| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·植物转基因中的同源共抑制现象及其机理 | 第11-13页 |
| ·同源共抑制现象 | 第11-12页 |
| ·同源共抑制机理 | 第12-13页 |
| ·克服同源共抑制的方法 | 第13-19页 |
| ·利用单拷贝株系 | 第14页 |
| ·利用PTGS突变体 | 第14页 |
| ·利用病毒的RNA干涉抑制因子 | 第14-16页 |
| ·利用植物清除紊乱RNA的蛋白 | 第16页 |
| ·利用新型转基因载体 | 第16-17页 |
| ·两份终止子和新型终止子 | 第16页 |
| ·内含子 | 第16-17页 |
| ·其他潜在的非编码RNA及其结合蛋白 | 第17-19页 |
| ·ms2-MS2体系 | 第17页 |
| ·Stau-bcd体系 | 第17-19页 |
| 第二章 材料和方法 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·原始载体 | 第19页 |
| ·入门载体的构建 | 第19-22页 |
| ·引物设计 | 第19-20页 |
| ·PCR及产物回收 | 第20-21页 |
| ·TOPO反应及BsaⅠ酶切连接构建Entry | 第21-22页 |
| ·转化及阳性克隆鉴定 | 第22页 |
| ·目的载体的构建 | 第22-24页 |
| ·表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·转基因、筛选及种子萌发 | 第25-27页 |
| ·拟南芥的培养 | 第25页 |
| ·电转化 | 第25-26页 |
| ·转基因 | 第26页 |
| ·筛选 | 第26页 |
| ·种子萌发 | 第26-27页 |
| ·表型分析 | 第27页 |
| ·主根和下胚轴长度的统计 | 第27页 |
| ·共聚焦显微镜观察 | 第27页 |
| ·其他表型 | 第27页 |
| ·表达分析 | 第27-31页 |
| ·RT-PCR | 第27-29页 |
| ·植物基因组DNA提取(CTAB法) | 第27-28页 |
| ·植物总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·逆转录 | 第29页 |
| ·RT-PCR | 第29页 |
| ·实时定量PCR | 第29-31页 |
| ·引物设计 | 第29页 |
| ·定量逆转录 | 第29-30页 |
| ·定量PCR | 第30-31页 |
| 第三章 结果和分析 | 第31-46页 |
| ·用于消除同源共抑制现象的T-DNA载体的构建 | 第31-33页 |
| ·新发现的易于发生同源共抑制的基因 | 第33-34页 |
| ·Cobra基因发生同源共抑制后植株在生长发育上的表型 | 第34-36页 |
| ·几种体系消除同源共抑制现象的效果比较 | 第36-38页 |
| ·消除了同源共抑制的株系表型 | 第38-39页 |
| ·不同载体转基因得到的株系表达的差异 | 第39-45页 |
| ·拟南芥转基因及Cobra基因的RNA提取、鉴定 | 第39页 |
| ·外源基因Cobra的多聚腺苷酸化位点 | 第39-42页 |
| ·外源基因Cobra的转录终止鉴定 | 第42-44页 |
| ·Cobra基因的表达水平比较 | 第44-45页 |
| ·不同发育时期同源共抑制的情况会变化 | 第45-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 附录：培养基及抗生素母液配方和常用缓冲液配方 | 第55-57页 |