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(R)-羟基苯乙酮还原酶与甲酸脱氢酶基因在大肠杆菌中的共表达

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-17页
   ·立题意义第8-9页
   ·国内外研究进展第9-14页
     ·生物法制备光学纯苯基乙二醇的研究现状第9页
     ·利用重组菌合成手性化合物研究进展第9-11页
     ·辅酶再生的策略第11-12页
     ·基因的优化表达第12-14页
   ·本课题研究思路和内容第14-17页
     ·课题研究思路第14页
     ·研究方法第14-16页
     ·研究内容第16-17页
第二章 密码子优化的(R)-羟基苯乙酮还原酶与甲酸脱氢酶基因的克隆及共表达载体的构建第17-30页
   ·前言第17页
   ·材料第17-19页
     ·菌株与质粒第17-18页
     ·主要试剂第18页
     ·培养基与溶液第18-19页
     ·主要仪器第19页
   ·实验方法第19-26页
   ·结果与讨论第26-29页
     ·近平滑假丝酵母和博伊丁假丝酵母基因组DNA 的获得第26页
     ·PCR 扩增产物的电泳鉴定第26页
     ·T-rcr、T-fdh 克隆测序质粒的构建与酶切鉴定第26-27页
     ·rcr 和fdh 基因序列第27-28页
     ·共表达载体pETDuet-rcr-fdh 的构建第28-29页
   ·本章小结第29-30页
第三章 密码子优化的(R)-羟基苯乙酮还原酶与甲酸脱氢酶共表达的研究及初步纯化第30-41页
   ·前言第30页
   ·材料第30-32页
     ·菌株与质粒第30页
     ·主要试剂第30-31页
     ·培养基与溶液第31页
     ·主要仪器第31-32页
   ·实验方法第32-34页
   ·结果与讨论第34-40页
     ·质粒pETDuet-rcr-fdh 转化表达菌株E. coli BL21 的结果分析第34-35页
     ·质粒pETDuet-rcr-fdh 转化表达菌株E. coli Rosetta 的结果分析第35-36页
     ·共表达条件的选择优化第36-40页
   ·本章小结第40-41页
第四章 重组菌生物转化条件的优化研究第41-51页
   ·前言第41页
   ·材料第41页
     ·菌株与质粒第41页
     ·主要试剂第41页
     ·主要仪器第41页
   ·实验方法第41-43页
     ·反应体系中底物2-羟基苯乙酮浓度的选择第41-42页
     ·反应体系中细胞浓度的选择第42页
     ·反应体系缓冲pH 值的选择第42页
     ·反应温度的选择第42页
     ·反应时间的选择第42页
     ·反应体系中细胞状态的选择第42页
     ·辅助底物甲酸钠的添加量优化第42页
     ·Zn~(2+)对重组菌不对称还原反应的影响第42-43页
   ·结果与讨论第43-48页
   ·本章小结第48-51页
致谢第51-53页
参考文献第53-57页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第57页

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