| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-21页 |
| 1．1 研究目的和意义 | 第10页 |
| 1．2 文献综述 | 第10-19页 |
| 1．2．1 类病毒及其病害 | 第10-11页 |
| 1．2．2 类病毒的结构 | 第11-12页 |
| 1．2．3 类病毒的分类 | 第12-15页 |
| 1．2．4 类病毒的复制 | 第15页 |
| 1．2．5 类病毒的鉴定 | 第15-18页 |
| 1．2．6 类病毒的防治 | 第18-19页 |
| 1．3 本领域研究进展及存在不足和待深入研究的问题 | 第19-20页 |
| 1．4 课题来源及主要研究内容 | 第20-21页 |
| 2 材料和方法 | 第21-33页 |
| 2．1 样品采集 | 第21页 |
| 2．2 样品总核酸RNA的提取和纯化 | 第21-22页 |
| 2．3 提取核酸样品中RNA含量的测定 | 第22页 |
| 2．4 PSTVd病原鉴定 | 第22-31页 |
| 2．4．1 PAGE检测PSTVd | 第22-24页 |
| 2．4．2 RT-PCR检测PSTVd | 第24-25页 |
| 2．4．3 应用核酸斑点杂交（NASH）技术检测PSTVd | 第25-31页 |
| 2．5 PSTVd中国分离株系的基因克隆及序列分析 | 第31-33页 |
| 2．5．1 PCR扩增产物的回收纯化 | 第31页 |
| 2．5．2 连接反应 | 第31页 |
| 2．5．3 制备感受态细胞（TSS法） | 第31页 |
| 2．5．4 转化 | 第31-32页 |
| 2．5．5 涂板 | 第32页 |
| 2．5．6 观察、挑选白斑 | 第32页 |
| 2．5．7 质粒提取和酶切鉴定 | 第32页 |
| 2．5．8 测序及测序结果分析 | 第32-33页 |
| 3 试验结果与分析 | 第33-41页 |
| 3．1 利用R-PAGE技术对采集样品进行PSTVd鉴定 | 第33-35页 |
| 3．1．1 对提取样品进行总RNA含量测定 | 第33页 |
| 3．1．2 R-PAGE检测PSTVd结果 | 第33-34页 |
| 3．1．3 R-PAGE检测PSTVd灵敏度的测定 | 第34页 |
| 3．1．4 2-D-PAGE检测PSTVd | 第34-35页 |
| 3．2 RT-PCR检测PSTVd | 第35页 |
| 3．3 NASH技术检测PSTVd | 第35-38页 |
| 3．3．1 探针制备 | 第36-37页 |
| 3．3．2 利用生物素标记化学颜色反应鉴定PSTVd | 第37-38页 |
| 3．3．3 利用化学发光系统检测PSTVd | 第38页 |
| 3．4 PSTVd基因克隆及序列分析 | 第38-41页 |
| 3．4．1 酶切鉴定 | 第38-39页 |
| 3．4．2 序列分析 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-49页 |
| 4．1 PSTVd病原鉴定 | 第41-43页 |
| 4．1．1 RT-PCR技术 | 第41-42页 |
| 4．1．2 核酸斑点杂交（NASH）技术 | 第42-43页 |
| 4．2 PSTVd中国分离株系的基因克隆与序列分析 | 第43-49页 |
| 5 小结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 附录 | 第58-59页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第59-60页 |
| 图版 | 第60-62页 |
| 图版说明 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 个人简历 | 第64页 |
