| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-34页 |
| ·棉花病害 | 第13-14页 |
| ·植物病害的防治 | 第14-15页 |
| ·化学农药防治 | 第14页 |
| ·生物防治 | 第14-15页 |
| ·微生物在植物病害防治中的应用 | 第15-20页 |
| ·生防细菌 | 第15-17页 |
| ·生防放线菌 | 第17-19页 |
| ·生防真菌 | 第19-20页 |
| ·拮抗菌的生防机理 | 第20-30页 |
| ·抗生作用 | 第20-28页 |
| ·重寄生作用 | 第28-29页 |
| ·空间和营养竞争 | 第29-30页 |
| ·诱导植物系统抗性 | 第30页 |
| ·本研究的目的意义 | 第30-31页 |
| ·研究内容、技术路线及方法 | 第31-34页 |
| 第二章 棉花根际立枯病拮抗菌的筛选 | 第34-39页 |
| ·前言 | 第34页 |
| ·材料和方法 | 第34-36页 |
| ·样品 | 第34页 |
| ·病原菌菌种 | 第34页 |
| ·主要药品、试剂 | 第34-35页 |
| ·仪器及器皿 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·样品采集 | 第35页 |
| ·细菌的分离 | 第35-36页 |
| ·拮抗细菌的筛选 | 第36页 |
| ·拮抗细菌的保存 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-37页 |
| ·细菌的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·拮抗细菌的筛选 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 棉花根际立枯病拮抗菌MH1 和MH25 的鉴定 | 第39-58页 |
| ·前言 | 第39-40页 |
| ·材料与方法 | 第40-47页 |
| ·菌株 | 第40页 |
| ·主要仪器 | 第40页 |
| ·主要药品、试剂 | 第40-42页 |
| ·培养基及培养液 | 第42-43页 |
| ·MH1 和MH25 的形态及生理生化测定 | 第43-45页 |
| ·DNA 提取 | 第45页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第45-46页 |
| ·PCR 扩增16S rDNA 序列 | 第46页 |
| ·PCR 产物的纯化 | 第46-47页 |
| ·DNA 浓度的确定 | 第47页 |
| ·16S rDNA 序列测定及分析 | 第47页 |
| ·结果 | 第47-56页 |
| ·MH1 和MH25 的形态特征 | 第47-48页 |
| ·生理生化特征 | 第48-49页 |
| ·16S rDNA 序列的扩增 | 第49-50页 |
| ·序列测定、分析及系统发育树的构建 | 第50-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) MH25 Iturin A 操纵子的克隆与分析 | 第58-105页 |
| ·前言 | 第58-59页 |
| ·材料与方法 | 第59-67页 |
| ·菌株和质粒 | 第59-60页 |
| ·主要仪器 | 第60页 |
| ·主要药品、试剂 | 第60-61页 |
| ·培养基与培养液 | 第61页 |
| ·引物的设计合成 | 第61-63页 |
| ·PCR 扩增 | 第63页 |
| ·DNA 凝胶回收 | 第63-64页 |
| ·外源片断克隆到pMD18-T | 第64页 |
| ·E. coli DH5α感受态细胞制备(CaCl_2 法) | 第64页 |
| ·质粒大小快速检测 | 第64-65页 |
| ·碱裂解法小量提取质粒 | 第65页 |
| ·相应引物PCR 扩增检测 | 第65-66页 |
| ·序列测定及拼接 | 第66页 |
| ·序列的初步分析 | 第66-67页 |
| ·结果 | 第67-104页 |
| ·枯草芽孢杆菌MH25 非核糖体肽操纵子保守序列的克隆 | 第67-68页 |
| ·保守性片断M1 左端序列的克隆 | 第68-69页 |
| ·保守性片断M1 右端序列的克隆 | 第69-70页 |
| ·序列拼接及初步分析 | 第70-104页 |
| ·讨论 | 第104-105页 |
| 第五章 枯草芽孢杆菌MH25 ituB 基因的Tyr 功能域敲除 | 第105-118页 |
| ·前言 | 第105-106页 |
| ·材料与方法 | 第106-113页 |
| ·菌株及质粒 | 第106页 |
| ·主要仪器 | 第106页 |
| ·主要药品、试剂 | 第106页 |
| ·培养基及培养液 | 第106-107页 |
| ·抗药性试验 | 第107页 |
| ·Bacillus subtilis MH25 基因组DNA 提取 | 第107页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第107页 |
| ·DNA 的凝胶回收 | 第107页 |
| ·DNA 浓度的确定 | 第107页 |
| ·DH5α感受态细胞制备(CaCl_2法)及转化 | 第107-108页 |
| ·质粒的小规模提取 | 第108页 |
| ·Tyr 区域的PCR 扩增 | 第108页 |
| ·重组质粒pMDT 的构建 | 第108页 |
| ·重组质粒pMDT PCR 的验证 | 第108-109页 |
| ·重组质粒pBRMT 的构建 | 第109页 |
| ·重组质粒pBRMT 的验证 | 第109-110页 |
| ·卡那霉素抗性基因的获得及重组质粒pBRMTK 的构建 | 第110-111页 |
| ·重组质粒pBRMTK 的验证 | 第111-112页 |
| ·PCR 扩增重组质粒pBRMTK 上的tyr：：Km | 第112页 |
| ·Bacillus subtilis MH25 原生质体的制备与转化 | 第112-113页 |
| ·重组子的验证 | 第113页 |
| ·结果 | 第113-117页 |
| ·Bacillus subtilis MH25 的抗药性试验 | 第113页 |
| ·Tyr 区域的敲除策略 | 第113-114页 |
| ·Tyr 区域 DNA 序列的PCR 扩增及重组质粒pMDT 的构建 | 第114-115页 |
| ·重组质粒pBRMT 的构建 | 第115-116页 |
| ·重组质粒pBRMTK 的构建 | 第116-117页 |
| ·Bacillus subtilis MH25 菌株的原生质体形成率及再生率 | 第117页 |
| ·Bacillus subtilis MH25 Tyr 区域DNA 片断的敲除及重组子筛选 | 第117页 |
| ·讨论 | 第117-118页 |
| 第六章 结论及建议 | 第118-119页 |
| ·结论 | 第118页 |
| ·尚待完成的工作 | 第118-119页 |
| 参考文献 | 第119-131页 |
| 致谢 | 第131-132页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第132页 |
