摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-17页 |
·立题意义 | 第8-9页 |
·国内外研究进展 | 第9-14页 |
·生物法制备光学纯苯基乙二醇的研究现状 | 第9页 |
·利用重组菌合成手性化合物研究进展 | 第9-11页 |
·辅酶再生的策略 | 第11-12页 |
·基因的优化表达 | 第12-14页 |
·本课题研究思路和内容 | 第14-17页 |
·课题研究思路 | 第14页 |
·研究方法 | 第14-16页 |
·研究内容 | 第16-17页 |
第二章 密码子优化的(R)-羟基苯乙酮还原酶与甲酸脱氢酶基因的克隆及共表达载体的构建 | 第17-30页 |
·前言 | 第17页 |
·材料 | 第17-19页 |
·菌株与质粒 | 第17-18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·培养基与溶液 | 第18-19页 |
·主要仪器 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-26页 |
·结果与讨论 | 第26-29页 |
·近平滑假丝酵母和博伊丁假丝酵母基因组DNA 的获得 | 第26页 |
·PCR 扩增产物的电泳鉴定 | 第26页 |
·T-rcr、T-fdh 克隆测序质粒的构建与酶切鉴定 | 第26-27页 |
·rcr 和fdh 基因序列 | 第27-28页 |
·共表达载体pETDuet-rcr-fdh 的构建 | 第28-29页 |
·本章小结 | 第29-30页 |
第三章 密码子优化的(R)-羟基苯乙酮还原酶与甲酸脱氢酶共表达的研究及初步纯化 | 第30-41页 |
·前言 | 第30页 |
·材料 | 第30-32页 |
·菌株与质粒 | 第30页 |
·主要试剂 | 第30-31页 |
·培养基与溶液 | 第31页 |
·主要仪器 | 第31-32页 |
·实验方法 | 第32-34页 |
·结果与讨论 | 第34-40页 |
·质粒pETDuet-rcr-fdh 转化表达菌株E. coli BL21 的结果分析 | 第34-35页 |
·质粒pETDuet-rcr-fdh 转化表达菌株E. coli Rosetta 的结果分析 | 第35-36页 |
·共表达条件的选择优化 | 第36-40页 |
·本章小结 | 第40-41页 |
第四章 重组菌生物转化条件的优化研究 | 第41-51页 |
·前言 | 第41页 |
·材料 | 第41页 |
·菌株与质粒 | 第41页 |
·主要试剂 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-43页 |
·反应体系中底物2-羟基苯乙酮浓度的选择 | 第41-42页 |
·反应体系中细胞浓度的选择 | 第42页 |
·反应体系缓冲pH 值的选择 | 第42页 |
·反应温度的选择 | 第42页 |
·反应时间的选择 | 第42页 |
·反应体系中细胞状态的选择 | 第42页 |
·辅助底物甲酸钠的添加量优化 | 第42页 |
·Zn~(2+)对重组菌不对称还原反应的影响 | 第42-43页 |
·结果与讨论 | 第43-48页 |
·本章小结 | 第48-51页 |
致谢 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-57页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |