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丹参SmTCTP基因的克隆及其功能的初步研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第1章 文献综述第10-20页
   ·丹参的研究现状第10-12页
     ·丹参的主要化学成分及药理作用第10-11页
     ·丹参的生物技术研究现状第11-12页
   ·翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)基因的研究现状第12-19页
     ·翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)的发现第12-13页
     ·TCTP蛋白的结构第13页
     ·TCTP基因的结构第13-14页
     ·TCTP基因的分布与调节第14-15页
     ·TCTP的生物学特性与功能第15-18页
     ·TCTP在植物中的研究进展第18-19页
   ·本研究的目的与意义第19-20页
第2章 材料第20-23页
   ·植物材料第20页
   ·菌株与质粒第20页
   ·酶与各种生化试剂第20页
   ·常用缓冲液及培养基配方第20-21页
     ·MS培养基配方第20-21页
     ·CTAB(2×)第21页
     ·LB培养基(1L)第21页
     ·50×TAE缓冲液第21页
     ·TE缓冲液第21页
   ·引物第21-22页
   ·仪器第22-23页
第3章 方法第23-36页
   ·丹参翻译控制肿瘤蛋白基因(SmTCTP)的克隆第23-27页
     ·SmTCTP基因序列的获得第23页
     ·丹参总RNA的提取第23页
     ·cDNA第一链的获得第23-24页
     ·PCR扩增SmTCTP基因cDNA序列第24-25页
     ·植物基因组DNA的提取第25页
     ·PCR扩增SmTCTP基因DNA序列第25-26页
     ·PCR扩增产物纯化及克隆的步骤第26-27页
   ·SmTCTP的生物信息学分析第27-28页
   ·SmTCTP基因的表达分析第28-29页
     ·SmTCTP基因在丹参不同部位的表达第28页
     ·不同胁迫条件下SmTCTP基因的表达分析第28-29页
   ·SmTCTP基因过表达载体和RNAi载体的构建第29-33页
     ·SmTCTP基因过表达载体的构建第29-30页
     ·SmTCTP基因RNAi载体的构建第30-32页
     ·过表达载体和RNAi载体转化农杆菌第32-33页
   ·SmTCTP基因过表达载体和RNAi载体的遗传转化第33-34页
     ·农杆菌的活化第33页
     ·外植体的预培养第33页
     ·浸染及共培养第33-34页
     ·选择培养第34页
     ·不定芽生根及植株再生第34页
   ·阳性植株的分子检测第34-36页
     ·PCR检测第34-35页
     ·SmTCTP基因表达水平的检测第35-36页
第4章 结果与讨论第36-53页
   ·SmTCTP基因的克隆及其生物信息学分析第36-42页
     ·SmTCTP基因的克隆及结构分析第36页
     ·SmTCTP导肽的分析和预测第36-37页
     ·SmTCTP跨膜结构域的预测和分析第37-40页
     ·SmTCTP亲水性/疏水性的预测和分析第40-41页
     ·SmTCTP二级及三级结构的预测和分析第41-42页
   ·SmTCTP基因在丹参不同部位及不同胁迫条件下的表达分析第42-44页
     ·SmTCTP基因在丹参不同部位的表达第43页
     ·SmTCTP基因在不同胁迫条件下的表达第43-44页
   ·SmTCTP基因过表达载体的构建第44-45页
   ·SmTCTP基因RNAi载体的构建第45页
   ·转化植株的分子生物学检测第45-49页
     ·PCR检测第45-47页
     ·SmTCTP基因表达水平的检测第47-48页
     ·转化植株的表型分析第48-49页
   ·讨论第49-53页
     ·SmTCTP基因的克隆第49页
     ·SmTCTP基因的表达调控第49-50页
     ·基因功能的研究方法——基因的过表达和RNAi技术第50-51页
     ·DNA的甲基化第51-52页
     ·农杆菌介导的丹参遗传转化第52-53页
第5章 总结第53-55页
参考文献第55-63页
致谢第63-64页
攻读学位期间的研究成果第64页

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