| 引言 | 第1-21页 |
| 1 文献综述 | 第11-18页 |
| ·病原学 | 第11-12页 |
| ·流行病学 | 第12页 |
| ·病理学 | 第12-13页 |
| ·病理形态学 | 第12-13页 |
| ·发病机理 | 第13页 |
| ·防治 | 第13-14页 |
| ·肿瘤坏死因子的研究 | 第14-16页 |
| ·肿瘤坏死因子研究简史 | 第14页 |
| ·肿瘤坏死因子的产生 | 第14页 |
| ·肿瘤坏死因子的理化特性 | 第14页 |
| ·TNFα的分子结构和基因序列 | 第14-15页 |
| ·肿瘤坏死因子受体 | 第15页 |
| ·肿瘤坏死因子的生物学活性 | 第15-16页 |
| ·肿瘤坏死因子的活性检测 | 第16页 |
| ·细胞凋亡 | 第16-18页 |
| ·细胞凋亡的概念 | 第16-17页 |
| ·细胞凋亡的形态特征 | 第17页 |
| ·影响细胞凋亡的因素 | 第17页 |
| ·凋亡细胞的降解特征 | 第17-18页 |
| ·细胞凋亡与动物疾病 | 第18页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第18页 |
| 2 本课题研究的意义 | 第18-19页 |
| 3 本研究的应用价值和前景 | 第19页 |
| ·鸡IBH地方毒株的建立 | 第19页 |
| ·鸡肿瘤坏死因子的 | 第19页 |
| 4 课题的总体设计 | 第19页 |
| ·通过对内蒙古粪鸡场 | 第19页 |
| ·以分离鉴定的毒株DNA | 第19页 |
| ·应用卡介苗和大肠肝苗 | 第19页 |
| ·应用分离毒株感染SPF雏鸡 | 第19页 |
| 5 今后的工作 | 第19-21页 |
| 实验研究 | 第21-90页 |
| 1 鸡包涵体肝炎病毒株的分离与鉴定 | 第21-34页 |
| 摘要 | 第21-22页 |
| ·材料和方法 | 第22-23页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·参考毒株 | 第22页 |
| ·阳性血清 | 第22页 |
| ·阴性血清 | 第22页 |
| ·SPF种蛋、鸡胚和雏鸡 | 第22页 |
| ·病毒分离 | 第22-23页 |
| ·病毒鉴定 | 第23页 |
| ·结果 | 第23-26页 |
| ·病毒分离 | 第23-24页 |
| ·病毒鉴定 | 第24-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| ·试验结果表明 | 第26-27页 |
| ·血清中和试验表明 | 第27-28页 |
| 附图 | 第28-34页 |
| 2 鸡包涵体肝炎病毒Hb株在鸡胚肝细胞包涵体特性的研究 | 第34-42页 |
| 摘要 | 第34-35页 |
| ·材料和方法 | 第35页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·方法 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-36页 |
| ·眼观 | 第35页 |
| ·组织学观察 | 第35-36页 |
| ·超薄切片观察 | 第36页 |
| ·讨论 | 第36-38页 |
| ·通过病理组织学观察 | 第36页 |
| ·电镜观察表明 | 第36页 |
| ·三类包涵本均可存在 | 第36-37页 |
| ·从构成包涵体成份的形态特征看 | 第37-38页 |
| 附图 | 第38-42页 |
| 3 鸡包涵体肝炎病毒Hb株DNA探针的制备及共原位杂交的应有 | 第42-48页 |
| 摘要 | 第42-43页 |
| ·材料和方法 | 第43-44页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·方法 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-45页 |
| ·重组质粒DNA片段纯化样品浓度和基因序列 | 第44页 |
| ·探针标记及灵敏度 | 第44-45页 |
| ·原位杂交 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·通过限制性内切酶 | 第45-46页 |
| ·应用地高辛标记 | 第46-47页 |
| 附图 | 第47-48页 |
| 4 肿瘤坏死因子的诱生及其活性检测 | 第48-55页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| ·材料和方法 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-50页 |
| ·结果 | 第50-52页 |
