源逆转录病毒第12-14页
  第二节 、 异种器官移植第14-16页
  第三节 、 本项目的研究意义第16-17页
 第二章 、 无内源逆转录病毒中国实验用小型猪的筛选鉴定第17-27页
  第一节 、 材料与方法第17-23页
   ·实验材料第17-18页
   ·实验方法第18-23页
  第二节 、 结果与分析第23-26页
   ·PERV聚合酶pol区段的PCR检测第23页
   ·两种囊膜蛋白类型env-A与env-B的PCR检测第23-24页
   ·pol区段的克隆与测序第24-25页
   ·杂交探针的标记效价第25页
   ·Southern杂交检测第25-26页
  第三节 、 总结与讨论第26-27页
   ·实验总结第26页
   ·内容讨论第26-27页
第二部分 猪抑肌素基因敲除的研究第27-73页
 第一章 、 综述部分第27-44页
  第一节 、 抑肌素基因MSTN第27-34页
   ·MSTN基因的发现第27-28页
   ·MSTN基因的表达作用机理第28-30页
   ·MSTN基因的同源性进化分析第30-33页
   ·猪的MSTN基因研究第33-34页
  第二节 、 基因敲除第34-42页
   ·基因打靶第34-36页
   ·基因敲除的基本流程第36-37页
   ·基因敲除载体第37-38页
   ·Cre/LoxP系统第38-40页
   ·影响基因敲除效率的因素第40-42页
  第三节 、 体细胞基因打靶第42-43页
   ·体细胞基因打靶的特点第42页
   ·动物体细胞基因敲除的发展现状第42-43页
  第四节 、 本项目的研究和意义第43-44页
 第二章 、 猪抑肌素基因敲除载体的构建第44-65页
  第一节 、 材料与方法第44-59页
   ·实验材料第44-46页
   ·实验方法第46-59页
  第二节 、 结果与分析第59-63页
   ·同源臂的扩增克隆鉴定第59-61页
   ·同源臂的连接与鉴定第61-62页
   ·同源臂的连接方向性鉴定第62-63页
  第三节 、 总结与讨论第63-65页
   ·实验总结第63页
   ·内容讨论第63-65页
 第三章 、 猪抑肌素基因敲除细胞系建立初探第65-73页
  第一节 、 材料和方法第65-68页
   ·实验材料第65-66页
   ·实验方法第66-68页
  第二节 、 结果与分析第68-71页
   ·猪胎儿成纤维细胞培养第68-69页
   ·猪成纤维细胞生长曲线第69页
   ·猪成纤维细胞电击转染条件的优化第69-70页
   ·报告基因GFP导入猪成纤维细胞第70页
   ·采用构建的MSTN敲除载体转染猪成纤维细胞第70-71页
  第三节 、 总结与讨论第71-73页
   ·实验总结第71页
   ·内容讨论第71-73页
参考文献第73-78页
附录第78-80页
致谢第80-81页
作者简历第81页

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