| 致谢 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-13页 |
| 文献综述 | 第13-42页 |
| 第一章 哺乳动物胚胎干细胞研究进展及应用前景 | 第13-42页 |
| 1 前言 | 第13页 |
| 2 胚胎干细胞的概念及特性 | 第13-15页 |
| ·胚胎干(ES)细胞研究中的几个名词概念 | 第13-15页 |
| ·ES细胞的基本特性 | 第15页 |
| 3 哺乳动物胚胎干细胞的研究进展 | 第15-20页 |
| ·小鼠胚胎干细胞研究进展 | 第15-17页 |
| ·牛胚胎干细胞的研究进展 | 第17-19页 |
| ·猪胚胎干细胞研究进展 | 第19-20页 |
| ·羊胚胎干细胞研究历程 | 第20页 |
| 4 胚胎干细胞与胚胎生殖细胞 | 第20-26页 |
| ·原始生殖细胞(PGCs) | 第21页 |
| ·PGCs迁移的分子机理 | 第21-23页 |
| ·PGCs向EG细胞转化 | 第23页 |
| ·ES细胞与EG细胞的比较 | 第23-26页 |
| 5 胚胎干细胞分离和克隆方法 | 第26-28页 |
| ·全胚培养法 | 第26页 |
| ·ICM培养法 | 第26-27页 |
| ·克隆法 | 第27页 |
| ·PGCs培养法 | 第27-28页 |
| 6 胚胎干细胞的鉴定方法 | 第28-31页 |
| ·形态学鉴定 | 第28页 |
| ·细胞表面抗原标志物 | 第28-29页 |
| ·核型分析 | 第29-30页 |
| ·体内分化实验 | 第30页 |
| ·体外分化实验 | 第30-31页 |
| ·嵌合体制备 | 第31页 |
| 7 影响胚胎干细胞分离与克隆的因素 | 第31-38页 |
| ·遗传因素 | 第31-32页 |
| ·胚胎日龄 | 第32页 |
| ·培养液 | 第32-33页 |
| ·饲养层 | 第33页 |
| ·添加物 | 第33-37页 |
| ·传代方法 | 第37页 |
| ·培养系统的稳定状态 | 第37-38页 |
| 8 动物胚胎干细胞研究意义与应用前景 | 第38-41页 |
| ·生产克隆动物 | 第38页 |
| ·生产转基因动物 | 第38-39页 |
| ·生产用于人类器官移植的动物器官 | 第39-40页 |
| ·建立人类遗传病研究的动物模型 | 第40页 |
| ·研究ES细胞在胚胎发育过程中的功能 | 第40页 |
| ·研究真核细胞基因表达与调控 | 第40-41页 |
| 9 结束语 | 第41-42页 |
| 实验研究 | 第42-68页 |
| 第二章 免疫外科法分离克隆BALB/C小鼠胚胎干细胞 | 第42-55页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料方法 | 第42-47页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·实验方法 | 第43-45页 |
| ·兔抗鼠血清的制备 | 第45页 |
| ·补体的制备 | 第45页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞的分离与培养 | 第45-46页 |
| ·小鼠胎儿成纤维细胞的继代培养 | 第46页 |
| ·胎儿成纤维细胞饲养层的制备(MEF、STO及BEF) | 第46页 |
| ·小鼠胚胎的采集 | 第46-47页 |
| ·免疫外科法分离BALB/c小鼠的ICM | 第47页 |
| ·ES细胞的培养与扩增 | 第47页 |
| ·ES细胞的鉴定 | 第47页 |
| 3 结果 | 第47-52页 |
| ·抗体浓度的筛选 | 第47-48页 |
| ·BALB/c小鼠胚胎ICM分离及培养 | 第48-49页 |
| ·免疫外科法分离克隆BALB/c小鼠ES细胞的效果 | 第49页 |
| ·不同饲养层对BALB/c小鼠ES细胞分离作用的影响 | 第49-50页 |
| ·血清对BALB/c小鼠ES细胞分离的影响 | 第50-51页 |
| ·LIF对BALB/c小鼠ES细胞分离传代作用的影响 | 第51页 |
| ·传代方法对BALB/c小鼠ES细胞分离传代的影响 | 第51-52页 |
| ·BALB/c小鼠ES细胞的鉴定 | 第52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| ·品系对分离克隆小鼠ES细胞的影响 | 第52页 |
| ·免疫外科法分离小鼠ICM | 第52-53页 |
| ·免疫外科法与全胚培养法分离克隆小鼠ES细胞的比较 | 第53页 |
| ·饲养层对小鼠ES细胞分离克隆的影响 | 第53-54页 |
| ·传代方法对小鼠ES细胞分离克隆的影响 | 第54-55页 |
| 第三章 牛胚胎生殖细胞的分离与克隆 | 第55-68页 |
| 1 引言 | 第55页 |
| 2 材料方法 | 第55-58页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·方法 | 第56-58页 |
| 3 结果 | 第58-63页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞生长曲线的测定 | 第58-59页 |
| ·不同培养液对牛胎儿成纤维细胞的影响 | 第59页 |
| ·PGCs的分离、培养与观察 | 第59页 |
| ·分离克隆牛EG细胞的效果 | 第59-60页 |
| ·胎龄大小对牛EG细胞分离克隆的影响 | 第60页 |
| ·饲养层对牛EG细胞分离克隆的影响 | 第60-61页 |
| ·培养液对牛EG细胞分离传代的影响 | 第61-62页 |
| ·添加细胞因子对牛EG细胞分离克隆的影响 | 第62-63页 |
| ·牛EG细胞鉴定 | 第63页 |
| 4 讨论 | 第63-68页 |
| ·牛胎儿成纤维细胞的分离与培养 | 第63-64页 |
| ·不同培养液对牛胎儿成纤维细胞生长增殖的影响 | 第64页 |
| ·胎龄大小对牛EG细胞分离克隆的影响 | 第64-65页 |
| ·牛EG细胞分离与培养 | 第65页 |
| ·饲养层对牛EG细胞分离克隆的影响 | 第65-66页 |
| ·细胞因子对牛EG细胞分离克隆的影响 | 第66-67页 |
| ·牛EG细胞的鉴定 | 第67-68页 |
| 结论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附图说明 | 第77-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
