致谢 | 第1-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-28页 |
1 T-DNA作为插入序列标签的研究进展 | 第13-17页 |
·农杆菌介导的T-DNA遗传转化 | 第13-15页 |
·T-DNA的发现与应用 | 第13-14页 |
·农杆菌介导的T-DNA转基因技术在单子叶植物中的研究进展 | 第14-15页 |
·T-DNA在植物基因组DNA中整合的机制 | 第15-16页 |
·双链断裂修复模型 | 第15页 |
·单链缺口修复模型 | 第15页 |
·T-DNA串联重复的形成 | 第15-16页 |
·T-DNA作为插入序列标签在植物功能基因组学研究中的应用 | 第16-17页 |
·T-DNA在双子叶植物功能基因组学研究中的应用 | 第16页 |
·T-DNA在单子叶植物功能基因组学研究中的应用 | 第16-17页 |
2 Ac/Ds转座子系统作为插入序列标签的研究进展 | 第17-21页 |
·Ac/Ds转座子系统的研究历史 | 第17-18页 |
·Ac/Ds转座子在突变体库构建中的应用 | 第18-19页 |
·二元系统 | 第18页 |
·一元系统 | 第18-19页 |
·Ac/Ds转座子割离、插入的检测方法 | 第19-20页 |
·影响Ac/Ds转座子跳跃的因素 | 第20页 |
·Ac/Ds转座子在植物基因组中插入方式及其对策 | 第20-21页 |
·Ac/Ds转座子系统在水稻中的应用 | 第21页 |
3 捕获器系统在植物基因功能研究中的应用 | 第21-25页 |
·增强子捕获器、启动子捕获器和基因捕获器 | 第21-23页 |
·捕获器中的报告基因 | 第23-24页 |
·反向选择标记 | 第24-25页 |
4 克隆DNA序列标签旁邻序列的方法 | 第25-28页 |
·TAlL-PCR | 第25页 |
·IPCR | 第25-26页 |
·质粒营救法 | 第26-28页 |
第二章 Ac/Ds-T-DNA原初插入位点的分析 | 第28-47页 |
1 材料与方法 | 第28-31页 |
·材料 | 第28页 |
·方法 | 第28-31页 |
·载体构建 | 第28-30页 |
·水稻转基因 | 第30页 |
·T_1代转基因水稻的潮霉素抗性分析 | 第30页 |
·转基因水稻的PCR检测 | 第30页 |
·转基因水稻的Southern杂交分析 | 第30-31页 |
·T-DNA旁邻序列的克隆与测序 | 第31页 |
·T-DNA旁邻序列分析 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-44页 |
·T-DNA插入的转基因水稻 | 第31页 |
·转基因水稻的PCR检测 | 第31-33页 |
·Ac/Ds-T-DNA转基因水稻的拷贝数分析 | 第33-37页 |
·转基因水稻T-DNA插入位点处基因组DNA的分析 | 第37-39页 |
·T-DNA左、右边界在基因组DNA中的插入特点分析 | 第39-44页 |
·T-DNA左、右边界重复序列的缺失 | 第39-40页 |
·T-DNA左边界小同源性序列的分析 | 第40-41页 |
·T-DNA RB-LB串联情况的分析 | 第41页 |
·Filler-DNA分析 | 第41-44页 |
3 讨论 | 第44-47页 |
·T-DNA插入拷贝数 | 第44页 |
·T-DNA在水稻基因组的插入特点 | 第44-45页 |
·T-DNA在水稻基因组中的整合机理 | 第45-46页 |
·Filler-DNA对扩增插入位点水稻旁邻序列的影响 | 第46-47页 |
第二章 Ac/Ds转座子在水稻中跳跃规律的研究 | 第47-66页 |
1 材料与方法 | 第47-50页 |
·材料 | 第47-48页 |
·方法 | 第48-50页 |
·F_2群体的发展 | 第48页 |
·小量DNA的提取 | 第48页 |
·Ds跳跃的PCR分析 | 第48-49页 |
·Southern Blot分析 | 第49页 |
·Ds旁邻序列的克隆 | 第49-50页 |
·Ds旁邻序列的分析 | 第50页 |
·GUS分析 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-63页 |
·F_2群体发展 | 第50-51页 |
·F_2植株Ds元件从供体位点的割离 | 第51-53页 |
·Ds元件在F_2代中的插入 | 第53-56页 |
·Ds元件在水稻基因中的插入位点分析 | 第56-59页 |
·GUS染色分析 | 第59页 |
·C03-14.037植株的分析 | 第59-63页 |
3 讨论 | 第63-66页 |
·影响Ds转座的因素 | 第63页 |
·Ds元件在水稻中插入位置的特点 | 第63-64页 |
·HPT基因作为反向选择标记的讨论 | 第64页 |
·基因捕获器的作用 | 第64-65页 |
·大规模筛选的策略 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-73页 |
附录1 | 第73-75页 |
攻读博士学位期间发表的科研论文 | 第75页 |