| ·血清样品TNFα活性检测结果 | 第50页 |
| ·白细胞样品TNFα活性检测结果 | 第50-51页 |
| ·脾细胞样品TNFα活性检测结果 | 第51-52页 |
| ·血清、白细胞和脾细胞TNFα样品的细胞死亡率比较结果 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·试验结果表明 | 第52页 |
| ·通过对诱生的血清 | 第52-53页 |
| 附图 | 第53-55页 |
| 5 鸡肿瘤坏死因子α基因片段的分子克隆及序列测定 | 第55-63页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| ·材料和方法 | 第56-59页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·结果 | 第59-62页 |
| ·外周血白细胞培养 | 第59页 |
| ·总RNA提取 | 第59-60页 |
| ·RT-PCR | 第60页 |
| ·RT-PCR扩增产物电泳纯化回收结果 | 第60页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第60页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第60-61页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第61页 |
| ·序列测定结果 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·通过对鸡外周血白细胞的分离及培养 | 第62页 |
| ·PCR产物与PUC19质粒连接 | 第62页 |
| ·关于肿瘤坏死因子α基因 | 第62-63页 |
| 6 鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α的动态变化与病变相关性的研究 | 第63-76页 |
| 摘要 | 第63-64页 |
| ·材料与方法 | 第64-65页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-65页 |
| ·结果 | 第65-70页 |
| ·外周血TNFα检测结果 | 第65-67页 |
| ·脾脏TNFα检测结果 | 第67-69页 |
| ·病理变化 | 第69-70页 |
| ·讨论 | 第70-72页 |
| ·试验结果表明 | 第70页 |
| ·关于TNFα的抗病毒作用的 | 第70-72页 |
| 附图 | 第72-76页 |
| 7 鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α基因mRNA表达的研究 | 第76-84页 |
| 摘要 | 第76-77页 |
| ·材料和方法 | 第77-78页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·方法 | 第77-78页 |
| ·结果 | 第78-79页 |
| ·探针标记及灵敏度 | 第78-79页 |
| ·原位杂交 | 第79页 |
| ·讨论 | 第79-81页 |
| ·应用地高辛标记鸡肿瘤坏死因子 | 第79页 |
| ·通过对制备探针的电泳检测 | 第79-81页 |
| 附图 | 第81-84页 |
| 8 鸡包涵体肝火细胞凋亡的检测 | 第84-90页 |
| 摘要 | 第84-85页 |
| ·材料和方法 | 第85-86页 |
| ·材料 | 第85页 |
| ·方法 | 第85-86页 |
| ·结果 | 第86-87页 |
| ·眼观变化 | 第86页 |
| ·病理组织学变化 | 第86页 |
| ·原位末端标记结果 | 第86-87页 |
| ·讨论 | 第87-88页 |
| ·试验结果表明 | 第87页 |
| ·通过原位末端标记工员病理 | 第87-88页 |
| 附图 | 第88-90页 |
| 课题的主要成果总结 | 第90-92页 |
| 1 成功地分离到一株鸡包涵体肝炎病毒 | 第90页 |
| 2 系统地观察和分析了 | 第90页 |
| 3 对Hb株的六邻体蛋白基因片段进行了序列测定 | 第90页 |
| 4 鸡肿瘤坏死因子α的诱生活性检测 | 第90-91页 |
| 5 对鸡肿瘤坏死因子的基因片段进行了 | 第91页 |
| 6 鸡包涵体肝炎肿瘤坏死因子α动态变化 | 第91页 |
| 7 制备出了敏感变、特异性强的鸡肿瘤 | 第91页 |
| 8 研究证实鸡包涵体肝炎病毒Hb | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-101页 |
| 作者简介 | 第101页 |
