| 中文摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 文献综述 | 第9-27页 |
| 1 概述 | 第9-10页 |
| 2 植物的抗病反应 | 第10-19页 |
| ·植物病原物的致病机制 | 第10页 |
| ·植物的抗病反应 | 第10-11页 |
| ·植物抗病基因R | 第11-14页 |
| ·植物抗病基因的克隆 | 第11-12页 |
| ·抗病基因的结构与功能 | 第12-13页 |
| ·抗病基因与病原物无毒基因的互作 | 第13-14页 |
| ·植物抗病相关基因 | 第14页 |
| ·植物抗病反应中的信号传导 | 第14-18页 |
| ·基因对基因抗性途径中的信号传导 | 第14-15页 |
| ·有关水杨酸(SA)的信号传导 | 第15-16页 |
| ·茉莉酸(JA)／乙烯(ET)的信号传导 | 第16-17页 |
| ·蛋白质的磷酸化在植物抗病过程中的作用 | 第17-18页 |
| ·植物生长调节剂与植物抗病反应的关系 | 第18-19页 |
| 3 植物抗病相关基因的研究方法 | 第19-26页 |
| ·寻找有表达差异的基因 | 第19-21页 |
| ·扣除性cDNA杂交法(subtractive cDNA hybridization) | 第20页 |
| ·基于PCR的代表性差异分析(representational difference analysis) | 第20页 |
| ·抑制性扣除杂交法(suppression subtractive hybridization，SSH) | 第20页 |
| ·DNA微阵列(DNA microarray) | 第20-21页 |
| ·基因的遗传转化与基因功能验证 | 第21-22页 |
| ·基因沉默现象与基因功能验证 | 第22-25页 |
| ·生物信息学与基因功能的研究 | 第25-26页 |
| 4 EI5P11的来源 | 第26页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第26-27页 |
| 实验材料和方法 | 第27-39页 |
| 1 实验材料 | 第27-30页 |
| ·遗传转化的水稻材料和农杆菌菌株 | 第27页 |
| ·用于遗传转化的基因片段 | 第27页 |
| ·实验所用的载体 | 第27-30页 |
| ·超量表达载体 | 第27-28页 |
| ·抑制表达载体 | 第28-30页 |
| ·用于转化的培养基 | 第30页 |
| 2 实验方法 | 第30-39页 |
| ·基因结构的预测 | 第30-31页 |
| ·基因的结构验证 | 第31页 |
| ·基因超量表达的遗传转化 | 第31-36页 |
| ·PCR的方法扩增全长的基因 | 第31-32页 |
| ·构建中间载体pGEM-T | 第32页 |
| ·基因测序 | 第32-33页 |
| ·构建转化载体pU1301 | 第33页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化法转化粳稻品种牡丹江8号 | 第33-34页 |
| ·转基因植株的GUS染色检测 | 第34页 |
| ·CTAB法提取大样DNA | 第34-35页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第35页 |
| ·转基因植株的Southern杂交分析 | 第35页 |
| ·基因的表达分析 | 第35页 |
| ·TRIzol RNaex抽提RNA | 第35页 |
| ·RT-PCR及Northern杂交分析 | 第35页 |
| ·转基因植株接种鉴定 | 第35-36页 |
| ·RNAi抑制表达的遗传转化 | 第36-39页 |
| ·明恢63文库中EI5P11 cDNA克隆的分析 | 第36页 |
| ·EI5P11克隆cDNA转化片段 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增得到转化片段 | 第37页 |
| ·双链载体pMCG161的构建 | 第37页 |
| ·构建RNAi的遗传转化载体pR1301 | 第37-38页 |
| ·农杆菌介导的转化法转化籼稻品种明恢63 | 第38-39页 |
| 实验结果与分析 | 第39-55页 |
| 1 基因结构与序列分析 | 第39-41页 |
| ·BLAST软件分析确定EI5P11克隆 | 第39页 |
| ·基因的结构所属的基因 | 第39-41页 |
| 2 PCR法获得基因的编码区 | 第41页 |
| 3 OsDR2编码区的测序 | 第41-42页 |
| 4 OsDR2基因的结构验证 | 第42-43页 |
| 5 OsDR2编码产物的结构分析 | 第43-44页 |
| 6 OsDR2基因超量表达的转化及功能分析 | 第44-54页 |
| ·构建转化载体 | 第44页 |
| ·超量表达OsDR2基因的转化植株 | 第44-47页 |
| ·转基因植株的GUS及Southern分析 | 第47-49页 |
| ·T_0代转基因植株的GUS染色分析 | 第47-48页 |
| ·T_0代转化植株的GUS扩增分析 | 第48页 |
| ·T_0代转化植株的Southern杂交结果 | 第48-49页 |
| ·T_0代转基因植株的表达分析 | 第49-51页 |
| ·T_0代部分转基因植株的RT-PCR结果 | 第49-50页 |
| ·T_0代转基因植株的Northern杂交结果 | 第50-51页 |
| ·T_0代转基因植株的病原接种鉴定分析 | 第51-54页 |
| 7 OsDR2基因的抑制遗传转化 | 第54-55页 |
| ·构建转化载体 | 第54页 |
| ·籼稻品种明恢63的转基因植株 | 第54-55页 |
| 讨论 | 第55-61页 |
| 1 关于OsDR2基因 | 第55页 |
| 2 基因的多拷贝所带来的实验方面的问题 | 第55页 |
| 3 关于遗传转化受体水稻品种的选取 | 第55-56页 |
| ·OsDR2基因超量表达的遗传转化 | 第55-56页 |
| ·OsDR2基因抑制表达的遗传转化 | 第56页 |
| 4 关于OsDR2基因超量表达后植株生长异常的思考 | 第56-59页 |
| 5 进一步工作的构想 | 第59页 |
| 6 抗病相关基因的鉴定对植物抗病研究的贡献 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-69页 |
| 附录 | 第69-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
