| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 文献综述 | 第13-31页 |
| 1 猪细小病毒的病原特性 | 第13-15页 |
| 2 猪细小病毒的致病特性 | 第15-16页 |
| 3 猪细小病毒分子生物学研究 | 第16-20页 |
| ·猪细小病毒基因组特点 | 第16-17页 |
| ·猪细小病毒的非结构蛋白 | 第17-18页 |
| ·猪细小病毒的结构蛋白 | 第18-19页 |
| ·猪细小病毒基因表达的调控 | 第19-20页 |
| ·转录水平的调控 | 第19页 |
| ·转录后水平的调控 | 第19-20页 |
| 4 猪细小病毒诊断方法的研究 | 第20-24页 |
| ·病毒的分离培养 | 第20-21页 |
| ·病毒的鉴定 | 第21页 |
| ·血清学检测 | 第21-23页 |
| ·血凝及血凝抑制试验 | 第21页 |
| ·血清中和试验 | 第21页 |
| ·乳胶凝集试验 | 第21-22页 |
| ·斑点免疫金染色法 | 第22页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第22页 |
| ·银加强胶体金技术 | 第22-23页 |
| ·分子生物学诊断 | 第23-24页 |
| ·聚合酶链反应 | 第23页 |
| ·核酸探针技术 | 第23-24页 |
| ·原位杂交 | 第24页 |
| ·单克隆杭体技术 | 第24页 |
| 5 猪细小病毒疫苗的研究 | 第24-27页 |
| ·弱毒疫苗 | 第24-25页 |
| ·猪细小病毒灭活疫苗 | 第25-26页 |
| ·新型疫苗 | 第26-27页 |
| ·基因工程疫苗 | 第26页 |
| ·核酸疫苗 | 第26-27页 |
| 6大肠杆菌表达系统 | 第27-30页 |
| ·原核表达载体 | 第27-29页 |
| ·原核表达产物的后处理 | 第29-30页 |
| 7 结语 | 第30-31页 |
| 引言 | 第31-32页 |
| 试验一 猪细小病毒VP2基因在大肠杆菌中的原核表达 | 第32-42页 |
| 1 材料与方法 | 第32-37页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·病毒 | 第32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·主要仪器 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第32-33页 |
| ·猪细小病毒 DNA 的提取 | 第33页 |
| ·猪细小病毒 VP2 基因片段的扩增 | 第33-34页 |
| ·琼脂糖凝胶的回收 | 第34页 |
| ·目的片段与载体的酶切回收 | 第34页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第34-35页 |
| ·连接产物的转化 | 第35页 |
| ·重组质粒的提取 | 第35-36页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第36页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第36页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE | 第36页 |
| ·目的蛋白的Western-Blot 分析 | 第36-37页 |
| 2 结果 | 第37-40页 |
| ·猪细小病毒 VP2 基因的PCR扩增 | 第37页 |
| ·VP2重组质粒的酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·重组质粒 VP2 的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·VP2 目的蛋白的Western-Blot | 第39-40页 |
| 3 讨论 | 第40-42页 |
| 试验二 猪细小病毒NS1基因在大肠杆菌中的原核表达 | 第42-48页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·病毒 | 第42页 |
| ·试剂 | 第42页 |
| ·主要仪器 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·引物设计与合成 | 第42页 |
| ·猪细小病毒 DNA 的提取 | 第42页 |
| ·猪细小病毒 NS1基因片段的扩增 | 第42-43页 |
| ·琼脂糖凝胶的回收 | 第43页 |
| ·目的片段与载体的酶切回收 | 第43页 |
| ·目的片段与载体的连接 | 第43页 |
| ·连接产物的转化 | 第43页 |
| ·重组质粒的提取 | 第43页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第43页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第43页 |
| ·目的蛋白的SDS-PAGE | 第43-44页 |
| ·目的蛋白的Western-Blot 分析 | 第44页 |
| 2 结果 | 第44-46页 |
| ·猪细小病毒 NS1 基因的PCR扩增结果 | 第44页 |
| ·NS1 重组质粒的酶切鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组质粒 NS1 的诱导表达 | 第45页 |
| ·NS1 目的蛋白的 Western-blotting | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-48页 |
| 试验三 猪细小病毒VP2、NS1重组蛋白的处理及纯化 | 第48-52页 |
| 1 材料与方法 | 第48-49页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·主要试剂的配制 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-49页 |
| ·VP2、NS1 重组蛋白的大量表达 | 第48页 |
| ·VP2 重组蛋白的变、复性及其纯化 | 第48-49页 |
| ·NS1菌体蛋白的处理 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-51页 |
| ·猪VP2 表达蛋白的变、复性及纯化分析 | 第49-50页 |
| ·NS1重组蛋白的低温诱导表达 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| 试验四 猪细小病毒 VP2、NS1间接ELISA的初步建立 | 第52-58页 |
| 1 材料与方法 | 第52-53页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·血清与试剂 | 第52页 |
| ·主要仪器 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-53页 |
| ·VP2、NS1 间接ELISA 程序的建立 | 第52页 |
| ·间接ELISA 最佳反应条件的确定 | 第52页 |
| ·血清吸附 | 第52页 |
| ·特异性试验 | 第52-53页 |
| ·敏感性试验 | 第53页 |
| ·临床样品的初步检测 | 第53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·间接ELISA最佳反应条件的确立 | 第53-55页 |
| ·特异性试验 | 第55页 |
| ·敏感性试验 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA的初步应用 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-65页 |
| 致谢 | 第65-67页 |
| 个人简介 | 第67页 |
| 攻读学位期间发表录用论文情况 | 第67页 |
