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鸡大肝大脾病的分子生物学检测

摘要第1-7页
引言第7-8页
第一篇 文献综述第8-18页
 1 BLS的发现第8页
 2 病原学第8-11页
   ·病原的确认第8-10页
   ·病原的复制第10页
   ·BLS特异性成分的鉴定第10-11页
 3 流行病学和发病机理第11-12页
   ·自然和人工宿主第11页
   ·流行病学第11页
   ·发病机理第11页
   ·传播途径及媒介第11-12页
 4 临床症状第12页
   ·症状第12页
   ·死亡率第12页
 5 免疫特点第12页
 6 诊断第12-14页
   ·动物接种第12-13页
   ·病原分离鉴定第13页
   ·琼脂扩散试验第13页
   ·间接免疫荧光第13页
   ·ELISA第13页
   ·抗原捕获ELISA第13-14页
   ·RT-PCR方法第14页
 7 预防与控制第14页
 参考文献第14-18页
第二篇 实验部分第18-44页
 A 鸡大肝大脾病病原的复制第18-22页
  1 材料和方法第18-19页
   ·抗原的制备第18页
   ·实验动物第18页
   ·琼脂扩散试验第18-19页
  2 结果第19页
   ·临床症状第19页
   ·血清中BLS抗原及抗体的动态变化第19页
   ·肝脾组织中BLS抗原的检测第19页
  3 讨论第19-20页
  参考文献第20-22页
 B 鸡大肝大脾病病毒基因的克隆、鉴定与序列分析第22-33页
  1 材料和方法第22-27页
   ·病毒及复制第22页
   ·RNA的提取第22-23页
   ·引物设计第23页
   ·cDNA第一链的合成第23页
   ·RT-PCR反应第23-24页
   ·RT-PCR产物的回收与纯化第24页
   ·RT-PCR产物的TA克隆第24-26页
   ·BLSV基因TA克隆的鉴定第26-27页
   ·阳性TA克隆菌株的序列测定第27页
   ·BLSV基因序列的同源性比较第27页
  2 结果第27-30页
   ·BLSV的RT-PCR扩增第27页
   ·BLSV基因克隆的建立及其重组质粒DNA的鉴定第27-28页
   ·BLSV基因的序列测定第28-30页
  3 讨论第30页
  参考文献第30-33页
 C 鸡大肝大脾病毒RT-PCR检测方法的建立及南京地区BLSV的检测第33-44页
  1 材料和方法第33-36页
   ·毒株第33页
   ·病料采集第33-34页
   ·琼脂扩散试验第34页
   ·引物设计第34页
   ·RNA的提取第34页
   ·cDNA第一链的合成第34页
   ·RT-PCR反应第34-35页
   ·RT-PCR产物的鉴定、回收与纯化第35页
   ·灵敏度试验第35页
   ·RT-PCR产物的TA克隆第35页
   ·阳性TA克隆菌株的序列测定第35页
   ·BLSV基因序列的同源性比较第35-36页
   ·BLSV氨基酸序列的比较第36页
  2 结果第36-40页
   ·琼脂扩散试验第36页
   ·RT-PCR扩增结果第36页
   ·RT-PCR的灵敏性第36-37页
   ·序列测定第37-38页
   ·BLSV核苷酸序列进化树的绘制第38页
   ·BLSV氨基酸序列的比较及进化树的绘制第38-40页
  3 试论第40页
  参考文献第40-44页
全文总结第44-45页
致谢第45页

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