缩略语表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一部分 无内源逆转录病毒中国实验用小型猪的筛选鉴定 | 第12-27页 |
第一章 、 文献综述 | 第12-17页 |
第一节 、 猪内源逆转录病毒 | 第12-14页 |
第二节 、 异种器官移植 | 第14-16页 |
第三节 、 本项目的研究意义 | 第16-17页 |
第二章 、 无内源逆转录病毒中国实验用小型猪的筛选鉴定 | 第17-27页 |
第一节 、 材料与方法 | 第17-23页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·实验方法 | 第18-23页 |
第二节 、 结果与分析 | 第23-26页 |
·PERV聚合酶pol区段的PCR检测 | 第23页 |
·两种囊膜蛋白类型env-A与env-B的PCR检测 | 第23-24页 |
·pol区段的克隆与测序 | 第24-25页 |
·杂交探针的标记效价 | 第25页 |
·Southern杂交检测 | 第25-26页 |
第三节 、 总结与讨论 | 第26-27页 |
·实验总结 | 第26页 |
·内容讨论 | 第26-27页 |
第二部分 猪抑肌素基因敲除的研究 | 第27-73页 |
第一章 、 综述部分 | 第27-44页 |
第一节 、 抑肌素基因MSTN | 第27-34页 |
·MSTN基因的发现 | 第27-28页 |
·MSTN基因的表达作用机理 | 第28-30页 |
·MSTN基因的同源性进化分析 | 第30-33页 |
·猪的MSTN基因研究 | 第33-34页 |
第二节 、 基因敲除 | 第34-42页 |
·基因打靶 | 第34-36页 |
·基因敲除的基本流程 | 第36-37页 |
·基因敲除载体 | 第37-38页 |
·Cre/LoxP系统 | 第38-40页 |
·影响基因敲除效率的因素 | 第40-42页 |
第三节 、 体细胞基因打靶 | 第42-43页 |
·体细胞基因打靶的特点 | 第42页 |
·动物体细胞基因敲除的发展现状 | 第42-43页 |
第四节 、 本项目的研究和意义 | 第43-44页 |
第二章 、 猪抑肌素基因敲除载体的构建 | 第44-65页 |
第一节 、 材料与方法 | 第44-59页 |
·实验材料 | 第44-46页 |
·实验方法 | 第46-59页 |
第二节 、 结果与分析 | 第59-63页 |
·同源臂的扩增克隆鉴定 | 第59-61页 |
·同源臂的连接与鉴定 | 第61-62页 |
·同源臂的连接方向性鉴定 | 第62-63页 |
第三节 、 总结与讨论 | 第63-65页 |
·实验总结 | 第63页 |
·内容讨论 | 第63-65页 |
第三章 、 猪抑肌素基因敲除细胞系建立初探 | 第65-73页 |
第一节 、 材料和方法 | 第65-68页 |
·实验材料 | 第65-66页 |
·实验方法 | 第66-68页 |
第二节 、 结果与分析 | 第68-71页 |
·猪胎儿成纤维细胞培养 | 第68-69页 |
·猪成纤维细胞生长曲线 | 第69页 |
·猪成纤维细胞电击转染条件的优化 | 第69-70页 |
·报告基因GFP导入猪成纤维细胞 | 第70页 |
·采用构建的MSTN敲除载体转染猪成纤维细胞 | 第70-71页 |
第三节 、 总结与讨论 | 第71-73页 |
·实验总结 | 第71页 |
·内容讨论 | 第71-73页 |
参考文献 | 第73-78页 |
附录 | 第78-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
作者简历 | 第81页 |